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紫茎泽兰杀螨活性物质的研究


四川大学硕 卜 学位论文

紫茎泽兰杀蜻活性物质的研究
遗传学专业

现代遗传与生物工程方向

研究生:刘燕萍 指导老师:刘世贵教授

中文摘要

采用玻片浸渍法、浸叶碟法及涂抹法分别测试了紫茎泽兰等几种植物的乙      醇提取物对二斑叶瞒和柑橘全爪蜗的杀蜗活性。经回归

和相关分析,结果发现 处理浓度与作用效果 ( 触杀和拒食) 相关性都达到显著水平。 相同条件下, MT DR 法检验证明,紫茎泽兰提取物对柑橘全爪蜻和二斑叶瞒的触杀效果最好,在稀 释 10 倍后,对柑橘全爪蜗仍有 7.3毒杀效果,对二斑叶蜗也有 2.  00 35% 91 的 7 % 毒杀效果。紫茎泽兰对二斑叶瞒的卵具有较好的触杀作用。说明紫茎泽兰有杀 瞒效果,具有开发为优良的植物源杀瞒剂的潜力。
采用索氏提取法对紫茎泽兰杀瞒活性物质进行了提取、显色鉴定,用紫外      分光光度计进行了测定。结果显示,紫茎泽兰的乙醇提取物的氯仿萃取物得率 最高,为 3.% 87,是石油醚的将近 2 倍,乙醇的 15 . 倍。比较三种萃取物的杀 蜗校正死亡率, 我们发现氯仿萃取物的杀蜗活性最高, 在稀释 30倍时仍然有 0 9.% 51的校正死亡率。 表明, 紫茎泽兰的杀蜻活性物质多为一些低极性, 亲脂性 物质,大多存在于氯仿萃取物中。显色反应表明其具有杀蜗活性的氯仿萃取物
中含有生物碱。并证明紫茎泽兰的杀蜗效果随着生物碱含量的提高而提高。按

照总生物碱测定方法,测定吸光度,计算出紫茎泽兰提取物总生物碱含量为
96 . ,%

田间实验结果显示,紫茎泽兰总生物碱 20 倍与紫茎泽兰总生物碱 50      50 00 倍对柑橘全爪蜗均具有较好的防治效果, 以紫茎泽兰总生物碱 20 倍的防治效 50

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果最好。在相同条件下紫茎泽兰总生物碱 20 倍与 4% 50 0乐果乳油 10 倍的防 00 治效果存在显著差异。说明紫茎泽兰具备开发为农药的条件。 采用小鼠急性经 口毒性实验、大白兔急性皮肤和眼刺激实验、小鼠骨髓嗜      多染红细胞微核计数及小鼠精子畸形实验等方法,对紫茎泽兰杀蜗活性物质进 行了急性毒性和遗传毒性实验。 结果表明, 受试物对两种性别的小鼠急性经口毒

性实验, D>00gk, LM50m/g 属微毒级: , 对皮肤无刺激性; 骨髓嗜多染红细胞 小鼠
微核实验及小鼠精子畸形实验结果均为阴性。表明在本实验条件下,紫茎泽兰 杀蜻活性物质微毒,未见遗传毒性。本项研究,提供了利用紫茎泽兰开发为植

物源农药的生物安全性的实验依据。
关键词:紫茎泽兰;提取物;杀瞒活性;触杀作用;拒食作用;生物碱;      测定:紫外分光光度法:田间实验:安全性:急性毒性:遗传毒性

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T e  u y  A a i ie  t v t o h S d o c r c d A ia in t n  c O Ep t r u a e o h rm f  a o im  n p o u u d
A SR C B TA T

M j r e e is a o :G n t c
G auts dn L u  n ig  T tr  fso L u  iu rd a t et  Y p n   uo Poesr  S g i e  u i a r i h

