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各种昆虫标本的制作方法分享


各种昆虫标本的制作方法分享

针插标本制作法

一般成虫都是制成针插好制标本,这种标本不需要任何处理就可以永久保存. 方法:把标本从纸袋取出(如果标本好脆,需要放到回软缸里回软),用昆虫针(视昆虫大 小而选用不同型号的昆虫针)插上,针插的部位一般是在中胸中央,但可因不同昆虫而针插 部位不同.鞘翅目插在右边翅基部约 1/4 处,半翅目插在小盾

片上,双翅目插在中胸靠右 边,蝗虫插在向前伸延的前胸背板右边. 标本插好后,要整姿,将虫插在整姿板上,使虫体与板接触,然后用针将触角,足,尾 须,产卵器等摆好,使标本的姿式尽量接近于生活时的样子.要左右对称.足一般是前足前 伸,中,后足向后放.鳞翅目和蜻蜓等成虫还要在展翅板上展翅,使前翅后缘与身体垂直, 后翅向上展,略压在前翅下边,然后用纸条压上.展好姿的昆虫好燥后去除纸条就做成标本 了.最后再插上两张小标签,一张写上采集地点,采集日期,采集人的名字.一张写上昆虫 名字. 标本及标签部位的高低均要一致, 将标本整齐放在标本盒内, 盒内放上樟脑以免虫蛀.

幼虫标本的制作

幼虫除酒精浸泡还可制成吹胀标本.制作方法是将幼虫用毒瓶杀死,头部向内,肛门向 外地摆在废纸上, 用铅笔或解剖针木柄由头部向后先将粪便压出, 继之用力将标本内脏全部 由肛门挤出,用剪刀或镊子去掉挤出的东西(注意不要损坏肛门),而只剩下一层空皮,一 端扎好,另端用蓄气囊向空皮内充气,待恢复到幼虫原来形状后在电炉旁慢慢烤于,将扎线 取下后,用火柴棍插入体内,再用昆虫针插在棍上,即成吹胀标本.

外生殖器标本的提取方法

昆虫的种类很多,外生殖器的构造也因类群和种类不同而大有区别.因此,不同类群 昆虫外生殖器的提取制备方法也应分别对待. (1) 鳞翅目昆虫外生殖器标本的提取方法 刚毒杀死或死后 24 小时内的新鲜成虫标本, 只要将标本腹面向上,安放在软木解剖台上,在双目解剖镜下,用右手直握细微钩针,左手 按住小软木台, 使左手拇指托住针身, 沿标本尾端腹面里侧中央部位, 使针钩尖端向上伸人. 伸人的深浅, 视虫体大小而定, 一般约伸人到腹部长度的四分之一处, 将针钩尖端翻转向下. 这样就刚好钩住雄性抱握器腹内基的骨化部位. 然后很均匀地用力向外拉, 不久即可见到抱 握器两端平均向外伸开, 逐渐被拉露出来. 这说明所拉位置和方向都很恰当, 再继续向外拉, 直到完整地拉出来为止. 如向外拉时看不到抱握器很平均的分开或上下移动, 则说明所拉位 置不当, 如果再向外拉外生殖器便会被损坏. 这样应把针钩再向里伸, 并调整其方向和位置. 钩针所达到的深度要适当,位置也需正确,这是能否得到完整标本的关键.用此种方法制备 雄性外生殖器的效果很好,很完整,连储精囊也能完整地拉出来.如果是雌性标本,只要用 心仔细,也能将囊导管,管带及交配囊完整地拉出来,而且腹部的鳞或毛都完好地保存着, 不会因用拇指和食指夹看拿取外生殖器而使鳞片及毛大量脱落.如果是长久保存的好燥标 本,必须进行还软工作.还软时间的长短,视保存年限及不同种类而定.如在室温 25C0 左 右,还软 48 小时后的夜蛾科粘虫,毒蛾科的榆毒蛾,灯蛾科的红袖灯蛾,枯叶蛾科的松毛 虫雄性标本作比较,四种蛾类用钩针轻压腹部都稍可下陷,但只灯蛾能勉强全部拉出来.另 外三种只能将骨化较强的抱器腹和抱器端拉出来, 其他部位则丢失在腹腔内. 如再反复钩拉, 便会将外生殖器拉散.还软 72 小时的上述四种标本,腹部用钩针轻压已还软如初,进行钩 取都能完整取出,但以灯蛾为易,夜蛾次之,毒蛾及枯叶蛾较差.

