当前位置:首页 >> 农林牧渔 >>

70种常用培养基配方大全


常用培 养基配方
目 录

01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38

糖 发酵 管 ONPG 培 养基 西 蒙氏 柠 檬 酸盐 培 养 基 缓

冲葡 萄 糖 蛋白 胨 水(MR 和 VP试 验用 ) 克 氏柠 檬 酸 盐培 养 基 丙 二酸 钠 培 养基 葡 葡糖 铵 培 养基 Hugh- Leifson培 养基 (O/F 试 验用 ) 马 尿酸 钠 培 养基 营 养明 胶 苯 丙氨 酸 培 养基 氨 基酸 脱 羧 酶试 验 培 养基 蛋 白胨 水 (靛 基质 试 验 用) 硫 酸亚 铁 琼 脂(硫 化氢 试 验 用) 尿 素琼 脂 氰 化钾 (KCN)培 养基 氧 化酶 试 验 硝 酸盐 培 养 基 细 胞色 素 氧 化酶 试 验 过 氧化 氢 酶 试验 过 氧化 物 酶 试验 磷 酸盐 缓 冲 液 明 胶磷 酸 盐 缓冲 液 乳 酸 -苯 酚溶 液 肉 浸液 肉 汤 肉 浸液 琼 脂 牛 肉 (或 牛心 )消 化汤 血 消化 汤 豆 粉琼 脂 血 琼脂 营 养琼 脂 营 养肉 汤 乳 糖胆 盐 发 酵管 乳 糖发 酵 管 EC肉 汤 缓 冲蛋 白 胨 水(BP) 氯 化镁 孔 雀 绿增 菌 液(MM ) 四 硫磺 酸 钠 煌绿 增 菌 液(TTB)

39 四 硫磺 酸 钠 煌绿 增 菌 液(换 用方 法 ) 40 亚 硒酸 盐 胱 氨酸 增 菌 液(SC) 41 GN 增 菌液 42 肠 道菌 增 菌 肉汤 43 亚 硫酸 铋 琼 脂(BS) 44 DHL琼 脂 45 HE琼 脂 46 SS 琼 脂 47 WS 琼 脂 48 麦 康凯 琼 脂 49 伊 红美 蓝 琼 脂(EM B) 50 三 糖铁 琼 脂(TSI) 51 三 糖铁 琼 脂(换 用方 法 ) 52 克 氏双 糖 铁 琼脂(KI) 53 克 氏双 糖 铁 琼脂(换 用方 法 ) 54 葡 萄糖 半 固 体发 酵 管 55 5% 乳 糖发 酵 管 56 CAYE 培 养基 57 Honda 氏 产毒 肉 汤 58 Elek氏 培养 基 (毒 素测 定 用) 59 氯 化镁 孔 雀 绿羧 苄 青 霉素 培 养 基 60 胰 蛋白 胨 水 61 Rustigian氏 尿素 培 养 液 62 氯 化钠 结 晶 紫增 菌 液 63 氯 化钠 蔗 糖 琼脂 64 嗜 盐菌 选 择 性琼 脂 65 3.5% 氯 化钠 三 糖 铁琼 脂 66 氯 化钠 血 琼 脂 67 3.5% 氯 化钠 生 化 试验 培 养 基 68 改 良磷 酸 盐 缓冲 液(小 肠结 肠 炎 耶尔 森 氏 菌 专用 ) 69 CIN- 1培 养基 70 嗜 盐性 试 验 培养 基

01 糖 发 酵 管 成 分:
牛 肉 膏5g 蛋 白 胨10g 氯 化 钠3g 磷 酸 氢二 钠(Na 2 HP O 4 · 12H 2 O)2g 0.2% 滇 麝 香草 酚 蓝溶 液 12mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4

高 压 灭菌 15mi n. 放 成 斜面 . 试 验方 法 :挑 取 少量 琼 脂培 养 物 接种 ,于 36 ± 1 ℃培 养 4d, 每 天 观察 结 果 .阳 性 者斜 面 上有 菌 落 生长 ,培 养 基 从 绿色 转 为蓝 色 .

(M R和 VP试 ) 04 缓 冲 葡 萄 糖 蛋 白 胨水(M R VP 验 用) 成 分:
磷 酸 氢二 钾 5g 多 胨 7g 葡 萄 糖5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .0 制 法: 溶 化 后校 正 pH, 分 装 试管 ,每 管 1mL,1 2 1 ℃ 高 压 灭 菌15mi n. 甲 基红 (MR) 试 验 :自 琼 脂斜 面 挑取 少 量 培养 物 接 种 本 培养 基 中 ,于36 ± 1℃ 培 养 2~ 5d, 哈 夫 尼亚 菌 则 应 在 22 ~ 25 ℃ 培 养 .滴 加 甲基 红 试剂 一 滴 ,立 即 观察 结 果 .鲜 红 色为 阳 性 ,黄 色 为阴 性 . 甲 基红 试 剂 配法: 10mg 甲 基 红溶 于 30mL 95% 乙 醇 中 ,然 后 加入 20mL 蒸 馏 水 . V-P试 验 :用 琼 脂培 养 物接 种 本 培养 基 中 ,于 36 ± 1 ℃ 培 养2 ~ 4d. 哈 夫 尼亚 菌 则应 在 22 ~ 25 ℃ 培 养 .加 入 6% α -萘 酚 -乙 醇 溶液 0.5mL 和 40% 氢 氧 化钾 溶 液 0.2mL ,充 分 振摇 试 管 ,观 察 结果 .阳 性 反应 立 刻或 于 数 分 钟内 出 现红 色 ,如 为 阴性 ,应 放 在36 ± 1℃ 下 培 养 4h 再 进 行观 察 .

制 法:
1 葡 萄 糖发 酵 管按 上 述 成分 配 好 后 ,按 0.5% 加 入 葡 萄 糖,分 装 于有 一 个倒 置 小 管的 小 试 管内 ,121 ℃ 高 压 灭 菌15mi n. 2 其 他 各种 糖 发酵 管 可 按上 述 成 分配 好 后,分 装 每 瓶100 mL ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 另 将 各种 糖 类分 别 配 好10% 溶 液,同 时 高压 灭 菌 .将 5mL 糖 溶 液加 入 于 100m L 培 养 基内 ,以 无 菌操 作 分装 小 试 管 . 注: 蔗 糖 不纯 ,加 热 后会 自 行水 解 者 ,应 采 用过 滤 法除 菌. 试 验方 法 :从 琼 脂斜 面 上挑 取 小 量培 养 物 接种 ,于 36 ℃ ± 1℃ 培 养 ,一 般 观察 2 ~3d. 迟 缓 反应 需 观察 14 ~ 30d.

02 ONP G 养 基 G培 成 分:
邻 硝 基酚 β -D- 半 乳 糖昔 (ON P G )60 mg (O-Ni troph en yl -β -D-ga l actop yran o si de) 0.01m ol /L 磷 酸 钠缓 冲 液 (pH 7 .5)10 m L 1% 蛋 白 胨水 (P H7 .5)3 0m L 制 法:将 ONP G 溶 于 缓冲 液 内 ,加 入 蛋白 胨 水,以 过 滤 法 除 菌,分 装 于10mm ×75mm 试 管 ,每 管 0.5mL ,用 橡 皮 塞 塞紧 . 试 验方 法 :自 琼 脂斜 面 上挑 取 培 养物 1满 环 接种 ,于 36 ± 1 ℃培 养 1 ~ 3h 和 24h 观 察 结果 .如 果β -半 乳 糖 苷 酶 产生 ,则 于1 ~ 3h 变 黄 色,如 无 此酶 则 24h 不 变 色 .

05 克 氏 柠 檬 酸 盐 培 养基 成 分:
柠 檬 酸钠 3g 葡 萄 糖0.2g 酵 母 浸膏 0.5g 单 盐 酸半 胱 氨酸 0.1g 磷 酸 二氢 钾 1g 氯 化 钠5g 0.2% 酚 红 溶液 6mL 琼 脂 15g 蒸 馏 水100 0m L 制 法: 加 热 溶解 ,分 装 试管 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 放 成 斜 面. 试 验方 法 :用 琼 脂培 养 物接 种 整 个斜 面 ,在36 ± 1℃ 培 养 7d, 每 天 观察 结 果.阳 性 者培 养 基变 为 红 色 .