I ore e m n n  ot t  cy  atf at vy  e r     pr eto t cn ct itad iedn ati o s e l n os  i s  h d x e  a o i n n-e x c t f  a i v c d etc f m l t  h  Ep t i aeohrm  r g Sp o u r e  r t r p n s a ua r m  np ou S e ,  hr x a s  o a u s  o u d c pn o a 如 v cn At Mea  s dn  b E Zc, rs ii ad ouu e es  . l t e a S .  uc D r e p c n L nrs s i ,  i o n o i t  e e i l ta  e l
htpyl s et Tt nku uta K c ad nyhs r w r m d. e rhl s  e t e ayhs i e  h  P ocu ct, e  e e u w o r cc a n a oi e a R ges n  cr li aa si  l so e t t r w s i icn o er i ad  rao n yi rs t hw d  t e  a n i t  s o n o e t n  l s eu s  h h a e a s fa r g etm s n i n cr li bten a et  cn aos  t cn c xe e  ic t rao e e t t n cnett n ad  ot t r i fa o e t n  w g r m e o ri n h e  a

t it ad iedn ati aa st to e. h s e et c d o cy  atf at vy  i t  w mt A t a t ,  r e c i n n-e c t gn h i e  is t  m i h u e  m e  etc f m  p t i aeohrm  r g  s s t m s sog  t t xat  E a r m  np ou S e ps s d  ot  n cn c r r o u ou d p n o ee h e  t r oa t it ad iednati t Tt nku uta K c ad nyhs r o cy  atf at vy  eayhs i e  h  P ocu ct x i n n- e c t o r i cc a n a oi b D T w e du d  0 t e  cn c t it r ce 7. %  y  MR ,  n le 1 0  t ot t  cy ahd  5 t h it 0 i h m e  a o i e x 33 o
Tt nku uta K c, 1%  P nyhs r 2 hus  r  t et n e ayhs i e  h 2 . t aocu ct,  ora e t a n.  r cc a 9 7 o  o i 4  t e f r m Ad

t c d etc f m ua r m  eohr Sr g s sog n c h r e  r t  Ep t i a np ou pe p e t n c t t e  u xa r o ou d m  n o d  r oa t it  Tt nku eg T e tco ad  a tn  a a i f m o c t e ayhs  .  e r tn  s ri o l ld r x i o  r y g h x a i n e ao f  o s  p k o Ep t i aeohr b cnnos r tn  ds i d Te qat ua u m  np ou y  tuu etco a e r e. n  nt ou d m  o i xa i r cb e  h u i y aa s icre b U m t d F l epr etso e t t  etc f m nl i s rd  V  h . d  em n hw d  t xat r y s a i y  e o i x i s  e h h r s  a e  o Ep t i aeohrm p n w r h h eet fr  cn o o ua r m dnp ou Sr g e i l fcy  t ot l  ou e e g y  l o h e  r f P nncu cr I ts  e t s e o a ooc tc o Ep t i aoyhs  i n  ppr h a t f  hl E r t f  a r m i .  h a ,  fy  l i x a s  u o u t i e  c aeohrm  r g  s  l t .  au o l it t au ee  dnp ou Se w ea a d T e  t r t cy h ct y ad p n a v u e h c e  o i,  a x e  e  n dr aiitn oitw rt t .  r u so e t t L S 50m t e l ao o t c   e e T e  l hw d  t DO 00 g g m rti f  i e e d h e t  r x y s s h h a e  > k

o Etc o Ep t i ae pou Sr g  m ue o l  isao. f r t f  a r m  n hrm  e f os b r amn ttn xa s  u o u d o pn o r  y  d iri a T e ti o ee ad  m l  e  av.  t r w s  s n i n h iitn  ys  dr a w r ngte A d  e  nt  ic t r ao n  n e r e e i n h e a o i fa g
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d e ne w e t epr et g us  t cnog u imc nc u i r c bte h xem n l  p ad  otl  p  ioul s f e e n  e  i a r o n h e  r r n  r e o
a a ad  r sae  o l . s y  se hp anr i s n p m  b mat y
K y rs E p t i a eohrm  r g extac e w d :  ao u dnp ou S e ; r t o u r m  pn
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cn c t it;  tf dn ati; kld;  tmntn V  fl ot t  cy n- eat it  a a i   d e i i ;  ; e a o i  a ie x cvy l o s e r ao  U id
epr n;  fy ctt it;  r ir x i xei t s e ; u o cy e d a t it me   a t a e  i  h e t o cy x y