不同还软时间制备效果不同,还软时间稍短,腹部节间膜不易被拉长,但有些种类钩取 就困难些.还软时间过长,虽然拉取外生殖器比较容易,但腹部节间膜易被拉开,而且再好 燥后不易复原.

好燥标本的还软时间, 与保存年限很有关系, 保存年限短, 制备就易, 年限越长就越难, 同时也要视虫体的大小而定.一般都需要还软 48 小时以上,所需还软时间越长,还软器中 的温度应略低,使湿度小些,这样水气便渗入标本体内较慢,避免虫体上的毛及鳞片因湿度

大而贴连在一起(还软过程中要防止长霉).曾将还软后的上述四种蛾类,在钩取前先将腹 部末端几节腹板剪开 5 毫米长小口,然后再用钩针向外拉,结果无论哪种蛾类都无补益.反 而易将腹部拉破且不易按合在一起,即便用胶粘上也有失原来形状.

(2).膜翅目昆虫外生殖器标本提取方法 主要以叶蜂作材料.叶蜂科昆虫雌性外生 殖器的基部骨化较强, 在制备时要先用剪刀剪断才能取下来. 使用的标本首先要还软适当 (初 毒杀死或死后 24 小时内的标本按新鲜标本使用).还软时间过长标本极易变形和褪色,特 别是较小型标本,体壁过软不易动手工作.还软时间过短又易将标本腹部折断或震碎.一般 只需要还软 24 小时即可.

好作时把还软好的标本放在小软木台上, 使腹面向上. 用两支细昆虫针交叉插在软木台 上将腹部压住,使标本身体略侧置,生殖器部位略向着右侧方.左手按住软木台,右手握剪 刀并以左手拇指作依托,伸向腹端.剪刀要以里刃在下方,外刃在上方,这样可防止将生殖 器的基部及护板损伤. 剪刀要从腹部腹板第七节与背板第九节间伸入, 但角度不能过直或过 前过后.过前剪不断,过后不易伸人或伸人到负瓣的下面去.位置摆好后,先右一剪,后左 一剪.如所剪位置恰当,生殖器端部即向上翘起.再将手腕翻转使剪刀横着平伸向负瓣片与 载片之间剪第三剪. 如左右两剪剪得不好, 生殖器端便不会翘起来, 可用拔针将生殖器拔动, 使负瓣移动而显示出来再剪第三剪.

叶蜂雌性产卵器是由四瓣组成,背面的一对即第二负瓣片,腹面的一对即第一负瓣片. 第二负瓣片的左右两片在其背部至少有部分相连而不易分开,第一负瓣片的两片则容易分 开. 在第一, 二负瓣片之间的连接不是粘着和钩住, 而是由槽与凸相连锁, 第二负瓣片居外, 第一负瓣片居内. 要把两负瓣片上下分开极易损坏, 如把两块负瓣片各自向相反的方向推动, 便会很容易地分开.第一,二负瓣片是生在两块载片上,而第三负瓣片显著厚而宽,是用来 保护和支持第一负瓣片在产卵时发挥更大的功能. 产卵时两块负瓣片通过中间的滑缝自由伸 缩,用第一负瓣片上的锯,锯破植物组织而产卵.因此,要想完整地剪取叶蜂的雌性外生殖 器,全面了解其构造是很必要的.

叶蜂科昆虫雄性外生殖器粗大而集中,取出来就比较容易.新鲜标本只要将腹面向上, 安放在软木工作台上,在双目解剖镜下将钩针平行地紧贴下生殖板伸入.根据身体大小,约 在 2 毫米深处将钩针尖端翻转向下,再徐徐向外拉,便可完整地取出来.已经好燥保存 2-4 年的标本,只要还软 24 小时也能顺利取出来.