03 西 蒙 氏 柠 檬 酸 盐 培养 基 成 分:
氯 化 钠5g 硫 酸 镁(MgS O 4 · 7H 2 O)0.2g 磷 酸 二氢 铵1g 磷 酸 氢二 钾1g 柠 檬 酸钠 5g 琼 脂20g 蒸 馏 水100 0m L 0.2% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 40mL pH6 .8 制 法:先 将 盐类 溶 解于 水 内 ,校 正 pH, 再 加 琼脂 ,加 热 溶 化.然 后 加入 指 示剂 ,混 合 均匀 后 分装 试 管 ,12 1 ℃

06 丙 二 酸 钠 培 养 基 成 分:
酵 母 浸膏 1g 硫 酸 铵2g 磷 酸 氢二 钾 0.6g

磷 酸 二氢 钾0.4g 氯 化 钠2g 丙 二 酸钠 3g 0.2% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 12mL 蒸 馏 水100 0m L pH6 .8 制 法:先 将 酵母 浸 膏和 盐 类 溶解 于 水 ,校 正 pH 后 再 加 入 指 示剂 ,分 装 试管 ,121 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 试 验方 法 :用 新 鲜的 琼 脂培 养 物 接种 ,于 36 ±1 ℃ 培 养48h , 观 察 结果 .阳 性 者由 绿 色变 为 蓝 色 .

试 验方 法 :从 斜 面上 挑 取小 量 培 养物 作 穿 刺接 种 ,同
时 接 种两 支 培养 基 ,其 中 一支 于 接种 后 滴 加溶 化 的 1% 琼 脂 液于 表 面 ,高 度 约1cm, 于 36 ± 1 ℃ 培 养.

09 马 尿 酸 钠 培 养 基 成 分:
马 尿 酸钠 1g 肉 浸 液100 mL 制 法: 将 马 尿酸 钠 溶解 于 肉 浸液 内 ,分 装 于小 试 管内 , 并 于 管壁 画 一横 线 .以 标 志管 内 液面 高 度 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌 20mi n. 试 剂: 三 氯 化铁 (F eC l 3 · 6H2 O)1 2g ,溶 于2% 盐 酸 溶 液 100m L 中 即 成. 试 验方 法 :用 纯 培养 物 接种 ,于42 ℃ 培 养48h , 观 察 培 养 液 是否 到 达试 管 壁 上记 号 处 ,如 不 足时 ,用 蒸 馏水 补 足 至原 量 .经 离 心沉 淀 ,吸 取 上清 液 0.8mL , 加 入 三 氯 化 铁试 剂 0.2mL ,立 即 混合 均 匀 ,经 10 ~ 15mi n, 观 察 结 果.结 果 :出 现 恒久 之 沉淀 物 为 阳性 .

07 葡 葡 糖 铵 培 养 基 成 分:
氯 化 钠5g 硫 酸 镁(MgS O 4 · 7H 2 O)0.2g 磷 酸 二氢 铵1g 磷 酸 氢二 钾1g 葡 萄 糖2g 琼 脂20g 蒸 馏 水100 0m L 0.2% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 40mL pH6 .8 制 法:先 将 盐类 和 糖溶 解 于 水内 ,校 正pH, 再 加 琼脂 , 加 热 溶化 ,然 后 加入 指 示剂 ,混 合 均匀 后 分装 试 管,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n, 放 成 斜面 . 试 验方 法 :用 接 种针 轻 轻触 及 培 养物 的 表 面 ,在 盐 水 管 内 做成 极 稀的 悬 液 ,肉 眼 观察 不 见混 浊 ,以 每 一接 种 环 内含 菌 数在 20 ~ 100 之 间 为宜 .将 接 种环 灭 菌后 挑 取 菌液 接 种,同 时 再以 同 法接 种 普 通斜 面 一 支作 为 对 照.于 36 ± 1 ℃ 培 养24h . 阳 性 者葡 萄 糖铵 斜 面 上有 正 常 大小 的 菌落 生 长 ;阴 性 者不 生 长 ,但 在 对照 培 养 基 上 生长 良 好.如 在 葡萄 糖 铵斜 面 生 长极 微 小 的菌 落 可 视 为阴 性 结果 . 注: 容 器 使用 前 应用 清 洁 液浸 泡 .再 用 清水 ,蒸 馏 水冲 洗 干 净,并 用 新棉 花 做成 棉 塞 ,干 热 灭菌 后 使用 .如 果 操 作 时不 注 意,有 杂 质污 染 时 ,易 造 成假 阳 性的 结 果 .

10 营 养 明 胶 成 分:
蛋 白 胨5g 牛 肉 膏3g 明 胶 120g 蒸 馏 水100 0m L pH6 .8 ~ 7.0 制 法: 加 热 溶解 ,校 正 至pH7 .4 ~ 7.6, 分 装 小管 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 10mi n, 取 出 后迅 速 冷却 ,使 其 凝固 .复 查 最 终 pH 应 为 6.8 ~ 7.0. 试 验方 法 :用 琼 脂培 养 物穿 刺 接 种 ,放 在 22 ~ 25 ℃ 培 养 ,每 天 观察 结 果 ,记 录 液化 时 间 .或 放 在 36 士 1 ℃ 培 养 ,每 天 取出 ,放 冰 箱内 30mi n 后 再 观察 结 果 .

11 苯 丙 氨 酸 培 养 基 成 分:
酵 母 浸膏 3g D L -苯 丙 氨酸 (或 L- 苯 丙 氨酸 1g)2g 磷 酸 氢二 钠 1g 氯 化 钠5g 琼 脂 12g 蒸 馏 水100 0m L 制 法: 加 热 溶解 后 分装 试 管 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n, 使 成 斜面 . 试 验方 法 :自 琼 脂斜 面 上挑 取 大 量培 养 物 ,移 种 于苯 丙 氨 酸琼 脂 ,在 36 ± 1℃ 培 养 4h 或 18 ~24h . 滴 加 10% 三 氯 化铁 溶 液 2~ 3 滴 ,自 斜 面培 养 物上 流 下 ,苯 丙 氨 酸 脱 氨酶 阳 性者 呈 深 绿色 .

08 Hugh-Leifson 养 基(O/F 验 用) (O/F ) Hugh-Leifson培 (O/F试 成 分:
蛋 白 胨2g 氯 化 钠5g 磷 酸 氢二 钾0.3g 琼 脂4g 葡 萄 糖10g 0.2% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 12mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .2 制 法:将 蛋 白胨 和 盐类 加 水 溶解 后 ,校 正pH 至 7.2. 加 入 葡 萄糖 ,琼 脂 煮沸 ,溶 化 琼脂 ,然 后 加入 指 示剂 .混 匀 后,分 装 试管 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n, 直 立 凝固 备 用 .

12 氨 基 酸 脱 羧 酶 试 验培 养 基 成 分:
蛋 白 胨5g 酵 母 浸膏 3g 葡 萄 糖1g 蒸 馏 水100 0m L 1.6% 滇 甲 酚紫 -乙 醇 溶液 1mL L- 氨 基 酸或 DL- 氨 基 酸 0.5 或 1g/10 0 mL pH6 .8 制 法:除 氨 基酸 以 外的 成 分 加热 溶 解 后 ,分 装 每瓶 100m L, 分 别 加入 各 种氨 基 酸 :赖 氨 酸,精 氨 酸和 鸟 氨 酸.L- 氨 基 酸按 0.5% 加 入 ,DL -氨 基 酸按 1% 加 入 .再 行 校 正pH 至 6.8. 对 照 培养 基 不加 氨 基 酸 .分 装 于灭 菌 的 小 试 管内 ,每 管0.5mL ,上 面 滴加 一 层液 体 石 蜡 ,11 5 ℃高 压 灭菌 10mi n. 试 验方 法 :从 琼 脂斜 面 上挑 取 培 养物 接 种 ,于 36 ± 1 ℃培 养 18 ~ 24h , 观 察 结果 .氨 基 酸脱 羧 酶阳 性 者 由 于 产 碱,培 养 基应 呈 紫色 .阴 性 者无 碱 性产 物 ,但 因 葡 萄 糖 产酸 而 使培 养 基 变为 黄 色 .对 照 管应 为 黄色 .

