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鱼类鳃霉病检疫技术规


鱼鳃霉病检疫技术规范
1 范围 本标准规定了鱼鳃霉病(fish branchiomycosis )的检样质量要求、 检疫方法、 非鱼鳃霉病的判 定和无害化处理。 本标准适用于鱼鳃霉病的检疫。 2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后 所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准

,然而,鼓励根据本标准达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用 于本标准。 DB43/221-2004 水生动物检疫规程, 中华人民共和国进出境动植物检疫法。 3 检样质量要求

每批次取被检病鱼 5~7 尾,材料新鲜无污染,病变具有代表性。 4 检疫方法

4.1 群体检查 4.1.1 现场检查 仔细检查全群鱼的健康状况,有否异常表征,如发现被检鱼类不摄食,呼吸困难,游动缓慢, 尤其是草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼等严重患病,病鱼在几天内大批死亡,但无明显的外部症状, 可作疑似鱼类鳃霉病对待,进一步诊断。 4.1.2 流行病学调查 如发现疑似鱼鳃霉病,应进行鱼鳃霉病流行病学调查。见附录 A。 4.2 解剖检查 对经 4.1 检疫为疑似鱼鳃霉病的患病鱼进行抽样解剖检查,根据下述病变之一,可初步判断 为鱼类鳃霉病: a. 鱼鳃黏液多,鳃上有出血、淤血或缺血的斑点,呈现花鳃。 b. 病重时鱼高度贫血,整个鳃呈青灰色或苍白色。 4.3 显微镜检查 取经 4.1、 4.2 检疫为疑似鱼类鳃霉病患病鱼鳃组织制作压片镜检, 若发现鳃丝血管内有大 量菌丝(通常其内有较多孢子)寄生,即可确诊为鱼鳃霉病。 目前,国内发现的鳃霉有下述两种类型。 血鳃霉( 4.3.1 血鳃霉(B. sanquinis) 寄生在草鱼、青鱼等鳃上的鳃霉,菌丝体比较粗直而少弯曲,通常是单枝延长生长,分枝 很少,仅在鳃丝血管、软骨内生长,不向鳃外组织伸展;菌丝直径为 8~36μm,孢子较大,直 径为 7.4~9.6μm,平均为 8μm。


穿移鳃霉( 4.3.2 穿移鳃霉(B. demigrans) 寄生在青鱼、鳙鱼、鲮、鲫鱼及黄颡鱼等鳃上的鳃霉,菌丝常弯曲成网状,较细而壁厚, 分枝特别多,分枝沿着鳃丝血管或穿入软骨生长,纵横交错,充满鳃丝和鳃小片。菌丝直径为 6.6~21.6μm,孢子的直径为 4.8~9.0μm,平均6.6μm。 5 鱼鳃霉菌的分离培养与形态观察 见附录 B。 6 非鱼鳃霉病的判定 鱼群经检疫临床无异常,池塘养殖水质清洁;或发现疑似病例,经流行病学调查、解剖检查、 显微镜检查等综合性判断,证明不是鱼鳃霉病,应作非鱼鳃霉病的群体对待。 7 无害化处理 凡判定为鱼鳃霉病的病死鱼和运装器具,必须作无害化处理。 7.1 发病养殖水体用百万分之一的漂白粉消毒;禁止发病鱼群异地(塘)转移或上市;装鱼的 器具用百万分之十的漂白粉浸泡15min 消毒; 7.2 病死鱼用锅炉焚烧,或加盖生石灰后深埋处理。 7.3 从境外引进的鱼类,须暂养 15 天,确定无鳃霉菌寄生,方可引进饲养。



附录 A (规范性附录) 规范性附录) 鱼鳃霉病的流行病学 鱼鳃霉病的流行病学
调查内容 疫区划分 流行病学情况 根据水产养殖病害监测结果,确定产地是否疫 区。 判断与诊断 如果产地是鱼鳃霉病疫区,患病 鱼出现典型鳃霉病症状,鳃霉病 的可能性大;如果是非疫区, 鱼 鳃霉病的可能性相对要小。 流行地区 我国南方省份。 北方省份发生鱼鳃霉病的可能性 相对要小。 流行季节 5~10 月流行,尤以 5~7 月为发病高峰期 1~4 月和 11~12 月发生鱼鳃霉病 的可能性小。 活动及 发病死亡情况 病鱼不摄食,呼吸困难,游动缓慢,常在几天 病鱼不摄食, 呼吸困难, 游动缓慢, 内大批死亡,但无明显的外部症状。 常在 1~2 天内大批死亡,但体表 无明显的出血、腐烂等症状,可初 步判断为鱼鳃霉病。 水质 池塘水质恶化,含有大量的有机质时易发病。 对池塘水质进行分析和观察,如果 含有大量的有机质或恶化现象,可 初步判断为鱼鳃霉病。如果池塘水 质好,鱼类患鳃霉病的可能性小。 鱼病防治 消毒药物治疗效果不佳,灌注清水可减轻发病。 患病鱼出现典型鳃霉病症状,多 次使用消毒药物防治,病情不见 好转,但池塘灌注清水后病情减 轻,可初步判断为鱼鳃霉病。 患病鱼种类 草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼、鲢鱼、鲫鱼、银鲴、 草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼等易感, 黄颡鱼等 。 其中鲮鱼苗最为敏感,如这些鱼 出现上述流行病学,可初步判断 为鱼鳃霉病。



附录 B (技术性附录) 技术性附录) 鱼鳃霉菌的分离培养与形态观察
B1 鳃霉菌培养基(沙保劳氏琼脂培养基) 沙保劳氏琼脂培养基配方如下: 葡萄糖(或麦芽糖) 蛋白胨 琼脂 去离子水 40g 10g 35g 1000ml

在高压下溶化,过滤,15 磅高压灭菌 15min。 B2 鳃霉菌的分离与纯化 用灭菌镊子取少许鳃丝, 在培养皿中剪碎, 均匀涂布于沙保劳氏琼脂培养基上。 ℃培养 3~ 28 7 天,如生长出霉菌,则进一步分离纯化,备用。 将分离纯化的霉菌,可采取下列方法进行培养和观察。 a 点植培养法 用来观察霉菌菌落的培养特征。 用接种针从斜面培养基上蘸极少量孢子, 点植于平板培养基 上适当的位置,例如成三角形的三点。然后将培养皿倒置,于 28 ℃培养 4 天、7 天和 10 天。 观察和描述菌落的大小、形状、颜色、表面、质地、高度、渗出物、气味、边缘形状等特征。 b 直接取菌法 可观察霉菌各部位构造的细节或测量其大小。方法是在干净的载玻片中央滴一滴乳酸苯酚 液,用解剖针或接种钩取少许霉菌置于液滴中,将菌丝体摊开,勿使成团,轻轻盖上盖坡片。 观察菌丝的宽度,有无横隔,特殊的菌丝构造特征;孢子的形状、颜色、表面的特征等。 B3 霉菌形态观察与判断 如培养的霉菌形态与 4.3.1、4.3.2 相似,可以确定为鳃霉菌,从而确诊鱼鳃霉病。



参考文献
1、陈奖励 何昭阳 赵文主编, 1992,水产微生物学,46~47 2、黄琪琰主编,1994,水产动物疾病学,145~146 3、廖延雄主编,1995,兽医微生物实验诊断手册,527~529

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