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制猪瘟犊牛睾丸细胞苗用种毒的保存期试验


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中国善 葑杂志 

卷 边 脱 落 存 在很 大 差 别 。 种 毒 ( 毒 )研 磨  脾
后 ,毒 液 不 经 过 离 心 沉 淀 去 渣 和过 滤 抽 清 处  理 ,毒 液 比 较 混 蚀 , 毒 液 中含 有大 量 比 较 大 



胞 培 养 疫 苗 , 只要 严 格 控 制 细 胞 传 代 的 次数 
( 般 不 超 过 第 四 代 ) , 对于 克服 细 胞 脱 落  一 的 问 题 是 有 效 的 。 从 我 厂 多 年 的生 产 情 况    看 , 凡 由原 代 细 胞带 毒下 传 的 次 代 细 胞 都 普  遍 生 长 良好 , 不 容 易 脱 落 , 细 胞 贴 壁 都 可 达 

的 脾脏 组 织 颗 粒 ,这 些 颗 粒 则 作 为 一 种 抗 原 
物 质 不 断 刺 激 细 胞 , 毒 害 细 胞 , 同 时在 细      胞 维 持 液 中 台 有 大 量 这 些 破 碎组 织 ,造 成 维 

到  。这 可 能 是 细 胞经 过传 代 , 并随 着代 数  的 级 进 , 细 胞 对 离 体 环 境 不 断 的 适 应 ,不 断  地 受 到 人 工 环 境 “风 土驯 化 一 的 缘故 。 当 然 
带 毒 传 代 必 须 严 格 控 制 代 次 , 以防 细 胞 的生 

持 液 的 P 改 变 , 井导 致 维 持 液 渗 透 压 的 改  H 变 , 从 而 对 细 胞 失 去 平 衡 作 用, 使 细 胞 出 现  圊 缩 乃 至 最 后 死 亡 脱 落 。 我们 统 计 了二 年 的  数 据 , 接 种 的 种 毒 液 是 不 经 沉 淀 去 渣 和 过 滤  抽 清 处 理 过 的 , 细 胞 脱 落 率高 达 3  多 。 接  O 种 经 过 离 心 沉 淀 去 渣 和 过 滤 抽 清 、毒 液 清 亮 
的 种 毒 液 , 细 胞 仅个 别 瓶 脱 落 , 细 胞 脱 落 率  不 到 6 。 据 此 ,从 1 9 年 开 始 至 今 ,我    90

物 学 变 性 。 为 了 确 保 产品 质量 ,我 们正 安 排  传 代 细 胞 毒 免 疫 原 性 的研 究 , 以便 对这 一 生  产 工 艺 作 出正 确 的评 估  在多 年 的犊 牛 睾 丸 细 胞 培 养 苗 的 生 产  中 , 我 们 深 深 体 会 到 , 细 胞 苗生 产 工 艺 复      杂 ,工 艺 环 节 相 互 影 响 。 因 此 ,防 止 细胞 脱  落 是 一 个 复杂 的 问 题 , 应 该 从 生 产 的 各 个 环  节 认 真 加 以考 虑 ,采 用 综 台 的 防 范 措施 ,才  能 加 以 解 决 。 如 对 各 种 溶 液 的 配制 除 要 准确  称 量 外 ,所 用 的 化 学 试 剂 一 定 要 严 格 确 定级 

们 采 取 3 0 转 / 分 离 心 2一 2 分 钟 沉 淀 去  00 O 5

渣 ,同时用空气过旅板 过滤 抽清的办法 ,对 
种 毒 液 进 行 处 理 。 从 19 年 共 接 种 了细 胞  90
5 8 , 出现 脱 落 的2 瓶 , 脱 落 率为 5 0   , 1瓶 6 .2   平 均 每 瓶 细 胞 有 效 收 次 为 4 7 , 有 效 复 收 指  .1 数 为41 。 7   

别并稳定 厂家 、牌号,配 液 必须 是电阻值在 
2 0 万 欧 姆 以 上 的 去 离 子 水 J所 用 血 清一 定  0

三 、 采 甩 四 代 以 内 的 带 毒传 代 生 产 工 艺 

要 清 亮透 明 、 无 沉 淀 异 物 , 自家 采集 制备 血 
清 应 尽 量 减少 混 血 或溶 血 等 ,以 上 这 些 也 是  十 分 重要 的 。  