氯 化 钠5g 琼 脂 12g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法: 加 热 溶解 ,校 正pH, 分 装 试管 ,11 5 ℃ 高 压 灭菌 15mi n, 取 出 直立 候 其凝 固 . 试 验方 法 :挑 取 琼脂 培 养物 ,沿 管 壁穿 刺 ,于 36 ± 1℃ 培 养 1~ 2d, 观 察 结果 .产 硫 化氢 者 使培 养 基 变为 黑 色. 注 :肠 杆 菌科 细 菌测 定 硫 化氢 的 产 生 ,应 采 用三 糖 铁 琼 脂 或本 培 养基 .

15 尿 素 琼 脂 成 分:
蛋 白 胨1g 氯 化 钠5g 葡 萄 糖1g 磷 酸 二氢 钾 2g 0.4% 酚 红 溶液 3mL 琼 脂 20g 蒸 馏 水100 0m L 20% 尿 素 溶液 100m L pH7 .2 ± 0.1 制 法: 将 除 尿素 和 琼脂 以 外 的成 分 配 好 ,并 校 正pH, 加 入 琼脂 ,加 热 溶化 并 分装 烧 瓶 .12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 冷 至50 ~55 ℃ ,加 入 经除 菌 过滤 的 尿 素溶 液 . 尿 素 的最 终 浓度 为 2% , 最 终 pH 应 为 7.2 ± 0.1. 分 装 于 灭 菌 试管 内 ,放 成 斜面 备 用. 试 验方 法 :挑 取 琼脂 培 养物 接 种 ,在 36 ± 1 ℃ 培 养 24h , 观 察 结果 .尿 素 酶阳 性 者由 于 产 碱而 使 培 养基 变 为 红 色.

( ) 13 蛋 白 胨 水(靛 基 质 试 验 用) 成 分:
蛋 白 胨(或 胰 蛋白 胨)20 g 氯 化 钠5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:按 上 述成 分 配制 ,分 装 小试 管 ,121 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

靛 基质 试 剂: 柯 凡克 试 剂: 将5g 对 二 甲氨 基 苯甲 醛 溶 解于 75mL
戊 醇 中.然 后 缓慢 加 入浓 盐 酸 25mL . 欧-波 试剂 :将 1g 对 二 甲氨 基 苯甲 醛 溶 解于 95mL 95% 乙 醇 内 .然 后 缓慢 加 入浓 盐 酸 20mL . 试 验方 法 :挑 取 小量 培 养物 接 种 ,在 36 ± 1 ℃培 养 1~ 2d, 必 要 时可 培 养 4 ~ 5d. 加 入 柯凡 克 试剂 约 0.5mL ,轻 摇 试管 ,阳 性 者于 试 剂层 呈 深 红色 ;或 加 入 欧-波 试 剂约 0.5mL ,沿 管 壁流 下 ,覆 盖 于培 养 液表 面 , 阳 性 者于 液 面接 触 处 呈玫 瑰 红 色 . 注: 蛋 白 胨中 应 含有 丰 富 的色 氨 酸 .每 批 蛋白 胨 买来 后,应 先 用已 知 菌种 鉴 定 后方 可 使 用 .

(KC N)培 16 氰 化 钾(KC N) 养 基 成 分:
蛋 白 胨10g 氯 化 钠5g 磷 酸 二氢 钾 0.225 g 磷 酸 氢二 钠 5.64g 蒸 馏 水100 0m L 0.5% 氰 化 钾溶 液20mL pH7 .6 制 法: 将 除 氰化 钾 以外 的 成 分配 好 后 分装 烧 瓶,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 放 在 冰箱 内 使其 充 分 冷却 .每 100 mL 培 养 基加 入 0.5% 氰 化 钾溶 液 2.0mL ( 最 后 浓 度 为 1:100 00 ),分 装 于12mm × 100m m 灭 菌 试管 ,每 管 约 4mL ,立 刻 用灭 菌 橡皮 塞 塞 紧 ,放 在 4℃ 冰 箱 内, 至 少 可保 存 两个 月 .同 时 ,将 不 加氰 化 钾的 培 养 基作 为 对 照培 养 基 ,分 装 试管 备 用.

( ) 14 硫 酸 亚 铁 琼 脂(硫 化 氢 试 验 用) 成 分:
牛 肉 膏3g 酵 母 浸膏 3g 蛋 白 胨10g 硫 酸 亚铁 0.2g 硫 代 硫酸 钠0.3g

17 氧 化 酶 试 验 试 剂:
1% 盐 酸 二甲 基 对苯 二 胺 溶液 :少 量 新鲜 配 制 ,干 冰 箱 内 避 光保 存. 1% α-萘 酚 -乙 醇 溶液 . 试 验方 法 :取 白 色洁 净 滤纸 沾 取 菌落 .加 盐 酸二 甲 基 对 苯 二胺 溶 液一 滴 ,阳 性 者呈 现 粉红 色 ,并 逐 渐加 深 ; 再 加α -萘 酚 溶液 一 滴,阳 性 者于 半 分钟 内 呈 现鲜 蓝 色.阴 性 于两 分 钟内 不 变 色 .以 毛 细吸 管 吸取 试 剂 ,直 接 滴 加于 菌 落上 ,其 显 色反 应 与以 上 相 同 .

净 试 管内 ,滴 加 3% 过 氧 化氢 溶 液2mL, 观 察 结果 . 结 果: 于 半 分钟 内 发生 气 泡 者为 阳 性 ,不 发 生气 泡 者 为 阴 性.

21 过 氧 化 物 酶 试 验 试 剂:
2% 儿 茶 酚溶 液 . 3% 过 氧 化氢 溶 液 . 试 验方 法 :挑 取 固体 培 养基 上 菌 落一 接 种 环 ,置 于 洁 净 试 管内 ,滴 加 2% 儿 茶 酚溶 液1mL 及 3% 过 氧 化氢 溶 液 1mL . 静 置 于室 温(20 ℃ )中 30 ~ 60mi n, 观 察 结果 . 结 果 :阳 性 反应 ,细 菌 变为 黑 褐色 ;阴 性 反应 ,细 菌 不变 色. 注 :过 氧 化物 酶 的作 用 可 受氰 化 钾 的抑 制 .

18 硝 酸 盐 培 养 基 成 分:
硝 酸 钾0.2g 蛋 白5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:溶 解 ,校 正pH, 分 装 试管 ,每 管 约5mL,1 2 1 ℃ 高 压 灭 菌15mi n.

22 磷 酸 盐 缓 冲 液 储 存液 :
磷 酸 二氢 钾 34g 1mol /L 氢 氧 化钠 溶 液175 mL 蒸 馏 水825 mL pH7 .2 制 法: 先 将 磷酸 盐 溶解 于 500 mL 蒸 馏 水中 ,用 1mol /L 氢 氧 化钠 溶 液校 正 pH 后 ,再 用 蒸馏 水 稀释 至 100 0m L . 稀 释 液: 取 储 存液 1.25 mL ,用 蒸 馏水 稀 释 至 100 0m L . 分 装 每瓶 100 mL 或 每 管 10mL ,1 21 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

硝 酸盐 还 原 试剂:
甲 液:将 对 氨基 苯 磺酸 0.8g 溶 解 于 2.5mo l /L乙 酸 溶液 100m L 中 . 乙 液:将 甲 萘胺 0.5g 溶 解 于2.5mo l /L乙 酸 溶液 100m L 中. 试 验方 法 :接 种 后在 36 ±1 ℃ 培 养1 ~ 4d, 加 入 甲液 和 乙 液各 一 滴,观 察 结果 .硝 酸 盐还 原 为亚 硝 酸 盐时 于 立 刻或 数 分钟 内 显 红色 . 注: 本 试 验阴 性 的原 因 有 三 :细 菌 不能 还 原硝 酸 盐 ;亚 硝 酸 盐继 续 分解 ,生 成 氨和 氮 ;培 养 基不 适 于细 菌 的 生 长.如 欲 检查 培 养基 中 硝 酸盐 是 否 未被 分 解,可 再 加 入 锌粉 少 许,可 使 硝酸 盐 还原 为 亚 硝酸 盐 而 呈现 红 色.

