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检测牛血清中污染大肠杆菌噬菌体方法的建立 (1)




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中 国 生 物 制 品 学 杂志

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年第

卷第

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检 测 牛 血 清 中 污 染 大肠 杆 菌 噬 菌 体 方 法 的 建 立
尹红章
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李 秀华
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李德 富
北京
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药 品 生物 制 品 检 定 所





用 大 肠 杆 菌 标 准 噬 菌 体 株 选 择 确 定 的大 肠 杆 菌


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作 为宿 主 菌
灵敏度高


,

建立 了

检 测 牛 血 清 污 染 大 肠 杆 菌 噬 菌体 的直 接 噬 菌 斑 法 和 增 殖 法 关 键词
牛血清

此 法 操 作 简便

大 肠 杆菌 噬 菌 体

噬 菌斑 法

增殖法

噬 菌 体 是 组 织 培 养用 牛 血 清 最 易 污 染 的 一 类 细 菌 特 异 性病 毒 + , &


取 原倍



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,





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早 在 ? 年 代末 ?

,



检 牛血 清

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分 别 加培 养 7 宿 主 菌 培 养 物
,

外 许 多 厂 家 和 试剂 公 司
标比
定 白
。 。

,

均 已把 有 无 噬 菌 体

放 ) ℃ 振 荡培 养 7 ?

取 滤 液 直接 点 于 用 大 肠 杆菌
,

污 染作 为 衡 量 牛血 清 质 量 的一 个 重 要 指
,

均 匀覆 盖 的 营 养 琼 脂 表 面

? 放 )

℃ 培养

7 ? 后 观察





美国

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对 牛 血 清 也 有 明确 的 规

结果



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我 国 对 牛 血 清 污 染 噬 菌 体 的检 测 尚为 空
我 们 对 牛 血清 中 污 染 大 肠 杆 菌 噬 菌 体 检
,

噬 菌 斑 阳性 结 果 的验 证 试 验 转 种试验
,

!

增 殖法 阳 性 的样 品滤 液
&接

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培 养 3 7 大 肠 杆 菌 培 养物 &:
,

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测 方 法 作 了 研究

初 步 建立 了 操作 简 便 且 灵


养 肉汤 中 样
,

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℃ 培养


7

,

取滤液 同上增殖法 点
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敏 度 高的 检 测方法

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材 料和 方法
1

挑 斑接 种
7
,

挑 阳性 斑 接 种 至 ? :
,
,

养肉

汤 中 加 培 养 7 的大 肠 杆 菌 培 养 物 & : & 放 ) ℃ 振 ?
,

标 准 噬菌 体 株
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,

荡 培养
23
,

滤 液 同 上法 点 样

培 养 观察 结 果



大 肠 杆 菌 标 准 噬 菌体 西 省 卫 生 防疫 站
!

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购 自江
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菌种
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大 肠 杆菌 噬 菌 体 宿 主 菌 的 确 定

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本 所 中 国 医 学 细 菌 保藏 中 心 提 供
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为 国 内生 产 的

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待 检 牛 血清
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菌分 别对



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敏感

提示

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菌 具有 较 高 的 噬

三 批 牛 血清

菌 体检 出 率


见表

宿主 菌 的 选择
,

标 准 噬 菌 体 对 大 肠 杆菌 敏 感性
噬 菌 体

取 标 准 噬 菌 体 直 接 点 于 用 不 同菌 号 大 肠 杆 菌 均
匀 覆 盖 的 营 养 琼脂表 面 ? 放 )
℃ 培养 ?7 后

观 察结

菌株
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后 倾 注 在 准 备 好 的琼 脂 平 板 上 面 使 其 覆 盖 整 个表



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养 次 日观 察 结 果
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