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月 i



在 2 世纪 0      6 年代发现 DT 0 D、六六六等一些有机氯农药在环境中 和生物链 中的残留积累,以及若干有机磷农药高毒和三致( 致癌、致畸、致突变) 作用, 引起害虫、 害蜻产生抗药性, 杀伤天敌, 环境污染等一系列原因, 自 导致 然界原有 的生态系统平衡遭到破坏, 使不少原属次要的害虫、 害蜗上升为主要害虫、 害瞒,
危害严重。

农业害瞒(      主要是叶蜗) 具有形体小、 繁殖率高、 发育历期短、 行动范围小、 适应性强、突变率高及易产生抗药性等特点,是公认的最难防治的有害生物群

落〔 我国危害严重的瞒类约4 余种, u 。 0 主要种类为叶蜻、 瘦蜗类, 危害最严重
的作物是柑橘,其次是苹果和棉花。但在 目前,瞒类危害几乎遍于所有作物及

地区的说法也并不过份w 据 1 9年统计,国内对杀蜗剂的需求量每年达 9 9
50t 以含 10 00 ( 0 %有效成分计) ,而国内每年生产的杀蜗剂仅约 12t 25 ,而且 多 .

为化学合成制剂,这些化学农药制剂虽然对害蜗的控制和生产的发展起到了重 要作用,但同时也导致了诸如害瞒的抗药性、环境污染、危害人类健康问题的 产生〔 1 ) ,这些问 题已 经引起了 人们的普遍关注。现在世界上许多国家和地区的 研究人员都在积极探索新的杀蜗途径和研制高效低毒的杀蜗剂。目 前中国农药
市场上最缺就是杀蜗剂,开发研制高效、长效、广谱、对坏境污染少、对天敌 伤害小、对害靖的各个生活阶段皆有效且不易产生抗性的安全新型杀蜗剂,乃
当务之急。

正是传统农药的抗性和毒性问题以及社会和公众对高选择性和高效农药的      呼声,促使人们在农药研究中不得不经常寻找新的作用靶标和新的杀虫、杀瞒
化合物。根据 己知的化学、生物学、植物学、毒理学知识指导新化合物的合成、
筛选 ,是创制新型杀虫、杀蜗剂的主要途径之一。其中,从天然资源宝库中寻

找杀虫、杀蜗活性物质,一般具有高效、低毒、无公害、低残留害虫、害蜗不

易产生抗性,资源丰富、 成本低等特点, 特别适合在果树、 蔬菜、 烟草、 茶叶和
中草药上使用, 在害虫、 害蜗综合治理和农业环境保护工作中有着广阔的应用前

景【 幻 ,正在成为新型灭蜗剂创制的重要途径和研究热点。
在这项研究中,以植物杀虫、杀瞒剂的研究和开发最为引人注 目和最有成     

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效,氨基甲酸醋类杀虫剂和拟除虫菊A类杀虫A,就足山人然产物模型到高效 l l J

合成药剂的光辉范例。 植物杀虫、 杀M刘这些年来无沦&  i 1 研究( 姗l 包括化学结 构、 毒理机制和仿生合i等) r 还是在f  k } 1 业化应) 方Ip取得了i大的成就。 [ f N  l l S j q物 杀虫、杀瞒剂的研究给研制开发安个、高效的杀虫、杀蜗剂提供了思路,研究
植物杀虫、杀瞒剂有助于我们发现具新型作1靶标的杀虫、杀蜗先导化合物, 1 1

为进一步开发创制此类农药新品种奠 t 定儿础,对我I加入 W  l l T 后农药 l O 业山仿
制到创制的转变和发展独立知识产权的新型农药,促进我因生物农药、生态农 业和绿色食品的发展有着重大的现实意义『 们 。
世界上已知植物2万余种,实际 I       5 .  s能达5万种。植物t- 长期进化过程 i r 0 Ft i

中,为了生存的需要,通过 自 身的各种代谢途径,产’了许多对昆虫、蜗类和 I : .