23 明 胶 磷 酸 盐 缓 冲 液 成 分:
明 胶 2g 磷 酸 氢二 钠 4g 蒸 馏 水100 0m L pH6 .2 制 法: 加 热 溶解 ,校 正pH,1 21 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

19 细 胞 色 素 氧 化 酶 试验 试 剂:
1% 盐 酸 二甲 基 对苯 二 胺 溶液 . 1% α-萘 酚 -乙 醇 溶液 . 试 验方 法 :取 37 ℃ (或 低 于37 ℃ )培 养20h 的 斜 面培 养 物 一支 ,将 两 种试 剂 各2 ~ 3 滴,从 斜 面上 端 滴下 ,并 将 斜 面略 加 倾斜 ,使 试 剂混 合 液流 经 斜 面上 的 培 养物 . 如 系 平板 培 养物 ,则 可 用试 剂 混合 液 滴 在菌 落 上 . 结 果:于 2mi n内 呈 现蓝 色 者为 阳 性 .阳 性 培养 物 大多 数 于 半分 钟 内出 现 强 阳性 反 应 ,2mi n 以 后 出现 微 弱 或 可 疑反 应 均作 为 阴 性结 果 .

24 乳 酸- 苯 酚 溶 液 成 分:
苯 酚 10g 乳 酸 (比 重 1.21)1 0g 甘 油 20g 蒸 馏 水10mL 制 法: 将 苯 酚在 水 中加 热 溶 解 ,然 后 加入 乳 酸及 甘 油 . 用 途: 检 验 真菌 形 态时 用 .

20 过 氧 化 氢 酶 试 验 试 剂:3% 过 氧 化氢 溶 液 :临 用 时配 制 . 试 验方 法 :挑 取 固体 培 养基 上 菌 落一 接 种 环 ,置 于 洁

25 肉 浸 液 肉 汤 成 分:
绞 碎 牛肉 500g 氯 化 钠5g 蛋 白 胨10g 磷 酸 氢二 钾2g 蒸 馏 水100 0m L 制 法:将 绞 碎之 去 筋膜 无 油 脂牛 肉 500g 加 蒸 馏水 1000 mL , 混 合 后放 冰 箱过 夜 ,除 去 液面 之 浮油 ,隔 水 煮 沸 半小 时,使 肉 渣完 全 凝结 成 块 ,用 绒 布过 滤 ,并 挤 压 收 集全 部 滤液 ,加 水 补足 原 量 .加 入 蛋白 胨 ,氯 化 钠 和 磷 酸盐 ,溶 解 后校 正pH7 .4 ~ 7.6 煮 沸 并过 滤,分 装 烧 瓶,12 1 ℃ 高 压 灭菌 30mi n.

28 血 消 化 汤 成 分:
绞 碎 猪胃 100 g 绞 碎 猪血 块 100g 蒸 馏 水100 0m L 浓 盐 酸10mL

制 法:
1 洗 涤 猪胃 ,除 去 油脂 ,保 留 胃粘 膜,用 绞 肉机 绞 碎 . 2 用 绞 肉机 将 猪血 块 绞 碎. 3 将 蒸 馏水 加 热至 55 ℃ ,加 入 猪胃 ,猪 血 块和 盐 酸 ,置 55 ℃ 水 浴 中 24h, 时 常 加以 摇 动. 4 从 水 浴内 取 出,加 入 1mo L /L碳 酸 钠溶 液 5mL, 煮 沸 10mi n, 置 于 冰箱 内 一夜 . 5 吸 取 上层 清 液,加 磷 酸氢 二 钾 1g, 加 热 至75 ℃ ,加 入 1mol /L 碳 酸 钠溶 液45mL , 煮 沸 ,校 正 pH7 .2 ~ 7.4. 6 用 滤 纸过 滤 ,分 装 烧瓶 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 20mi n.

26 肉 浸 液 琼 脂 成 分:
肉 浸 液肉 汤(P H7 .4 )10 00 m L 琼 脂17 ~20g 制 法:加 热 溶化 琼 脂 ,分 装 烧瓶 或 试管 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌30mi n. 根 据 需要 ,倾 注 平板 或 放成 斜 面 .

29 豆 粉 琼 脂 成 分:
牛 心 消化 汤 (P H7 .4~ 7.6)10 00 m L 琼 脂 20g 黄 豆 粉浸 液 50mL 制 法: 将 琼 脂加 在 牛心 消 化 汤内 ,加 热 溶解 ,过 滤 .加 入 豌 豆粉 浸 液 ,分 装 每瓶 100m L,1 2 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 豌 豆粉 浸 液 制法: 取 豌 豆粉 5g, 氯 化 钠10g , 加 入 蒸 馏 水 100m L. 置 100 ℃ 水 浴 内加 热1h, 放 于 冰箱 中 过 夜 .吸 取 上清 液 即为 豌 豆 浸液 .

( ) 27 牛 肉(或 牛 心)消 化 汤 成 分:
绞 碎 牛肉 (或 牛 心 )100 0 g 15% 氢 氧 化钠 溶 液 27mL 胰 蛋 白酶 40mL 三 氯 甲烷 1mL 氯 化 钠10g 蒸 馏 水200 0m L

制 法:
1 称 取 碎牛 肉 ,加 蒸 馏水 ,隔 水 加热 到 80 ℃ ,维 持 15mi n. 2 加 氢 氧化 钠 溶液 ,对pH 试 纸 呈弱 碱 性 ,冷 至40 ℃. 3 加 胰 蛋白 酶 ,氯 仿 ,在 36 ±1 ℃ 放 置 4~ 5h, 每 小 时摇 动 一 二次 . 4 4h 后,吸 取 上层 液 5mL 于 试 管中 ,加 5% 硫 酸 铜溶 液0.1mL ,4 % 氢 氧 化钠 溶 液5mL, 混 合 之 .若 呈 红色 , 则 不 须再 消 化,可 由 温箱 取 出 . 5 加 入 15% 乙 酸 溶液 45mL , 对 pH 试 纸 呈酸 性 . 6 煮 沸 15mi n, 使 胰 蛋白 酶 破坏 ,冷 后,放 冰 箱内 一 夜 . 7 次 日 吸取 上 层清 液 ,加 氯 化钠 10g , 并 加 水补 足 原 量,煮 沸 . 8 校 正 pH7 .4 ~ 7.6( 加 15% 氢 氧 化钠 溶 液约 10mL ), 加 热,用 滤 纸过 滤 ,分 装 烧瓶 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 20mi n. 注: ① 此 培 养基 可 作为 琼 脂 培养 基 的 基础,不 需 加蛋 白 胨. ②胰 蛋 白酶 之 配制 :称 取 去脂 绞 碎的 猪 胰 500g , 加 入 乙 醇500 mL ,蒸 馏 水 1500 m L, 混 合 之,装 人 玻塞 瓶 内 . 每 日 摇匀 三 次.3d 后,用 绒 布过 滤 挤出 其 汁 ,加 盐 酸至 0.05% , 放 冰 箱内 保 存备 用 .

30 血 琼 脂 成 分:
pH7 .4 ~ 7.6 豆 粉 琼脂 100 mL 脱 纤 维羊 血 (或 兔 血 )5~ 10mL 制 法: 加 热 溶化 琼 脂 ,冷 至 50 ℃ ,以 灭 菌手 续 加入 脱 纤 维 羊血 ,摇 匀 ,倾 注 平板 .亦 可 分装 灭 菌试 管 ,置 成 斜 面 .亦 可 用其 他 营养 丰 富 的基 础 培 养基 配 制 血琼 脂.

31 营 养 琼 脂 成 分:
蛋 白 胨10g 牛 肉 膏3g 氯 化 钠5g 琼 脂 15 ~ 20g 蒸 馏 水100 0m L 制 法: 将 除 琼脂 以 外的 各 成 分溶 解 于 蒸馏 水 内,加 入 15% 氢 氧 化钠 溶 液约 2mL, 校 正 pH 至 7.2 ~ 7.4. 加 入

琼 脂,加 热 煮沸 ,使 琼 脂溶 化 .分 装 烧瓶 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌15mi n. 注: 此 培 养基 可 供一 般 细 菌培 养 之 用 ,可 倾 注平 板 或 制 成 斜面 .如 用 于菌 落 计数 ,琼 脂 量为 1.5% ; 如 作 成平 板 或 斜面 ,则 应 为2%.