(3).鞘翅目昆虫外生殖器标本提取方法 鞘翅目昆虫的雄性外生殖器,在一般种类 中骨化程度都比较强,而且形状长大于宽.所以杀死后 24 小时内的新鲜标本,只要将钩针 自腹端腹板的里侧靠边伸入. 伸入的深度视虫体的大小而定, 再将钩针半翻转使其横着向中 央移动,然后徐徐向外拉,都可全部拉出.好燥后再经过还软的标本(还软时间最好在 24 小时以上),因腹内脂肪牵连太多极易将腹节拉长或拉断.要先用剪刀在腹板内两侧各剪下,但下剪不宜过深,以免将生殖器损伤.剪后再拉,也能全部取出来.

天牛,金龟子及其他较大型步甲的雄性外生殖器,与腹内浸泡约 20 分钟,使其完全软 化.用左手拇指和食指握住腹部末端两侧(腹面向上),轻轻一捏,腹部第九节与第十节间 即裂开一条横缝.右手握镊子将第九腹板掀起,即看见两片角质化的阳基侧突尖端露出.只 要用镊子夹住,轻轻向外拉,便将全部生殖器拉出,浸在 75%酒精中备用.

处理和保存

处理和保存昆虫外生殖器备作研究的方法很多,经常使用而比较好的有:

1).制片保存 昆虫的外生殖器,一般说来角质化都比较强.因此,提取出来的材料, 最好要经过脱水, 透明手续后用加拿大树胶封在玻片中保存. 因作好的生殖器玻片已与原来 的标本分开,为防止混乱和丢失,玻片上一定要贴好与原标本完全相同的标签,写明种类, 采集地点,日期及标本上的原来编号,然后放在玻片标本盒中保存.制片方法如下:

(1)加拿大树胶制片法 将解剖出的昆虫外生殖器放在 10%的氢氧化钾(KOH)溶液中,水浴加热数分钟(时

间看虫体的骨化程度而定),把不必要的肌肉,脂肪清除掉,用水洗净,经品红染色,放入 75%的酒精中保存备用.制片时用各种浓度的酒精(85%,90%,95%),进行脱水处理. 每更换一次浓度必须经过相当长的时间(一般约 15 分钟).骨化较强的材料,要在每个浓 度中延长时间.然后再放人 100%的酒精(无水酒精) 中,浸泡约半小时或更长些.每次 更换浓度时,要用滤纸或脱脂棉把原来酒精吸收好净.以上这一步骤称为脱水.进行封片的 标本所以要进行脱水这一过程, 是因为树胶和水不能溶解在一起, 如将带有水分的标本封在 胶中,便会混浊不清或使标本变质,不易保存. 经过脱水的标本再放人二甲苯中把酒精替出,并起到透明作用.标本移到二甲苯中时, 若溶液发现混浊现象,表示水分尚未脱净,应再退回到 100%的酒精中去处理.在二甲苯溶 液中的时间不宜过长,只要虫体完全透明,便可移到载玻片上.将虫体位置摆好,并把标本 边缘多余的二甲苯吸去.立即滴上加拿大树胶,随即盖上盖片.盖片时必须小心,用镊子或 手夹住盖片的一端,斜向着载玻片,使盖片的一端先碰到树胶,然后很快将手或镊子松开, 使盖片自然地贴在胶液上.这样可避免产生气泡.如果仍有气泡发生,可用针轻压盖片,或 在载片下稍加热.但最好等待几小时或在 50 度恒温箱中放置一段时间,较小气泡就会自然 消失. 如果树胶量加得合适,盖玻片放好后,树胶刚好溢到盖片的四周.如盖片下面仍有树胶 未溢到之处,说明加胶不充足.应及时用拨针粘树胶滴在盖片下缺胶部位的边缘,胶便自然 渗入与盖片下的胶液愈合.加胶时千万不要将胶掉在盖片上.盖好盖片后,在载片的一端写 上临时标签,放在平稳清洁但要通风的地方,最好放在上面有玻璃盖的,下面有通风纱窗孔 的晾片盒中.也可将载片放在用硬纸板作的,每张载片之间有隔格的晾片盘中,平稳地放在 好净的书柜中,使其自然好燥.经过 10-15 日后,盖片周围外溢的胶液已开始好固,便可开 始修整,先用小别刀刮去载片上多余的树胶,或用小毛笔蘸少许二甲苯轻轻擦去树胶(但不 要触动盖片),并擦净载片上的灰尘,贴上正式标签,一张玻片才算作好了.在未加修整前 如果看到盖片下标本的四周有似白色雾状体时, 那是因脱水不净造成的. 此种玻片标本不能 使用,如是稀有标本应及时将整个玻片故在二甲苯中,溶去胶液取出标本,重新脱水,透明 制作.封片时所用胶液如果过稀时,好固时由于二甲苯的蒸发会使盖片下产生空隙,称为脱 胶.此时可先在盖片下的空隙中滴入少许二甲苯,使原来胶液的边缘溶解后,再用拨针滴人 胶液,使其自然流人即可.一旦技术熟练后,上述许多缺点便会自然克服.