其 它植食性生物有害的 化合物( 次生代谢 产物、蛋自 酶抑制剂、 糖类衍生物等)
来对昆虫、蜗类实施化学防御,这是我们利用tl来研制杀虫、杀蜗活性物质 t勿 l  的基础【 引 。在这些化合物中,以植物次生性物质所起作川最大。人类已对已知
种1% 0 的植物研究了其化学成分,己知其产’的次生代谢产物超过4万种。言 I 0 ‘们

的化学结构多种多样,非常复杂,有了物碱、/氰成、井子 ! I 油俄、i类、酚类 Q ; 物质等。 rne he( 8) Gag和Amd1 8报道约有20种植物!仃 9 40 l 抑制f . l 害生物的活性。 仅以 小菜蛾( uel xl tl L) 例, P tl yo el .为 人类从20不的植物中己筛选出 l a  s a  00 中
9种以上的植物,它们的提取物表现有拒食、驱避、[碍生长发育、忌避产卵、 7 I ' l l

不育以及触杀、胃毒作用。更重要的是这些提取物既能有效抑制有害生物,又
对高等动物安全, 对益虫、益瞒和天敌昆虫无害,对环境无污染( 在环境中易分

解并且分解产物对环境亦无影响) ,符合人类发展现代农药所追求的「标。 I 我国的植物资源极1'+,为我们研制开发植物源杀虫、杀蜗r提供了 I      t= - 1 A - 分有利的条件。 在我国近s 备 万种.等植物,, i r I 约f近 种植物含有杀虫、 41 T 杀01 4 4 性物质。例如除虫菊花中含的是除虫菊醋.烟e中含了 l l , - 1 烟碱,夹钓桃含 一 有火竹 桃营,蓖麻叶含有蓖麻毒素和生物碱。这此杀虫、杀瞒活性物质对害虫、害蜗 有胃毒、触杀、熏蒸、寸 食或杀卵作川。另外,从弃树t提取得4树碱是 , 巨 } I 7 } . 种

有效的不育剂, 侧柏中 从大 提取的 粉ROU是一 种新7的i避忌。 20 } i 9 k . 还有 0多种
植物含有昆虫激素,这都是我们研制植物洲杀虫、,瞒齐的亚要原+ l  」 : ' l

我国      利用植物防治害虫、 害蜗有着悠久的历史 ’八 叼 付 公儿前1 6 。, 胡 期( ’ 0 6

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一前71 ,我国劳动人民已开始用植物杀灭害虫、害蜗。在2世纪3年代化 7年) 0 0
学合成农药问世之前,一些从植物( 如除虫菊) 中提取出来的杀虫、杀蜗活性成

分己 经作为杀虫、杀瞒剂应用。15年我国出版的 《 99 中国土农药志》一书,收

集 可 来 作 药 植 4 种 它 能 效 杀 1余 害 、 蜻 对 了 用 制 农 的 物 0 , 们 有 地 死8 种 虫 害 , 3 0
防治1余种病害有效。近年来,我国对植物源杀瞒剂的研制工作又有了新的进 0
展.山东章丘市合作生物技术研究所的刁久新等人研制的农药全能增效剂属纯

植物源产品, 含有杀蜗天然混合型活性物质, 与化学杀蜗剂混用有协同、 互补、

促进的作用,防治效果好[ [ H l 。中国农业科学院柑橘研究所的张权炳等研制的果 圣水是一种环保、 广谱、 植 高效 物源杀虫、 杀蜗剂( 重 7 庆市茶叶 所的 1 。 研究 彭
萍等应用植物源农药0 5果圣水剂防治茶小绿叶蝉、 甲% 附线蜻田间实验, 结果表