乳 糖 5g 磷 酸 氢二 钾 4g 磷 酸 二氢 钾 1.5g 氯 化 钠5g 蒸 馏 水100 0m L 制 法: 将 上 述成 分 混合 ,溶 解 后 ,分 装 有发 酵 倒管 的 试 管 中 ,121 ℃高 压 灭菌 15mi n, 最 终 pH 为 6.9 ± 0.2.

32 营 养 肉 汤 成 分:
蛋 白 陈10g 牛 肉 膏3g 氯 化 钠5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:按 上 述成 分 混合 ,溶 解 后校 正 pH, 分 装 烧瓶 ,每 瓶225 mL ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

(BP 36 缓 冲 蛋 白 胨 水(BP ) 成 分:
蛋 白 胨10g 氯 化 钠5g 磷 酸 氢二 钠 (Na 2 HP O 4 · 12H 2 O)9g 磷 酸 二氢 钾 1.5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .2 制 法: 按 上 述成 分 配好 后 以 大烧 瓶 装 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌 15mi n. 临 用 时无 菌 分装 每 瓶 225 mL . 注 :本 培 养基 供 沙门 氏 菌 前增 菌 用 .

33 乳 糖 胆 盐 发 酵 管 成 分:
蛋 白 胨20g 猪 胆 盐(或 牛,羊 胆 盐)5g 乳 糖10g 0.04% 滇 甲 酚紫 水 溶液 25mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:将 蛋 白胨 ,胆 盐 及乳 糖 溶于 水 中 ,校 正 pH, 加 入 指 示 剂,分 装 每管 10mL , 并 放 入一 个 小倒 管 ,115 ℃高 压 灭 菌15mi n. 注: 双 料 乳糖 胆 盐发 酵 管 除蒸 馏 水 外 ,其 他 成分 加 倍.

(M 37 氯 化 镁 孔 雀 绿 增 菌液(M M ) 甲 液:
胰 蛋 白胨 5g 氯 化 钠8g 磷 酸 二氢 钾 1.6g 蒸 馏 水100 0m L

乙 液:
氯 化 镁(化 学 纯)40 g 蒸 馏 水100 mL

丙 液: 34 乳 糖 发 酵 管 成 分:
蛋 白 胨20g 乳 糖10g 0.04% 溴 甲 酚紫 水 溶液 25mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:将 蛋 白胨 及 乳糖 溶 于 水中 ,校 正pH, 加 入 指示 剂,按 检 验要 求 分装 30mL ,10 m L 或 3mL ,并 放 入一 个 小 倒 管,11 5 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 注: ① 双 料 乳糖 发 酵管 除 蒸 馏水 外 ,其 他 成分 加 倍. ②30mL 和 10mL 乳 糖 发酵 管 专供 酱 油 及酱 类 检 验 用,3m L 乳 糖 发酵 管 供大 肠 菌 群证 实 试 验用 . 0.4% 孔 雀 绿水 溶 液. 制 法: 分 别 按上 述 成分 配 好 后 ,121 ℃ 高 压 灭菌 15mi n 备 用.临 用 时取 甲 液 90mL , 乙 液 9mL, 丙 液 0.9mL ,以 无 菌操 作 混合 即 可 . 注 :本 培 养基 亦 称 Rap pa p o rt 10(R 10 ) 增 菌 液 .

38 四 硫 磺 酸 钠 煌 绿 增菌 液(TTB) (TTB) 基 础培 养 基:
多 胨 或眎 胨 5g 胆 盐 1g 碳 酸 钙10g 硫 代 硫酸 钠 30g 蒸 馏 水100 0m L

35 EC 肉 汤 成 分:
胰 蛋 白胨 20g 3号 胆 盐 (或 混 合胆 盐 )1.5g

碘 溶液 :
碘 6g 碘 化 钾5g 蒸 馏 水20mL 制 法: 将 基 础培 养 基的 各 成 分加 入 蒸 馏水 中,加 热 溶

解,分 装 每瓶 100 mL . 分 装 时应 随 时振 摇 ,使 其 中的 碳 酸 钙 混匀 .121 ℃ 高 压 灭菌 15mi n 备 用 .临 用 时每 100m L 基 础 培养 基 中加 入 碘 溶液 2mL ,0 .1% 煌 绿 溶 液1mL.

蒸 馏 水100 0m L

1%L- 胱 氨酸 -氢 氧化 钠 溶 液的 配 法: 称 取L- 胱 氨
酸 0.1g( 或 DL- 胱 氨 酸 0.2g), 加 1mol /L 氢 氧 化钠 1.5mL ,使 溶 解 ,再 加 入蒸 馏 水8.5mL 即 成. 制 法: 将 除 亚硒 酸 氢钠 和 L- 胱 氨 酸以 外 的各 成 分 溶 解 于 900m L 蒸 馏 水中 ,加 热 煮沸 ,俟 冷 备用 .另 将 亚硒 酸 氢 钠溶 解 于 100m L 蒸 馏 水中 ,加 热 煮沸 ,候 冷 ,以 无 菌 操 作与 上 液混 合 .再 加 入1% L- 胱 氨 酸-氢 氧 化钠 溶 液 1mL . 分 装 于灭 菌 瓶中 ,每 瓶100 mL ,pH 应 为 7.0 ± 0.1.

( ) 39 四 硫 磺 酸 钠 煌 绿 增菌 液( 换 用 方 法) 基 础液 :
蛋 白 胨10g 牛 肉 膏5g 氯 化 钠3g 碳 酸 钙45g 蒸 馏 水100 0m L 将 各 成分 加 入于 蒸 馏 水中 ,加 热 至约 70 ℃溶 解 ,校 正 pH 至 7.0 ± 0.1,12 1 ℃ 高 压 灭菌 20mi n.

41 GN 菌 液 GN增 成 分:
胰 蛋 白胨 20g 葡 萄 糖1g 甘 露 醇2g 柠 檬 酸钠 5g 去 氧 胆酸 钠 0.5g 磷 酸 氢二 钾 4g 磷 酸 二氢 钾 1.5g 氯 化 钠5g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .0 制 法: 按 上 述成 分 配好 ,加 热 使溶 解 ,校 正 pH. 分 装 每 瓶 225m L ,11 5 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

硫 代硫 酸 钠 溶液:
硫 代 硫酸 钠(Na 2 S 2 O 3 · 5H 2 O)50g 蒸 馏 水加 至100 mL

碘 溶液 :
碘 片20g 碘 化 钾25g 蒸 馏 水加 至100 mL 将 碘 化钾 充 分溶 解 于 是少 量 的 蒸馏 水 中,加 入 碘片 , 振 摇 玻瓶 至 碘片 全 部 溶解 ,再 加 入蒸 馏 水至 规 定 量 . 贮 于 棕色 玻 瓶内 ,紧 塞 瓶盖 备 用 .

煌 绿水 溶 液:
煌 绿0.5g 蒸 馏 水100 mL 存 放 暗处 ,不 少 于1d, 使 其 自然 灭 菌 .

牛 胆盐 溶 液:
干 燥 的牛 胆 盐10g 蒸 馏 水100 mL 煮 沸 溶解 ,121 ℃ 高 压 灭菌 20mi n.

42 肠 道 菌 增 菌 肉 汤 成 分:
蛋 白 胨1 10g 葡 萄 糖5g 牛 胆 盐20g 磷 酸 氢二 钠 8g 磷 酸 二氢 钾 2g 煌 绿 0.015 g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .2 制 法: 按 上 述成 分 配好 ,加 热 使溶 解 ,校 正 pH. 分 装 每 瓶 30mL ,11 5 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

制 备:
基 础 液900 mL 硫 代 硫酸 钠 溶液 100 mL 碘 液20mL 煌 绿 溶液 2mL 牛 胆 盐溶 液50mL 临 用 前,按 上 列顺 序 ,以 无 菌操 作 依次 加 入 于基 础 液 中,每 加 入一 种 成分 ,均 应 摇匀 后 再加 入 另 一种 成 分 . 分 装 于灭 菌 瓶中 ,每 瓶100 mL .

