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黑木耳栽培过程中胞外酶活性变化


黑木耳栽培过程中胞外酶活性变化 以 5 个黑木耳(Auricularia auricula)栽培菌株为实验材料, 研究了黑木耳栽 培过程中 4 种胞外酶活性的变化。结果表明,不同菌株胞外酶活性不同,但在整 个生长发育过程中变化规律基本一致:即随着黑木耳子实体的生长发育,羧甲基 纤维素酶 (CMCase) 和滤纸纤维素酶 (FPase) 的活性逐渐增强,并在子实体成 熟时最高,子实体采收后活性迅速下降;漆酶(LAC) 、多酚氧化酶(POD) 活 性在菌丝生长阶段较高,随着子实体的生长发育酶活下降。 黑木耳; 栽培; 胞外酶; 漆酶; 多酚氧化酶; 羧甲基纤维素酶; 滤纸纤维 素酶 黑木耳(Auricularia auricula)食味鲜美,含有丰富的营养成分,具有很高的 食、药用价值。近年来,随着人们生活水平的提高,对木耳的消费需求激增,木 耳总产量也随之快速增长。 但大量菌株退化、老化和不利变异致使栽培性状难以 预测,造成栽培特性、栽培产量的不确定性[1]。有研究报道,侧耳(Pleurotus)和 金针菇(Flammulina velutipes)菌丝羧甲基纤维素酶活力与子实体产量成正相关 [2];以木屑为主料栽培的木耳在子实体形成期间胞外纤维素酶的活性逐渐上升 [3];黑木耳的纤维素酶、半纤维素酶活性与栽培基质的降解速率、子实体的产 量有关[4],表明食用菌胞外酶活力变化在栽培过程中存在一定的规律。研究黑 木耳胞外酶在栽培过程中的活性变化规律对菌种优劣鉴定十分必要, 可为品种选 育、菌种的鉴定和菌种保藏提供理论依据[2]。本试验选择栽培性状差异较大的 5 个黑木耳优良菌株,研究栽培过程中胞外酶活性变化的规律,试验结果如下。 1 材料与方法 1.1 供试菌株 黑木耳 1~5 号菌株分别为 8808、黑 29、981、黑威 2 号、黑威 4 号,均由 黑龙江省科学院微生物研究所菌种保藏中心提供。 1.2 培养基配方 母种培养基(/L) :土豆 200 g 煮汁,葡萄糖 20.0 g,磷酸二氢钾 3.0 g,硫 酸镁 1.5 g,蛋白胨 0.5 g,维生素 B?1 10.0 mg,琼脂粉 14.0 g,pH 自然。 原种、栽培种培养料:木屑 78%,麸皮 20%,石膏 2%,含水量为 65%,pH 自然。 1.3 试验方法 原种瓶(500 mL 葡萄糖空瓶)装培养料折合干料约 140 g(湿重 400 g) ,栽 培袋(17 cm× 33 cm 聚乙烯折角袋)装培养料折合干料约 280 g(湿重 800 g) , 121 ℃灭菌 2 h,取母种培养基活化菌种 3 块(3.0 mm× 3.0 mm)接于原种培养 料,25 ℃培养 30 d,菌丝发满后以2%的接种量接入栽培种培养料中,25 ℃培 养室中培养 40 d,每个菌株各接种 100 袋。黑 29、981 为晚熟品种,提前一周催 耳芽,催耳芽、展片期的管理及采收标准同文献 [5]。分别在菌丝满袋期、原基 形成期、耳芽期、耳片生长期、一潮耳成熟期、一潮耳采收后 8 d 和二潮耳成熟 期(即接种后第 40、68、74、92、100、108 和 115 天)取样。每个菌株每个时期 取样 3 袋,分别压碎混匀,用于粗酶液制备。 1.4 粗酶液制备 250 mL 三角瓶中装入打碎混匀样品 5.0 g,加蒸馏水 25 mL,25 ℃下 150 r/min 浸提 4 h,于 4 ℃ 2 500 g 离心 10 min,上清为粗酶液,4 ℃冰箱短期保 存。酶活测定设 1 个空白对照和 3 个重复。 1.5 酶


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