明用0 5果圣20 .  % 5倍液防治茶小绿叶蝉和跄线蜗, 药后7防效分别达到9.3, d 46% 9.5, 19% 接近对照药剂1 毗虫琳20倍液( .7) 0赛丹10倍液( .6) 0 % 00 9 2%和3% 7 00 9 2% 3 的防治效果,是当前供茶园选择的一种较理想的替代化学农药防治茶小绿叶蝉 和P线瞒的药【 这些植物源杀蜻剂具有高效的 f K 1 。 特点,并且由于它们能被自 然 分解,因此还具有低毒、能与环境相容的特点,表现出了明显的生态效益和社 会效益,因而具有十分广阔的应用前景。
紫茎泽兰俗名破坏草、解放草、野靛草、臭草、腺泽兰等;其学名为      Ep tr u aeohrm rn (. lsim  ,英文名为Cotn e uaoim  np ou S eg  cee tu L) d p E o rfo w d e

或Pmkn,菊科泽兰属多年生杂草,原产美洲的墨西哥至哥斯达黎加一带, aaat 后作为观赏植物被引种到欧洲叫 后再引到澳洲和亚洲〔。现已 , u . 1 广泛分布在世 界热带、亚热带地区3多个国家和地区,除中美洲原产地外,其中还包括美国 0 .1 u2 ,、澳大利亚〔1 1 [a :1 %  、新西兰[、 ] 南非〔i 幻 is 9 、西班牙〔、印 K]菲律宾、马 .] ,  1 度UI 7 1 ,  s

来西亚、新加坡、印度尼西亚、巴 布亚新几内 亚、泰国[、 ' 缅甸、 m l 越南[r x  I ,  P 中国 尼泊尔〔、巴 、 明 基斯坦以 太平洋群岛〔2 及 L1 I , 2
中国原无紫茎泽兰,大约2世纪于4年代由中缅边境传入我国云南省。经      0 0 过约半个世纪的传播扩散,现已在我国西南地区的云南、贵州、四川、广西、

西藏等3 区广泛分布和危害[+ 省2 r1 - ,并仍在以 每年大约6k的速度、 0m 随西南风 向 和向 扩散。 东 北 从世界范围 来看, 紫茎泽兰 最北分布区 在北纬3一 西 7 班牙〔, 的 , 门 南至南纬3- 5的南非和澳大利亚[xh i+l e.,因此,紫茎泽兰可能在这一范围的 ,Z 广大

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适宜地区发生和分布。 我国长江流域以 南地区都处这一纬度范围内, 而且,其 它气候因素适宜。故据此推测再经半个世纪,紫茎泽兰可能入侵整个长江以 南 各省区( z s l 紫茎泽兰作为世界性的恶性杂草,它的危害性特别是潜在的危害性,一直      受到全世界的关注。 紫茎泽兰可入侵农田、草地、 草原、经济林地和森 2 林( s ) 在其发生区总是以漫山 遍野密集成片的单一优势植物群落出现,大肆排挤本土 植物、侵占森林荒山,并很快形成优势种群,影响林木生长和更新;并侵入经 济林地,影响栽培植物生长; 堵塞水渠,阻碍交通。紫茎泽兰入侵农田、果园, 经济林带等经济作物生长地20 0天后, 土壤中的速效氮、 钾严重下降, 磷、 导致 土壤肥力下降,土地退化,庄稼,经济作物等生长缓慢,产量大幅度下降。紫 茎泽兰也导致更新林、幼林衰弱,甚至死亡:严重抑制了天然林的更新和植被 的恢复。单一紫茎泽兰的群落严重破坏生态系统,致使生态系统多样性严重丧 失。目 前,它们已 经严重危及我国 生物多样性关键地区之— 西双版纳自 然 保护区内 许多物种的生存和发展圈。另外, 紫茎泽兰还严重危害当地畜牧业的 发展。据资料显示:天然草场被紫茎泽兰入侵三年后覆盖程度可达9%以 0 上, 牧草几乎消失;紫茎泽兰带冠毛的种子和花粉能引起马属动物哮喘病,尤其是 种子上带钩的纤毛被牲畜吸入后直接往气管和肺部钻,引起牲畜组织坏死和死 亡;用紫茎泽兰的茎叶垫圈或下田 作沤肥,可引起牲畜蹄子腐烂、人的手脚皮 肤发炎i。因 紫茎泽兰对农业、 n 此, ] 畜牧业、 林业等都有着极大的潜在危害,
紫茎泽兰是一种急需防除的有毒植物。