(BS 43 亚 硫 酸 铋 琼 脂(BS ) 成 分: (SC 40 亚 硒 酸 盐 胱 氨 酸 增菌 液(SC ) 成 分:
蛋 白 胨5g 乳 糖4g 亚 硒 酸氢 钠4g 磷 酸 氢二 钠5.5g 磷 酸 二氢 钾4.58 L- 胱 氨 酸0.01g 蛋 白 胨10g 牛 肉 膏5g 葡 萄 糖5g 硫 酸 亚铁 0.3g 磷 酸 氢二 钠 4g 煌 绿 0.025 g 柠 檬 酸铋 铵 2g 亚 硫 酸钠 6g

琼 脂18 ~20g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .5

制 法:
1将 前 面 5种 成 分溶 解 于 300 mL 蒸 馏 水中 . 2将 柠 檬酸 铋 铵和 亚 硫 酸钠 另 用 50mL 蒸 馏 水溶 解 . 3将 琼 脂于 600 mL 蒸 馏 水中 煮 沸溶 解 ,冷 至80 ℃ 4将 以 上三 液 合并 ,补 充 蒸馏 水 至100 0m L ,校 正 pH, 加0.5% 煌 绿 水溶 液 5mL, 摇 匀.冷 至 50 ~ 55 ℃ ,倾 注 平 皿. 注: 此 培 养基 不 需高 压 灭 菌 .制 备 过程 不 宜过 分 加 热 . 以 免 降低 其 选择 性 .应 在 临用 前 一天 制 备 ,贮 存 于室 温 暗 处.超 过48h 不 宜 使用 .

44 DHL 脂 DHL琼 成 分:
蛋 白 胨20g 牛 肉 膏3g 乳 糖10g 蔗 糖10g 去 氧 胆酸 钠1g 硫 代 硫酸 钠2.3g 柠 檬 酸钠 1g 柠 檬 酸铁 铵1g 中 性 红0.03g 琼 脂18 ~20g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .3 制 法:将 除 中性 红 和琼 脂 以 外的 成 分 溶解 于 400 mL 蒸 馏 水中 ,校 正pH. 再 将 琼脂 于 600m L 蒸 馏 水中 煮 沸 溶 解,两 液 合并 ,并 加 入0.5% 中 性 红水 溶 液 6mL ,待 冷 至50 ~ 55 ℃ ,倾 注 平板 .

基 础 液;将 琼 脂加 入 于 600m L 蒸 馏 水内 ,加 热 溶解 .加 入 甲 液和 乙 液于 基 础 液内 ,校 正 pH. 再 加 入指 示 剂,并 与 琼 脂液 合 并 ,待 冷 至50 ~ 55 ℃,倾 注 平板 . 注 :① 此 培 养基 不 可高 压 灭 菌 . ② 甲 液 的配 制 硫 代 硫酸 钠 34g 柠 檬 酸铁 铵 4g 蒸 馏 水100 mL ② 乙 液 的配 制 去 氧 胆酸 钠 10g 蒸 馏 水100 mL ② A ndrad e 指 示 剂 酸 性 复红 0.5g 1mol /L 氢 氧 化钠 溶 液16mL 蒸 馏 水100 mL 将 复 红溶 解 于蒸 馏 水 中 ,加 入 氢氧 化 钠溶 液 .数 小 时 后 如 复红 褪 色不 全 ,再 加 氢氧 化 钠溶 液 1 ~ 2mL.

46 SS 琼 脂 基 础培 养 基:
牛 肉 膏5g 眎 胨 5g 三 号 胆盐 3.5g 琼 脂 17g 蒸 馏 水100 0m L 再 将 两液 混 合 ,121 ℃高 压 灭菌 15mi n, 保 存 备用 .

完 全培 养 基:
基 础 培养 基 100m L 乳 糖 10g 柠 檬 酸钠 8.5g 硫 代 硫酸 钠 8.5g 10% 柠 檬 酸铁 溶 液10mL 1% 中 性 红溶 液 2.5mL 0.1% 煌 绿 溶液 0.33m L 加 热 溶化 基 础培 养 基 ,按 比 例加 入 上述 染 料 以外 之 各 成 分 ,充 分 混合 均 匀 ,校 正 至pH7 .0, 加 入 中性 红 和煌 绿 溶 液,倾 注 平板 . 注 :① 制 好 的培 养 基宜 当 日 使用 ,或 保 存于 冰 箱内 于 48h 内 使 用. ② 煌 绿 溶液 配 好后 应 在 10d 以 内 使用 . ③ 可 以 购用 S S琼 脂 的干 燥 培养 基 .

45 HE 脂 HE琼 成 分:
脙 胨12g 牛 肉 膏3g 乳 糖12g 蔗 糖12g 水 杨 素2g 胆 盐20g 氯 化 钠5g 琼 脂18 ~20g 蒸 馏 水100 0m L 0.4% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 16mL And rad e指 示 剂20mL 甲 液20mL 乙 液20mL pH7 .5 制 法:将 前 面七 种 成分 溶 解 于 400 mL 蒸 馏 水内 作 为

47 WS 琼 脂 成 分:
脙 胨 12g 牛 肉 膏3g 氯 化 钠5g 乳 糖 12g 蔗 糖 12g 十 二 烷基 硫 酸钠 2g

琼 脂15g And rad e指 示 剂20mL 0.4% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 16mL 甲 液20mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .0 制 法:除 指 示剂 和 甲液 外 ,将 其 他成 分 加热 溶 解 ,不 需 消 毒,校 正 pH 后 加 入指 示 剂和 甲 液 ,倾 注 平板 应 呈草 绿 色. 注: ① 供 沙 门氏 菌 分离 用 . ②A ndrad e 指 示 剂和 甲 液的 配 制 均见 HE 琼 脂.

48 麦 康 凯 琼 脂 成 分:
蛋 白 胨17g 眎 胨3g 猪 胆 盐(或 牛,羊 胆 盐)5g 氯 化 钠5g 琼 脂17g 蒸 馏 水100 0m L 乳 糖10g 0.01% 结 晶 紫水 溶 液 10mL 0.5% 中 性 红水 溶 液 5mL

蛋 白 胨20g 牛 肉 膏5g 乳 糖 10g 蔗 糖 10g 葡 萄 糖1g 氯 化 钠5g 硫 酸 亚铁 铵 〔 F e(NH 4 )2(S O 4)2· 6H2 O 〕 0.2g 硫 代 硫酸 钠 0.2g 琼 脂 12g 酚 红 0.025 g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法: 将 除 琼脂 和 酚红 以 外 的各 成 分 溶解 于 蒸 馏水 中 ,校 正pH. 加 入 琼脂 ,加 热 煮沸 ,以 溶 化琼 脂 .加 入 0.2% 酚 红 水溶 液12.5m L , 摇 匀.分 装 试管 ,装 量 宜多 些 ,以 便 得到 较 高的 底 层 .121 ℃高 压 灭菌 15mi n. 放 置 高 层 斜面 备 用 .

( ) 51 三 糖 铁 琼 脂(换 用 方 法) 成 分:
蛋 白 胨15g 眎 胨 5g 牛 肉 膏3g 酵 母 膏3g 乳 糖 10g 蔗 糖 10g 葡 萄 糖1g 氯 化 钠5g 硫 酸 亚铁 0.2g 硫 代 硫酸 钠 0.3g 琼 脂 12g 酚 红 0.025 g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法: 将 除 琼脂 和 酚红 以 外 的各 成 分 溶解 于 蒸 馏水 中 ,校 正pH. 加 入 琼脂 ,加 热 煮沸 ,以 溶 化琼 脂 .加 入 0.2% 酚 红 水溶 液12.5m L , 摇 匀.分 装 试管 ,装 量 宜多 些 ,以 便 得到 较 高的 底 层 .121 ℃高 压 灭菌 15mi n, 放 置 高 层 斜面 备 用 .