加拿大树胶,是在化学试剂商店买的成品.如是树胶好粉,可先在好净玻皿中磨细,加 入适量二甲苯溶解,装人细颈瓶中备用.

(2)甘油鱼胶制片法 先把鱼胶切成小块, 在蒸馏水中浸泡 2 小时. 连同放鱼胶的溶器放在沸水中隔水煮至鱼 胶块完全溶解后,加入甘油与石碳酸,同时用玻棒加速搅拌,趁热过滤,保存在有色瓶中. 甘油鱼胶的配方是: 清洁的鱼胶 4 克 蒸馏水 70 毫升 纯甘油 80 毫升 石碳酸 2 毫升 这种胶液冷却后便会凝固, 用时先把胶瓶放在热水中溶解. 制片时先把标本放在甘油及 水各半的混合液中一段时间.并将载片擦好净烤暖,把标本放在适当位置,然后整姿,加甘 油鱼胶在标本上,盖上盖玻片,贴好标签便可. 用这种胶液制片,可省略脱水手续,作为一般观察效果很好.但在高温潮湿地区使用, 长期保存,盖片边缘的胶有生霉现象,可用毛笔蘸少许石碳酸清除.

2).贴封保存 是用厚纸剪成长方形块,在一端的中央打好圆形孔,先用透明玻璃胶 纸贴好一面,将处理好的外生殖器标本沾粘在胶纸向内的一面上,再用另一张胶纸贴好,或 先用两块胶纸把材料贴封在中间, 再用两块打好圆洞的方形纸将其粘合在中间, 然后在纸块 上注明种类,采集日期等,插在原来标本的标签下方.贴封保存昆虫外生殖器适合于体型较 小的种类.这种方法的优点是外生殖器不离开原来的标本,可随时取下在镜下观察.缺点是 保存时间长久,胶纸失去原有的粘韧性而发脆龟裂,将材料损坏.

也可在打好圆孔的厚纸片上,先贴上一块盖玻片,上面滴上胶液,放上经过脱水透明后 的昆虫外生殖器, 再用四分之一大小的盖片封盖好. 这种方法则兼顾了制片与贴封两种方法 的优点.

3).瓶装保存 是将用甘油临时封装法观察研究过的昆虫外生殖器材料,用甘油浸泡装在 小玻璃管内,同原来标本插在一支昆虫针上,日后随用随取.甘油浸泡又能增加标本的透明 度便于观察;缺点是日久甘油会透过瓶塞外溢而挥发掉,要注意检查补充.也可用由聚乙烯 制成的小瓶封存.因聚乙烯不受普通酸及溶剂的影响,且不易破碎.瓶塞可用白硅酮橡胶制 成.瓶塞稍有坡度以便贴合塞入瓶中.在一角度用针刺穿瓶塞以防甘油流出.这种装昆虫外 生殖器小瓶直径为 5.5 毫米,带塞长 17 毫米.