目      前,人们通常采用人工和机械防除、化学防治、生物防治等方法防治紫 茎泽兰。此外,人们还力图将防除与利用相结合, 利用废物,变废为宝。朱正 方困等人通过柱层析分离技术和活 性跟踪方法从紫茎泽兰石油醚提取 得到 物中 三个对植物生长具有调节作用的倍半菇,即紫茎泽兰素甲、紫茎泽兰索乙、乙 酞紫茎泽兰素乙.丁靖凯等人〔对紫茎泽兰精油进行了 w 7 化学成分分析、 气质 香
量评定及应用实验, 定性、 定量地鉴定了 4 个化和物, 5 其主要成分为聚伞花素、 乙酸龙肠醋等, 紫茎泽兰的香气由 辛舌虫香、 药草香、 花香、 甜香及菇气组成,

初步表明紫茎泽兰是一种极有利用价值的香原料。另外,考虑到其植物纤维含 量高,可加工成纸板、 压模板, 刨花板, 脱毒后可作饲料叫,制沼 气等。由昆

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明人造板机械厂研制开发的紫茎泽兰刨花板技术,以紫茎泽兰为原料年产

MO O N 的刨花生产线, 于20 年 1 在云南华坪验收 己 02 月 合格I。 前的研究还 n 目 ] 发现, 紫茎泽兰可作为一种植物农药,它对一些农业害蜗如柑橘全爪靖、茶叶 绿叶蜗有杀灭作用。 李小平等人[ n 7 用紫茎泽兰提取物进行了杀灭柑橘全爪蜻的 田间药效实验,发现紫茎泽兰提取物的杀卵效果好,且持效期长。 李蓉涛等人 [ 7 4 l 在进行植物农药的筛 选过程中发现, 紫茎泽兰对茶叶小绿叶蝉有一定的杀灭
活性。四川大学草原鼠虫病害生物防治工程国家专业实验室的刘世贵等人从紫 茎泽兰中提取出有毒活性物质,以蚜虫为试虫进行了毒力测定,发现其对蚜虫 具有较强的杀灭作用.并采用分级萃取、薄层层析( C,  S等技术对灭 T ) G-M L C

蚜活性物质进行了分离纯化, 得到了一个高活性灭蚜活性物质— 紫茎泽兰素 A 其 L5 99m/, , C 为5.7gL 在稀释50 0 0 倍的条件下, 灭蚜校正死亡率达9.%e 61 通过对其毒理学研究发现,紫茎泽兰素 A 是一种神经毒剂,它对蚜虫的乙 酞胆 碱醋酶有明显的抑制作用,而且这种抑制作用随紫茎泽兰素 A 浓度的增加和作 用时间的延长而增强。该项研究的发现,对将紫茎泽兰开发成生物农药具有重 要意义【 , 介 。
我们拟进一步开展对紫茎泽兰的利用研究,充分发掘其在开发生物杀蜻剂      中的可能价值,不仅从中寻找到高效低毒杀蜻活性物质,而且为田间推广使用

提供可行性依据, 为我国农业生产的发展和环境保护事业做出贡献。 具体来说, 本项研究主要解决以下四个问题: 一、检测紫茎泽兰的杀蜻活性物质     
二、对紫茎泽兰杀蜻活性物质的含量进行测定      三、检测紫茎泽兰杀蜻活性物质的田间实验效果      四、检测紫茎泽兰杀蜻活性物质对人畜的安全性       

这些问题的解决对于深入了解紫茎泽兰杀靖活性物质的特性,以      及将紫茎
泽兰作为杀靖剂推广应用于生产实践均有十分重要的意义.