制 法:
1将 蛋 白胨 ,眎 ,胆 盐 和氯 化 钠溶 解 于 400 mL 蒸 馏 水中 , 校 正pH7 .2. 将 琼 脂加 入 600m L 加 热 溶解 .将 两 液合 并,分 装 于烧 瓶 内 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌15mi n 备 用 . 2临 用 时加 热 溶化 琼 脂 ,趁 热 加入 乳 糖 ,冷 至50 ~ 55 ℃时 ,加 入 结晶 紫 和中 性 红 水溶 液 ,摇 匀 后倾 注 平板 . 注: 结 晶 紫及 中 性红 水 溶 液配 好 后 须经 高 压 灭菌 .

(EM 49 伊 红 美 蓝 琼 脂(EM B ) 成 分:
蛋 白 胨10g 乳 糖10g 磷 酸 氢二 钾2g 琼 脂17g 2% 伊 红Y溶 液 20mL 0.65% 美 蓝 溶液 10mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .1 制 法:将 蛋 白胨 ,磷 酸 盐和 琼 脂溶 解 于 蒸馏 水 中 ,校 正 pH, 分 装 于烧 瓶 内 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n 备 用.临 用 时 加 入乳 糖 并加 热 溶 化琼 脂 ,冷 至50 ~ 55 ℃ ,加 入 伊 红 和 美蓝 溶 液,摇 匀 ,倾 注 平板 .

(KI) 52 克 氏 双 糖 铁 琼 脂(KI) 上 层培 养 基 成分
血 消 化汤 (pH 7 .6)50 0 mL 琼 脂 6.5g 硫 代 硫酸 钠 0.1g 硫 酸 亚铁 铵 0.1g 乳 糖 5g 0.2% 酚 红 溶液 5mL

(TS 50 三 糖 铁 琼 脂(TS I) 成 分:

下 层培 养 基 成分
血 消 化汤 (pH 7 .6)50 0 mL

琼 脂2g 葡 萄 糖1g 0.2% 酚 红 溶液 5mL

成 分:
蛋 白 胨0.2g 氯 化 钠0.5g 乳 糖 5g 2% 溴 麝 香草 酚 蓝水 溶 液 1.2mL 蒸 馏 水100 mL pH7 .4 制 法: 除 乳 糖以 外 的各 成 分 :溶 解 于50mL 蒸 馏 水内 , 校 正 pH. 将 乳 糖溶 解 于另 外 50mL 蒸 馏 水内 ,分 别 灭 菌 121 ℃ 15mi n, 将 两 液混 合 ,以 无 菌操 作 分装 于 灭 菌 小 试 管内 . 注 :在 此 培养 基 内 ,大 部 分乳 糖 迟缓 发 酵 的细 菌 可 于 1d 内 发 酵 .

制 法:
1取 血 消化 汤 按上 层 和 下层 的 琼 脂用 量 ,分 别 加入 琼 脂,加 热 溶解 . 2分 别 加入 其 他各 种 成 分 .将 上 层培 养 基分 装 于 烧瓶 内;将 下 层培 养 基分 装 于 灭菌 12mm × 100 mm 试 管 内,每 管 约 2mL .1 15 ℃ 高 压 灭菌 10mi n. 3将 上 层培 养 基放 在 56 ℃ 水 浴 箱内 保 温;将 下 层培 养 基 直 立放 在 室温 内 ,使 其 凝固 . 4当 下 层培 养 基凝 固 后 ,以 无 菌手 续 将上 层 培 养基 分 装 于 下层 培 养基 的 上 面,每 管 约 1.5mL ,放 成 斜面 .

( ) 53 克 氏 双 糖 铁 琼 脂(换 用 方 法) 成 分:
蛋 白 胨20g 牛 肉 膏3g 酵 母 膏3g 乳 糖10g 葡 萄 糖1g 氯 化 钠5g 柠 檬 酸铁 铵0.5g 硫 代 硫酸 钠0.5g 琼 脂12g 酚 红0.025 g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .4 制 法:将 除 琼脂 和 酚红 以 外 的各 成 分 溶解 于 蒸 馏水 中,校 正 pH. 加 入 琼脂 ,加 热 煮沸 ,以 溶 化琼 脂 .加 入 0.2% 酚 红 水溶 液 12.5m L , 摇 匀 .分 装 试管 ,装 量 宜多 些,以 便 得到 比 较高 的 底 层 .12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 放 置 高 层斜 面 备用 .

56

CAY E 养 基 E培

此 培 养基 附 在肠 毒 素 诊断 试 剂 盒内 ,如 无 此培 养 基, 亦 可 用Hon d a氏 产 毒肉 汤 .

57 Honda 产 毒 肉 汤 Honda氏 成 分:
水 解 酪蛋 白 20g 酵 母 浸膏 粉 10g 氯 化 钠2.5g 磷 酸 氢二 钠 15g 葡 萄 糖5g 微 量 元素 0.5mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .5 制 法: 溶 解 后校 正 pH, 高 压 灭菌 121 ℃15mi n, 待 冷 至 45 ~ 50 ℃ 时,加 入 林可 霉 素溶 液 ,每 毫 升培 养 基内 含 90 μ g. 微 量元 素 配 方: 硫 酸 镁5g, 氯 化 铁 0.5g, 氯 化 钻2g, 蒸 馏 水 100m L .

54 葡 萄 糖 半 固 体 发 酵管 成 分:
蛋 白 胨1g 牛 肉 膏0.3g 氯 化 钠0.5g 1.6% 溴 甲 酚紫 酒 精溶 液 0.1mL 葡 萄 糖1g 琼 脂0.3g 蒸 馏 水100 mL pH7 .4 制 法:将 蛋 白胨 ,牛 肉 膏和 氯 化钠 加 入 于水 中 ,校 正 pH 后 加 入琼 脂 加热 溶 解 ,再 加 入指 示 剂和 葡 萄 糖 ,分 装 小 试管 ,灭 菌121 ℃ 15 mi n.

( ) 58 Elek 培 养 基(毒 素 测 定 用) Elek氏 成 分:
胨 20g 麦 芽 糖3g 乳 糖 0.7g 氯 化 钠5g 琼 脂 15g 40% 氢 氧 化钠 溶 液1.5mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .8 制 法: 用 500m L 蒸 馏 水溶 解 琼脂 以 外 的成 分 ,煮 沸 ,并 用 滤 纸过 滤 .用 1mo 1 /L氢 氧 化钠 校 正pH. 用 另 外 500 mL 蒸 馏 水加 热 溶解 琼 脂 .将 两 液混 合 ,分 装 试管 10mL 或20mL .1 21 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 临 用 时加 热 溶 化 琼 脂倾 注 平板 .

55

5% 乳 糖 发 酵 管

59 氯 化 镁 孔 雀 绿 羧 苄青 霉 素 培 养 基 成 分:
甲 液:胰 蛋 白胨 10g 蒸 馏 水100 0m L 乙 液:磷 酸 氢二 钠 9.5g 蒸 馏 水100 0m L 丙 液:氯 化 镁(MgC l 2 · 6H 2 O)40g 蒸 馏 水400 mL 以 上 分别 在121 ℃灭 菌 15mi n. 丁 液:孔 雀 绿0.2g 蒸 馏 水100 mL 戊 液:羧 苄 青霉 素 1mg/m L 制 法:取 甲 液 620m L , 乙 液 160m L, 丙 液212 mL 混 合, 再 加 入丁 液6.4mL 和 戊 液2.4mL , 即 为100 0m L 培 养 基.分 装 灭菌 烧 瓶 ,每 瓶100 mL , 或 灭 菌试 管10mL .

30% 氢 氧 化钾 溶 液4.5mL , 校 正pH. 加 热 煮沸 ,过 滤.再 加 入 结晶 紫 溶液 ,混 合 后分 装 试管 .12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

63 氯 化 钠 蔗 糖 琼 脂 成 分:
蛋 白 胨10g 牛 肉 膏10g 氯 化 钠50g 蔗 糖 10g 琼 脂 18g 0.2% 溴 麝 香草 酚 蓝溶 液 20mL 蒸 馏 水100 0m L pH7 .8 制 法: 将 牛 肉膏 ,蛋 白 胨及 氯 化钠 溶 解 于蒸 馏 水 中 ,校 正 pH. 加 入 琼脂 ,加 热 溶解 ,过 滤 .加 入 指示 剂 ,分 装 烧 瓶 100m L .12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n 备 用.临 用 前在 100 mL 培 养 基内 加 入蔗 糖 1g, 加 热 溶化 并 冷至 50 ℃ , 倾 注 平板 .

