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透皮试验研究动物的选择及离体皮肤的制备


透皮试验研究动物的选择及离体皮肤的制备
近十几年来常用于经皮渗透研究的动物可分为两大类, 即无毛动物和有毛动 物,无毛动物主要有无毛小鼠、无毛大鼠、蛇等,有毛动物有小鼠、大鼠、豚鼠、 猪、兔等。有毛动物与无毛动物的皮肤,在结构上的差异主要是皮肤附属器的不 同。药物可以通过皮肤附属器吸收,而且吸收速度也较快,但吸收面积只占整个 皮肤的0.1%~1%, 所以不是主要经皮吸收

的主要途径。 不同动物皮肤渗透性不同, 研究表明:猪、猴的皮肤渗透性与人皮肤相近,家兔、大鼠、豚鼠的皮肤渗透性 比人皮肤大,选择动物模型时应注意。 猪皮肤对药物的渗透性较接近人体皮肤,且2~3月龄的小猪皮肤解剖生理特 点最接近于人,选择小猪皮肤作为透皮吸收研究模型较理想。取皮部位常用猪背 部和猪耳。 在做体外透皮吸收试验时,提供猪的种系、性别、年龄和体重以及用作渗透 研究的体表部位等相关资料十分重要。 一、透皮试验研究动物的选择 阅读国内体外透皮研究相关文献, 发现在实验动物的选择、 离体皮肤的制备、 皮肤的储存方法等方面不尽相同。 实验动物的选择: 1、种系 包括巴马小香猪、普通仔猪 2、性别 雌雄均有 3、月龄 普通仔猪一般选择10-15日龄或20-30日龄,巴马小香猪一般选择1 月龄或2-3月龄 4、体重 包括8-15kg或35-40kg不等 5、取皮部位 包括背部、腹底部、腹侧部、耳部,常用背部、腹部皮肤,少 用耳部

二、离体皮肤的制备 选取2~3月龄巴马香猪,清洗全身皮肤,用手术刀或电动脱毛器小心剃去背 部和耳部皮肤的被毛(不得有划痕),24h后,切断前肢动脉使其缺血致死,剥 离皮肤,把皮肤平铺在干净的玻璃板上,让角质层向下,用小刀片或其它钝器沾 生理盐水剔除皮下脂肪、 组织和毛细血管, 然后用生理盐水反复冲洗干净、 擦干、 用铝箔纸包裹置于保险盒中,-22℃冰箱保存备用(不超过1个月)。实验前隔日 取出融冻(0~5℃),使用前用生理盐水反复淋洗至澄清。 注意:实验前巴马香猪皮肤不得有任何损伤。

附表: 表1 人与3月龄小猪皮肤各结构厚度的比较
皮肤结构(mm) 皮肤 人 小猪 真皮 表皮 基底细胞层 所处的深度 0.07 0.03~0.07 表皮和真皮厚度的比例

2.00(0.50~3.00) 1.30~1.50

0.07~0.17 0.06~0.27

1.70~2.00 0.93~1.70

1:24 1:24

表2 30~35日龄健康仔猪不同部位皮肤厚度比较
部位 腹底部 腹侧部 腰背部 皮肤厚度 (mm) Mean±SD, N=6 0.42±0.08 0.75±0.05 0.92±0.07


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