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本文是在我的导师刘世贵教授悉心指导下完成的,从论文选题到最后完成      的每一环节无不渗透着恩师的心血。三年多来,先生渊博的学识和精辟敏锐的 科学思维、诲人不倦的待人作风、 严谨求是的治学态度使我受益匪浅,终身难 忘,对于我以后从事科研和教学工作将有深远的影响。我深信从先生那里学到

的专业知识、科研方法以 及人生观、价值观,将是我终生的精神财富。在此,
学生谨向刘先生表示最诚挚的感谢。

在我攻读硕士学位的三年中,高平副教授也付出了巨大心血与关怀,在科     
研设计、实验设施和论文写作过程中,都给了我指导与帮助,在此表示深深的 谢意.

四川大学生命科学学院的龙章富副教授、葛绍荣副教授、王燕秋老师、      刘
良老师、 颜老师、贾老师、柏老师等在我攻读硕士学位期间给了我热情的指导 和帮助, 在此表示诚挚的谢意。 同时, 也谨向遗传学专业硕士指导委员会的各位 老师表示诚挚的谢意。 衷心感谢殷中琼博士、谢晶博士、李惠博士、李尚伟博士、陶勇博士、陶      科博士以及潘为高、江德洪、 殷雪、冉红艳、甘明哲、秦晓娜、付若彬、罗彭
等同学的帮助。

在此,我也特别感谢四川大学华西医学院的吕晓华博士,在做安全性实验     

中给了我许多指导。 感谢我的父母、弟弟及我所有的朋友,是他们的鼓励和支持使我顺完成学     
业。

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第一章 紫茎泽兰提取物对农业害蜗的毒力研究
摘要:采用玻片浸渍法、浸叶碟法及涂抹法分别测试了紫茎泽兰等几种植     
物的乙醇提取物对二斑叶蜗和柑橘全爪蜻的杀瞒活性。经回归和相关分析,结

果发现处理浓度与作用效果 ( 触杀和拒食)相关性都达到显著水平。相同条件 下,DR 法检验证明,紫茎泽兰提取物对柑橘全爪蜗和二斑叶瞒的触杀效果最 MT

好, 在稀释 10 倍后,对柑橘全爪蜻仍有 7.3毒杀效果, 00 35% 对二斑叶瞒也有 2.  91 的毒杀效果。紫茎泽兰对二斑叶蜗的卵具有较好的触杀作用。 7 %
关键词:紫茎泽兰;提取物;杀瞒活性;触杀作用;拒食作用     

1引言
农业害瞒(      主要是叶蜗) 具有形体小、 繁殖率高、 发育历期短、 行动范围小、

适应性强、突变率高及危害猖撅等的特点‘ , 〕 。用一般的化学农药防治,易 产生
耐药性,不但其防治很难奏效,而且会在农副产品中形成残留,也会对环境造 成严重污染。植物源杀虫剂具有低毒、低残留、在环境中易降解,害虫不易产 生抗性,资源丰富、成本低等特点。它的开发应用有利于保护生态环境,生产

绿色食品,符合当前农药的发展趋势r。 e t 紫茎泽兰( pti ae po ] ( a rm  n h m E ou d o r u
Sr g又名破坏草, p n) e 是一种外来入侵的菊科泽兰属多年生有毒杂草, 在我国云 南、四川凉山 州等地危害严重[。李小平等人[用紫茎泽兰提取物进行了杀灭 1 0 ] : 1 : l ]
柑桔全爪瞒的田间药效实验, 发现紫茎泽兰提取物的杀卵效果好, 且持效期长。 李蓉涛等人[在进行植物农药的筛选过程中发现,紫茎泽兰对茶叶小绿叶蝉有 N N ]
一定的杀灭活性。刘世贵等人的研究证明紫茎泽兰提取物对蚜虫具有很好的毒

