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果蝇唾腺染色体制片与观察


果蝇唾腺染色体制片与观察

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果蝇英文俗名fruit fly,属于节肢动物门,昆 果蝇英文俗名 ,属于节肢动物门, 虫纲,有翅纲双翅目,完全变态昆虫。 虫纲,有翅纲双翅目,完全变态昆虫。 果蝇是模式生 物之一, 物之一,得到了广泛 的研究。 的研究。

实验目的
1.练习取出果蝇幼虫的唾腺和制作唾腺染色体标本 的方法与技术。 2.观察和识别多线染色体的特征: a.巨大,多线; b.染色体配对,染色体只有体细胞的半数(n); c. 染色体含异染色质多的着丝粒部分互相靠 拢 , 形成染色中心(chromo center) ; d.横纹有深、浅、疏、密不同,而且各自对应排 列,这意味着基因的排列。 3.练习绘制多线染色体图。

实验原理
双翅目昆虫(果蝇、摇蚊等)幼虫期的唾腺细胞 很大,其核内的染色体称为唾腺染色体(Salivary chromosome)。由于它们比普通染色体大100150倍,宽约5?m,长约400?m,因而也称为巨 大染色体(giant chromosome)。另外唾腺染色体 经多次复制而不分开,所以又称作多线染色体 (polytenic chromosome)。唾腺染色体经染色后 出现深浅不同,疏密有别的横纹,这些横纹的数 目和位置常常是恒定的,标志着物种的特征。当 染色体上有结构畸变,如缺失、重复、倒位、易 位等,很容易在唾腺染色体上鉴别。

材料、用具及药品

果蝇的三龄幼虫 镊子、解剖针、载玻、盖玻、吸水纸 改良品红、0.7%生理盐水

四、程序
? ? ? ? ? ? ? ? 培养 选材 剖离 剔除 染色 敲片 压片 镜检

剖离
? 1.在载坡片上加上一滴生理盐水,把果蝇三龄幼 虫移入其中,左手持镊子按住幼虫前端1/3处固 定幼虫,右手持另一解剖针按住幼虫头部,果断、 快速、有力地向右拉,把虫体前端扯断,唾腺随 之露出。唾腺呈半透明,球棒状,前端较细,后 端粗钝,有时成对粘在一起成“V”字型,其外侧 有时附有乳白或淡黄色的脂肪, 此时应保留唾腺 形态的完整,因为食道和肠管也是半透明的,如 果唾腺不完整,就很难判断唾腺和肠道的取弃。 在显微镜下观察,去掉肠道等其他杂物,留下唾 液腺。

2.把唾腺剔出移到玻片的干净处,并清除其余器官和组织。 如果唾腺上附有脂肪,应把乳白色或淡黄色的脂肪清除干 净,保留半透明的唾腺。 3.把多余的生理盐水用吸水纸吸干,加一滴 1mol盐酸;室 温下水解2分钟,然后吸干。 4.用蒸馏水一滴,清洗吸干2次。吸水纸不要太靠近标本, 以免标本丢失。 5.加一滴改良品红,染色20-25分钟。染色的同时,用镊子 把唾腺稍捣碎。 6.用镊子取一盖玻片,以45。角徐徐落下,排净气泡。 7.敲片 8.压片 9.观察

关键步骤
果蝇头部和尾部的区分: 头部有一小黑点 取材: 唾液腺 透明,有两层细胞组成。上面有白 色的脂肪(显微镜下呈黑色) 压片: 把唾液腺片段集中起来


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