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α-环糊精葡萄糖基转移酶催化合成α-熊果苷_论文

第 1 3卷第 4 期  2 0 1 5年 7月  生 物 加 工 过 程  Vo l _l 3   No . 4   C h i n e s e   J o u na r l   o f   B i o p r o c e s s   E n g i n e e r i n g   J u 1 . 2 0 1 5   d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 2 — 3 6 7 8 . 2 0 1 5 . 0 4 . 0 0 7   环 糊 精 葡 萄 糖 基 转 移 酶 催化 合成  一 熊 果 苷  赵 如 奎  , 吴 剑 荣  , 詹 晓北  , 朱  莉  ( 1 . 江 南大 学 生物工 程学 院糖 化 学与 生物技 术教 育部 重点 实验 室 , 江苏 无锡 2 1 4 1 2 2 ;   2 . 无锡格 莱克 斯 生物科 技有 限公 司 , 江苏 无锡 2 1 4 1 2 5 )   摘 要: 以对苯二酚和麦芽糊 精为底物 , 通过 O L 一 环糊精 葡萄糖基 转移酶和淀粉葡萄糖苷酶的 两步酶法反应体 系催  化合成  一 熊果苷 。优化后 的催化条件 : 以葡萄糖 3量 " - ( D E ) 值为 8 %~1 0 %的麦 芽糊精作 为供 体底物 , 麦 芽糊 精 6 0   L, 对苯二酚 1 5 0   m mo l / L , 缓 冲液 p H   6 . 0 , 在4 0℃下反应 2 4   h 。在 此反 应条件 下, O t 一 熊果苷 的产量为 3 . 1 7   L,   对苯二酚转化率为 7 . 7 7 %。通过萃取法对  一 熊果苷进行 了初步分 离, 再 经高效液相 色谱一 电喷 雾 串联 质谱技 术进  行 了结 构 测 定 , 确 定 产 物 为  一熊果 苷 。   关键词 : O t 一 熊果 苷 ; 酶催化 ; 生物 合 成 ; 对苯二酚 : 麦 芽糊 精   中图分类号 : Q 5 5 5   . 4   文献 标 志 码 : A   文章编号 : 1 6 7 2 — 3 6 7 8 ( 2 0 1 5 ) 4— 0 0 0 3 6 — 0 6   - Ar bu t i n   s y n t he s i s   b y   - c y c l o de x t r i n   g l y c o s y l t r a n s f e r a s e   Z HAO   Ru k u i  , WU  J i a n r o n g   , Z HAN   Xi a o b e i   , Z HU   L i   ( 1 . K e y   L a b o r a t o r y   o f   C a r b o h 3   d r a t e   C h e mi s t r y   a n d   B i o t e c h n o l o g y   o f   t h e   Mi n i s t r y   o f   E d u c a t i o n , S c h o o l   o f   B i o t e c h n o l o g y ,   J i a n g n a n   U n i v e r s i t y , Wu x i   2 1 4 1 2 2 , C h i n a ; 2 . Wu x i   G r a me e n   A l e x   B i o t e c h n o l o g y   C o . L t d . , Wu x i   2 1 4 1 2 5 , C h i n a )   Abs t r ac t : O d — Ar b u t i n  wa s  s y n t h e s i z e d  by   - c y c l o de x t r i n  g l y c o s y h r a n s f e r a s e  a n d  a my l o  u c 0 s i d a s e, wi t h   h y d r o q u i n o n e  a n d  ma l t o d e x t r i n  a s  s u b s t r a t e s . Th e  r e a c t i o n s  we r e  c a r r i e d  o u t  i n  a n  a q u e o u s  s y s t e m  c o n t a i n i n g   h y d r o q u i n o n e   a s   a c c e p t o r   a n d   ma l t o d e x t r i n   a s   d o n o r   s u b s t r a t e   mo l e c u l e s . A  t wo — s t e p   e n z y ma t i c   r e a c t i o n   s y s t e m  c o mp is r i n g   o f   O / 一 c y c l o d e x t r i n   g l y c o s y l t r a n s f e r a s e   a n d   a my l o g l u c o s i d a s e   h e l p e d   t o   a t t a i n   a   h i g h   y i e l d   o f  - a r b u t i n . T h e   r e a c t i o n   c o n d i t i o n s   w e r e   o p t i mi z e d   wi t h   s i n g l e   f a c t o r

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