所谓 “ 带毒传代  生产工艺,我们曾在 
( 国兽 药 杂 志 》 1 9 年 第 2期 作 过 详 细  ( 中 90

报 道。采 用带 毒传代 的生产工艺生产猪瘟 细 

制猪瘟犊牛 睾丸细胞苗用种毒的保存期试验 
离永锐 王成 业 江业超 陆增荣 凌 影 子  ( 西 兽 医 生 物 药 品 厂) 广   用犊 牛 睾 丸 细胞 培 养生 产 猪 瘟 活 疫 苗 ,   收 液 的 效 价 是 否 因此 而 降 低 。 为 此 ,从 去 年 

猪瘟 兔化 弱毒种毒 ( 毒)的保 存期 是保 存  脾
于 一1 ℃ 以下 不 超 过 l天 。 在实 际大 批量 生  5 5 产 中 , 会 受 到 多方 面 因素 ,特 别 是 原材 料 供  应 等 因 素 的影 响 , 种 毒 的 保 存 难 免 有 时 会 超  过 1天 的保 存 期 。保 存期 超 过 了 l 天 的 脾 毒    5 5

开始,我们对这项工作做了试验 ,现将 试验 
结果报告如下。   一 、材 料 与 方 法  1, 种 毒 的 生产 及 保 存 : 试 验 用 的 猪 瘟 

继续应 用于犊牛 睾丸细胞 苗的生产,其细胞 

兔化弱毒脾脏毒种 ,为我 厂正 常生产甩的种 

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‘  多 1 苎塑  鼍  鱼!
毒 , 减 价 ≥ 5×1 —, 保 存 于 一1 ℃以 下 , 05 7  
保 存 时 间超 过 3 天 。 0  

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生 产 工 艺进 行 。  
二、结 果 

2、细 胞的 制 备 、接 毒 ,收 获 换 液 及 毒 

试 验 批次 、 种 毒 保 存 天 数 及 细 胞收 液 数  价 测 定情 况见 下 表 :  

液 效 价 的 测定 : 均 按 我 厂 制 定 的 猪 瘟 细 胞 苗  保 存 时 间 
( ) 天  
l  

批 .   次



数 

收 
2   8  

次 
4   5  
—  

6  

9 0  09
9 1  0  7

8  
2  2

3  3
5  l

+  +
÷   -+

+   ++
上   ÷+
— —

污 染 真 菌 弃 去 
上  
 

+  +

+   ++

++  

9 21 0  
90 2 2  9 0  15 91   96

1  2
2  4 5   5  
L  

5  0
3  1 4  8 4  8

( ++) +  
+   ++ +  + +   ++

+  +
+   +   十+ +   ++

-   七+
一 抖  - }   卜+ + *  +

T   ++
( +) 抖   士+   +   ++

七   ++
* +   一 十  + +   一    +

注 : 各收 次 测 毒 均 按 5 万倍 连 毫  括 为 结果   释  1 母 ’号内 复硷 。


6批 7 瓶 细 胞 试 验 I至 5收 全 部 合 格 , 6  



1" 7C以下 5 天 以 内保 存 , 用 于 猪 瘟 犊 牛  0

总 的 收 次 台 格 率 为 9 .5 , 高 于 我 厂 1 9  6 5  90 年 全 年 生 产 的 3 批 2 7瓶 细 胞 的 总 收 次 台格  l 9
率9 .  。 16   三、小 结 

肇 丸 细胞 苗 的生 产 , 细胞 收 液 的 效 价 不 因 此 

而 降低。由 此,我们 认为生产猪瘟 犊牛睾丸  细胞 苗 种 毒 的 保 存 期 超 过  规 程  规 定 的】  5 天 ,但不 超过4 天 的情况下 ,仍用于生产是  5
可 行的 。  

从 试 验 结 果 可 见 , 猪瘟 兔 化 弱 毒 种 毒 于 

选择 不 同萌 芽程 度 黄 豆芽制 作 培 养基 对  炭疽 芽 胞苗 株 生 长情 况 的 总 结 
田子 怡 率玉华 ( 指导 )  

王向杰





捌万 才

胨 慧 敏 

( 州生 物 药 厂  郑
我 厂 从 1 7 年 开 始 相 继 用 黑 豆 芽 、 黄    5 9

原 材 料 , 简 化 工 艺 ,替 代 了 大 扁 瓶 固 体 法 生  产 。 其 结 果 生 长 芽 胞 数 多 , 效 力 、 安 全 、 免 

豆芽 制作 培养 基,经通气培养试制炭疽 ( 无 

毒 、二 号)芽 聃苗,可改 善劳动条 件,节 绔 

疫期,保存期均达瑚部颁规程标准。取得了 


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