二,微针及黏贴法 有些小型昆虫,用普通的昆虫针太大,无法插入虫体,此时就需要用更小的微针来插虫,然 后将微针插在小块的软木片上,再将普通昆虫针插在软木片上.若还有更小的昆虫,则可以 用黏胶,将虫右侧中胸部份黏贴在小型三角纸的尖端,再用一般昆虫针将三角纸插起来. 三,浸渍法 有些昆虫体表较为柔软, 例如白蚁或完全变态类昆虫的幼虫时期, 无法制成针插的乾燥标本. 此时,可将虫体浸泡在液体中.通常先用专用固定液或热开水将虫体组织固定,再浸泡於 9 5% 的酒精中保存.注意,保存的玻璃瓶要密封,否则酒精很容易挥发.有时标本会脱水或 虫体的体液流出,而使酒精浓度变低,那时就必须更换几次酒精. 四,玻片标本 玻片标本适用於体型极小的昆虫,必须用显微镜或放大镜观察他的形态特徵. 例如 虱子,跳蚤,蚜虫等.一般步骤为,将采集标本浸泡在 10%氢氧化钾溶液中,将虫体 的骨骼软化一天后再取出,用蒸馏水清洗,必要时以洋红等染剂染色,以利观察.随后以 5 0, 60, 70, 80, 90, 100%等浓度的酒精,进行一系列脱水,再以阿拉 伯胶封片,乾燥 2-3 周后,即大功告成.

制作针插标本需要的工具: 制作针插标本需要的工具: 一,昆虫针 昆虫针由不锈钢制成,长度约 3.5-4 公分不等,其尖端锐利可以插入虫体.有些昆虫针的另 一端有类似大头针的圆头,有些则无.昆虫针依大小分为 5-0 号,可适用於不同大小的虫.

另外还有微针,其长度约为昆虫针的 1/3,并且更为细小. 二,展翅板 展翅板主要由三片软木或保利龙板组成.下层一片约为 30×30 平方公分的正方型. 上层二片,约为 10×30 平方公分的长方型.上层二片平放对齐,互相平行排列,中间留约 0.5-1 公分凹槽,供虫体腹部伸入,并使翅平放於上层板片上. 三,整姿台 整姿台主要是一片软木或保利龙板,供针插标本后,将虫体各部位固定在整姿台上,使标本 保持自然姿态,不让其卷曲. 四,平均台 由三块不同高度的木板组成,在各块木板中,挖不同深度的中空洞口.针插昆虫后,为维持 昆虫在虫针上的高度及标签高度彼此一致, 可将标本连虫针插入洞口, 调整标本及虫签高度, 如此标本作好后,放在标本盒内,彼此高度较整齐划一,也较为美观. 五,虫签 为详实记录标本资料,每一个标本必须要有一张标签.标签是由大小约 1×1.5 公分之硬纸 制成,称为虫签.虫签上必须忠实地记录采集时间,采集地点及采集者等三项资料,缺一不 可. 六,其他 制作标本时还需要大头针,压条纸,镊子等,以协助固定标本用.

如何制作针插标本 一,选择昆虫针 依昆虫标本大小不同, 选定适合的昆虫针. 例如金龟子等可用 5 号虫针, 中型蝴蝶用 3 号针, 而小型蚊子则用 0 号针即可. 二,插针 插针位置一般以插在昆虫中胸右侧为准.而椿象则插在小楯片右侧,如图 4-1.针插入的深 度到底要多深?一般以标本上方约还留有整只虫针的 1/3 长度为准. 但有时必须视虫体厚度 来调整.

