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乙醇对环糊精葡萄糖基转移酶催化作用的影响_论文

Vo .   131 21 00年 6月  高 等 学 校 化 学 学 报  CHEMI  J CAI OURNAL OF CHI     NES   E UNI VERS T E   IIS No 6 .  l 9 一1 9   1O l4 乙醇对 环 糊 精 葡萄 糖基 转 移 酶催 化 作 用 的影 响  王  亮  , 正彪  , 一 顾 程 力 ,洪 雁  ( .江南大学食品科学 与技术 国家重点实验室 , .食品科学 与技术学院 , 1 2 无锡 24 2 ) 112  摘要 一 采用 紫外 吸收 光 谱 法 测 定 了 乙 醇 、 已烷 与 一 糊 精 包 合 反 应 稳 定 常 数 及 自 由能 变化 , 定 乙 醇 与  环 环 确 环糊精的包合反应 稳定 常数 K = . 1l mo,A 4 7 _ l G=一 .4 k/ o;环 己烷与 卢环 糊精 包合 反应 的 K = / 3 8 J t l o 一 s  l.6L m l G=一 .7k/ o.环 己烷 与口环糊精 的结合能力大大高于 乙醇 ,故用 乙醇提高其产率 的机  9 5  / o,A 7 3 Jt 1 o . 理不同于传统工艺 中所添加的环 己烷.通 过测定 乙醇对环糊精 葡萄糖基转移酶催 化作用 的影响进一步探 究  其作用机理.结果表明 ,乙醇不仅能提高环糊精葡萄糖基转移酶环化作用的活力 ,并在一定程度上阻止对转  化 环糊精有抑制作用 的小分子糖的形成 ,还可 以减轻环糊精 葡萄糖 基转移 酶对 环糊 精的水解 及偶合 作用 ,   从而提高环糊精 的产率 .   关键词  乙醇 ;环糊精 葡萄糖基转移酶 ; 环化作用 ; 偶合作用  中图 分 类号 0 2 .2 6 13 6 9 1 ;O 4 .  文 献标 识码 A   文章编号 0 5 —70 2 1 )6 19  ̄   2 1 9 (0 0 0 —10 5 0 环糊 精葡萄糖 基转 移酶 ( yldxr  lcsha s rs,C T酶 ) 一种 具有 几 种催 化 功 能 的多糖  C c etng oy rnf ae G o i y e 是 合成 酶 , 酶 可经水解 及歧化 等作用 降解 淀粉 , 该 再将 淀粉 、 原及 麦 芽低 聚糖 等 通 过环 化 作用 生成 环  糖 糊精  .环糊 精 ( yldx i,c 是 由 D 吡哺 型葡萄糖 单元通 过 一 1  )糖 苷键 连接而成 的一类 环  C c etn D) o r 一 (— 一 状低聚糖 , 据葡 萄糖残基 数 目分为 一 一 根 , 和 —D( 别 由 6 7和 8个 葡萄 糖基 构成 )   C 分 , ,其 中 以 /C   3 D 一 的应用 开发最 为广泛 J D具有 一个环外 亲水 、 内疏 水且 有一定 尺寸 的立体 手性空 腔 , 与多种有  .C 环 可 机化合 物形 成包 络复合 物 , 生成沉 淀 ~ .因此 ,   在酶促 反 应生 成 C D的过程 中 , 添加 环 己烷 、甲苯  需 和丙酮等有机化合物 , 生成不溶于水的包络复合物 , 以减少 C T酶的破坏作用 , G 提高 C D转化率. 传  统工艺中最常用的有机溶剂为环己烷  . 本研究组 的研究发现 , 与传统有机溶液剂相 比, 乙醇能大幅  提 高酶促反 应生成 C D的产 率 , 且具有 无毒 、 本低及 回收率 高等优 点 ,从而促 进 C 成 D在食 品 、 化妆 品  和药 品 中的应 用 .本 文 通 过考 察 乙 醇 与 一 D的 包 络作 用 及在 C T酶催 化 淀 粉 转化 C 的过 程 中对  C G D C T酶催 化作用 的影 响 , G 探究 了其 提高 C D产率 的机理 .   1 实验 部分    1 1 试剂 与仪 器  . C T酶( G 曲阜市 天利 药用辅料 有 限公 司 ) 卢 环糊精 标准 品 ( i 公 司 )  一 ;一 Sg ma ; 环糊精样 品 ( 基纯度  干 9% , 8 广东 省郁南 县永光 味精 实业有 限公 司) ;可溶 性 淀粉 ( R. ,国药 集 团化 学 试 剂有 限 公 司 )  A. 级 ; 玉米 淀粉 ( 山东 省 寿光玉米 开发 有 限公 司 ) 麦 芽 糖 ( . . ,国药 集 团化 学试 剂 有 限公 司 ) 其 它 试  ; BR级 ; 剂均 为分析纯 , 验用水 为去 离子蒸馏 水 .T 一 0 实 U1 0双 光束 紫 外一 9 可见 分光 光 度计 ( 京 普析 通用 仪 器  北 有限责任 公 司) D H .0 ; S Z30多用水浴 恒温振 荡器 ( 江苏 省太仓市 实验设 备厂 ) L-D l ;I L -B离心机 ( l i 无锡  市瑞江分 析仪 器有 限公 司 ) 旋转 式恒 温振荡 器 ( ; 江苏 省太仓 市实 验设备 厂 ) .   1 2 实验 方法  . 1 2 1 C T酶 活性测定 . .  G 称 取 一定 量 的 可溶性 淀 粉 , 入 甘氨 酸一 a H缓 冲 液 ( H=8 5 0 2 m l  加 NO p . , .  o / L ,以下简 称甘氨 酸缓 冲液 ) 制成体 积分数为 4 的溶 液 ,于沸 水浴 中加 热 溶解后 ,精确 吸取 10mL 配 % .    收稿 日期 : 0 90 -1 20 -73 .   基金项 目:国家“ 八六三” 计划项 目( 批准号 : 0 6 A 0 3 5 、教育部创新团队计划 ( 20 A 1Z 3 ) 批准号 :IT 6 7 、高等学校学科创新引智  R 02 ) 计划 ( 批准号 : 0 0 9 和江南大学 自主科研计划资助. B72 )   联系人简介 :顾正彪 ,男 , 博士 ,教授 ,博士生导师 ,主要从事食品资源的开发与利用研究 .Ema :odt c@yh oc  - i

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