60 胰 蛋 白 胨 水 成 分:
胰 蛋 白胨 10g 蒸 馏 水100 0m L pH7 .0 制 法:将 上 述成 分 溶解 ,校 正pH. 分 装 试管 ,12 1 ℃ 高 压 灭 菌15mi n.

64 嗜 盐 菌 选 择 性 琼 脂 成 分:
蛋 白 胨20g 氯 化 钠40g 琼 脂 17g 0.01% 结 晶 紫溶 液 5mL 蒸 馏 水100 0m L pH8 .7 制 法: 除 结 晶紫 和 琼脂 外 ,其 他 按上 述 成分 配 好 ,校 正 pH. 加 入 琼脂 ,加 热 溶解 .再 加 入结 晶 紫溶 液 ,分 装 烧 瓶 ,每 瓶100 mL .

61 Rust igian 尿 素 培 养 液 igian氏 成 分:
尿 素20.0g 酵 母 浸膏 0.1g 磷 酸 二氢 钾(K H 2 P O 4 )0.09 1 g 磷 酸 氢二 钠(Na 2 HP O 4 )0.09 5 g 酚 红0.01g 蒸 馏 水100 0m L 制 法:将 上 述成 分 于蒸 馏 水 中溶 解 ,校 正pH 为 6.8 ± 0.2. 不 要 加热 ,过 滤 除菌 ,无 菌 分装 于 灭菌 小 试 管中 , 每 管 为约 3mL . 用 途:尿 素 酶试 验 用 .

65 3.5% 氯 化 钠 三 糖 铁 琼 脂 成 分:
三 糖 铁琼 脂 1000 m L 氯 化 钠30g 制 法: 按 前 面三 糖 铁琼 脂 ,再 加 入氯 化 钠 30g, 分 装 试 管 ,12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n. 放 置 高层 斜 面备 用 .

62 氯 化 钠 结 晶 紫 增 菌液 成 分:
蛋 白 胨20g 氯 化 钠40g 0.01% 结 晶 紫溶 液 5mL 蒸 馏 水100 0m L pH9 .0

66 氯 化 钠 血 琼 脂 成 分:
酵 母 膏3g 蛋 白 胨10g 氯 化 钠70g 磷 酸 氢二 钠 5g 甘 露 醇10g 结 晶 紫0.001 g 琼 脂 15g

制 法:
除 结 晶紫 外,其 他 按上 述 成分 :配 好,加 热 溶解 .约 加

蒸 馏 水100 0m L 制 法:调 pH8 .0 加 热 30mi n( 不 必 高压 ), 待 冷 至45 ℃左 右 时,加 入 新鲜 人 或兔 血 (5% ~ 10% ) 混 合 均匀 ,倾 注 平 皿.

蒸 馏 水100 mL pH7 .7 制 法: 配 制2% 蛋 白 胨水 ,校 正 pH, 共 配 制5 瓶,每 瓶 100 mL .每 瓶 分别 加 入不 同 量 的氯 化 钠 :(1) 不 加 ;(2)3g;(3 )7g ;(4)9g ;(5)11 g .待 溶 解后 分 装试 管 .12 1 ℃ 高 压 灭菌 15mi n.

67 3.5% 化 钠 生 化 试 验 培养 基 3.5%氯 成 分及 制 法: 根 据 所需 糖 的种 类 按 3.2 配 制 .只 是 将
氯 化 钠含 量 改为 3.5% ,p H 为 7.7.

( 68 改 良 磷 酸 盐 缓 冲 液(小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森氏 ) 菌 专 用) 成 分:
磷 酸 氢二 钠(Na 2 HP O 4 )8.23g 磷 酸 二氢 钠(Na H 2 P O 4 · H 2 O)1.2g 氯 化 钠(Na C l )5.0 g 三 号 胆盐 1.5g 山 梨 醇20g 制 法:将 磷 酸盐 及 氯化 钠 溶 于蒸 馏 水 中 ,再 加 入三 号 胆 盐 及山 梨 醇,溶 解 后校 正 pH 为 7.6, 分 装 试管 ,于121 ℃高 压 灭菌 15mi n, 备 用 .

69 CIN -1 养 基 -1培 基 础培 养 基:
胰 胨20.0g 酵 母 浸膏 2.0g 甘 露 醇20.0g 氯 化 钠1.0g 去 氧 胆酸 钠2.0g 硫 酸 镁(MgS O 4 · 7H 2 O)0.01 g 琼 脂12.0g 蒸 馏 水950 mL pH7 .5 ±0.1 将 基 础培 养 基高 压 灭 菌.

Irgasan:
以95% 的 乙 醇作 溶 剂 ,溶 解 二苯 醚 ,配 成 0.4% 的 溶 液, 待 基 础液 冷 至80 ℃ 时,加 入 1mL 混 匀. 冷 至50 ℃时 ,加 入 : 中 性 红(3mg /mL )10 .0 mL 结 晶 紫(0.1m g /mL )10 .0m L 头 孢 菌素 (1.5m g/m L)1 0.0 m L 新 生 霉素 (0.25 mg /mL )10 .0 mL 最 后 不断 搅 拌着 加 入 10.0m L 的 10% 氯 化 锶 ,倒 平 皿.

70 嗜 盐 性 试 验 培 养 基 成 分:
蛋 白 胨2g 氯 化 钠按 不 同量 加


相关文章:
常用培养基配方
69 CIN-1 培养基 70 嗜盐性试验培养基 71 改良 Y 培养基 72 改良克氏双糖...管按上述成分配好后, 按 0.5%加入葡萄糖, 分装于有一倒置小管的小试管...
常用培养基配方
培养基 70 嗜盐性试验培养基 01 糖发酵管 成分: 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g ...管按上述成分配好后,按 0.5%加入葡萄糖,分装于有一倒置小管的小试管内,...
十七 常用培养基配方
加热煮沸(最好间接加热)20—30 分钟,然后冷却至 70℃左右后用双层滤纸过滤。 ...金针菇母种常用培养基配... 2页 免费 常用培养基的配制 3页 免费 生物...
常用培养基的制备技术及应用
四 步骤与方法 1.常用培养基制备的一般程序及方法 1)调配成分 根据培养基配方...特点在于灭菌后的营养琼脂冷 却到 70~80 ℃ 时加入无菌脱纤维血液,且在 80...
培养基的配制
实验五 微生物培养基的配制和灭菌 培养基是将微 ...微生物最常用的凝固剂为琼脂(其次为明胶),又叫洋...待温度下降 60℃~70℃以下, 方可打开箱门取灭菌...
培养基的配制
3、药品:70% 酒精、 MS 培养基、蒸馏水、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、蔗糖...试管中,一般来说,分装到培养容器中 培养基应占该容器的 1/3-1/4 为...
常用培养基及染料的配制
常用培养基的配制 1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌...方法是将一个鸡 蛋白加水约 20mL,调匀至生泡沫时...水 65%—70%,按比例 称好料,充分搅拌均匀后装瓶...
芽孢杆菌常用培养基配方
芽孢杆菌常用培养基配方 (按理说, 该实验的所有...60-70℃热水定溶到 100mL.200mL 培养基加 20mL....根据活菌含量选取两至三个梯度进行混菌或涂布 35℃...
微生物学实验常用培养基的配制
微生物学实验常用培养基的配制_农学_高等教育_教育专区...方法是将一 个鸡蛋白加水约 20mL,调匀至生泡沫时...水 65%—70%,按比例称好料, 充分搅拌均匀后装瓶...
常用哺乳动物细胞培养基配方
常用哺乳动物细胞培养基配方本文档列出了几种常用哺乳动物细胞培养基的成分, 包括...126.00 13.20 13.30 31.00 14.70 292.00 7.50 42.00 52.00 52.00...
更多相关标签:
常用培养基配方 | 常用培养基配置的配方 | 常用精油配方大全 | 常用膏方的配方大全 | lb培养基配方 | 光合细菌培养基配方 | ms培养基的配方 | ms培养基配方 |