三,展翅 有些昆虫要展翅,例如蝴蝶,蜻蜓等.展翅时,先将插好针的标本,小心插入展翅板中,使 虫体陷入凹槽内,而翅膀和展翅板呈水平位置.随后以镊子将翅展开,使前翅的后缘和身体 呈垂直.将翅调整至理想位置后,一手以压条纸压住翅膀,一手拿大头针插在压条纸四周, 但不能插到翅膀, 使压条纸与展翅板紧密接合, 藉以固定翅膀. 展翅后, 另外调整一下触角, 脚及腹部位置后,即大功告成. 四,整姿 有些昆虫不需要展翅,例如蚂蚁,金龟子等.但在标本采集后,虫体会卷曲,死相很难看, 为使将来容易观察,以及维持标本美观,必须要整姿.整姿时,前足及触角向前,中后足向 后,将身体各副属器官伸展开来.用镊子将欲固定的部位放到适当位置后,以大头针协助将 肢体固定在整姿板上,再烘乾即可. 五,烘乾 当标本完成上述动作后,已经大致就绪,剩下的工作就是标本烘乾.一般在 50℃的定温箱 中烘乾一星期左右即可.如果没有定温箱,也可以用日晒法或用烘衣机代替.千万不可以用 微波炉,烤箱或瓦斯炉. 六,保存 标本烘乾后,即可放入标本盒中保存.理想的标本盒,其四周应该留有空隙,以便放置樟脑 丸.平常也可以用铁制的饼乾盒替代,在盒内铺一层保利龙板,将标本插在盒中保存.标本 盒需放置於通风,乾燥处保存.一个保存良好的标本馆,一般标本可以维持上百年而不致损 坏.每一个标本代表著一个生命,应妥为爱惜,并善加利用.譬如说仔细观察他的形态,并 尝试进行分类或其他科学研究.

利用翅脉 翅脉作为分类依据,在鳞翅目中尤为常见.为了使翅脉清晰易见,必须将翅制成透明程 翅脉 度极强,又将翅脉染上颜色的玻片才便于观察.使用漂白方法制成的玻片,手续简便,省去 涂刷鳞片的过程.

1)漂白及制作过程 先自虫体上取下完整的前后翅,浸入 75%的酒精液中使其湿润. 然后将翅移至 1 份水加 9 份盐酸的稀盐酸液中 1-2 分钟,吸去稀盐酸液,滴入由 0.4 克漂 白精加 10 毫升蒸馏水的漂白精溶液中. 如此反复在稀盐酸及漂白液中往返多次, 翅面上的 鳞片就逐渐被漂白并脱落.当由稀盐酸移至漂白液中时,常见到翅面上有许多气泡,较薄的 翅也同时会卷缩.遇有此种情况,可用毛笔轻压,排出气泡.如在显微镜下检查翅上鳞片已 漂净,而翅面上下仍有气泡时,可移入 75%酒精中,以软毛笔在翅面扫刷触压,气泡就可 完全去净.如果仍有未透明部分或鳞片尚未漂白或脱净,可再返回前漂白液中顺序处理.

为使翅上脉纹更为明显,将洗涤好净的翅放入盛有伊红或酸性复红的小型染色玻皿中, 隔水加温 5-10 分钟(以翅脉完全染上红色为度)取出,移入 75%,95%,100%三种浓度酒 精中脱水.吸去酒精,注入二甲苯,使之透明后即可放在载片上,滴上加拿大树胶,盖上盖 玻片.

无论在漂白,脱水,透明各步骤或清洁洗净时,都要特别小心,以防翅膜皱褶,如出现 上述现象,千万不要用镊子或拨针触动,要用软毛笔帮助展平.替换各种液体时,最好不要 搬动翅,而是用吸管在原玻璃皿中换液,并用吸水纸吸净.

2)玻片上漂白脱水法 如制作麦娥,菜娥等小型蛾类,上述方法还可能将翅损坏;那 就采用直接在载片上漂白脱水手续. 先在双目解剖镜下取下前后翅, 平放在擦好净的载片上, 先用吸管轻轻在翅面上滴上一滴 75%的酒精,2 分钟后用吸水纸吸好.再用另一只滴管吸盐 酸液滴在翅上,过 2-3 分钟后吸去,滴上漂白精液,2-3 分钟后吸去,再滴上稀盐酸液,多 次反复直至鳞片透明脱落. 多次滴上蒸馏水洗净稀盐酸及脱落的鳞片, 然后滴上冰醋酸一滴, 在 10 一 20 分钟内更换 4-6 次后,用吸水纸吸好,加二甲苯透明.如见滴上的二甲苯液有混 浊现象,也要更换几次,待完全清晰后,吸去二甲苯,滴上加拿大树胶盖片封固便可.每次

换液时,滴上的溶液不宜太多,以免将翅浮起而卷缩.换液时一定要将前液吸净,避免脱水 不净,透明不彻底封片后会出现白雾状,影响镜检工作.

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