二斑叶蜗 Tr yh u c  Kc 和柑橘全爪瞒[ nn hs i     (ea k s ie o ) tn u c a t h P oc c a yu i t r (c r o 〕 M Ge r 是近年来严重危害我国 及果园的两种害m, g) 农田 都有适应性强, 繁
殖率高,危害猖撅的特点。其中柑橘全爪靖主要危害柑橘,而二斑叶蜗寄主广 泛,主要有苹果、梨、桃、杏、葡萄、草毒以及棉花、豆类、花卉等多种植物

杀 用,] 作 ,. i : 1 N

[4 <2 i] .,本人的实地观察也发现二斑叶蜗比 柑橘全爪瞒耐药性更强。为开发以 紫
茎泽兰为主的植物源杀虫、 杀蜗剂提供充分依据。 在此本实验室选用紫茎泽兰、

四川大学硕士学位论 文

苦参、川糠、鱼藤、百部及益母草的乙醇提取物对柑橘全爪蜗和二斑叶蜗两种

害蜗同时进行了室内触杀与拒食活性研究。结果表明,紫茎泽兰提取物对柑橘 全爪蜗和二斑叶蜗具有很高的触杀作用和一定的拒食作用,并对二斑叶蜗的卵
具有较好的触杀作用 。现将结果报告如下。

2材料与方法
21 . 供试材料 211 .. 实验材料及来源 紫茎泽兰由四川省草原工作总站提供,采自四川省凉山州,材料采集后洗     
去泥土晾干备用。苦参、川株、鱼藤、益母草及百部均购买于成都市五块石中 草药市场。

212 .. 供试害瞒
柑橘全爪蜗、二斑叶蜗分别采 自本实验室川大校园实验地柑橘树上和四季     
豆苗上 。

22 . 仪器与试剂 ZQ8A      FQ5 旋转蒸发仪: 上海医械专机厂 B20      D1 型电热鼓风恒温干燥箱: 成都电烘箱厂

JS1      H- 电子恒速搅拌机: 杭州仪表电 机厂
分析天平:      湘仪厂 4%      0乐果乳油:重庆民丰农化股份有限公司 ( 原重庆农药厂) 生物解剖镜      :湖南长沙创高科技有限公司
其他常规试剂均为国产分析纯。     

23 . 实验方法 23 1 ..  实验流程

受 植  ̄干9}}擎提 液 试 物 燥%Z 5"} 取 减压浓缩 浓缩膏 ̄ `  ]
23 2 .. 活性物质的提取及检测

毒力测定

四川大学硕士学位论文

2 32 1 . .  .  杀蜗活性的提取,按照经典的渗辘法提取方法如下:
受试植物干燥 粉碎

加适量的 9%乙醇拌至湿润 5 在密闭容器内放置05 .  h
放入渗流柱内

随即用木褪压平, 上 加圆形滤纸
加入十倍量的 9% 5 乙醇

溶剂液高于材料表面   
室温    下放置 、日 卜 收集提取液

流速:每分钟 5150 材料 m/0g

减压浓缩提取液

2322 ... 触杀毒力测定

(雌      测 参 A 1 0 荐的 片 法(le  eo)  1 成蜗的 定 照F 9 推 玻 浸渍 Sdd mtdE  ) O  8 i i h " p  ]  .
并加以改进。 将双面胶带剪成 2 c 长, -3m 贴在显微镜载玻片的一端, 用镊子揭 去粘胶上的纸片,用零号毛笔挑取大小一致、个体鲜艳、行动活泼的雌成瞒, 将其背部粘在双面胶带上( 注意:不要粘住靖足、蜗须和口器) .每块载片粘 2 5

头,每个浓度处理粘 4 共计 1 头蜗。将粘有雌成瞒的玻片放在干净的大 片, 0 0 培养皿内,皿中铺一层湿滤纸并放一湿棉球,加盖玻璃板,置于 2℃下经 2 5 h 后镜检,如有死亡个体则补粘活成蜻后再进行测定。在预试的基础上将药剂用 去离子水、 丙酮(02vv 溶液[稀释4 8+0/) . , A ] 个浓度, 把带蜗玻片一端浸入药液中.
轻轻摇动,5秒后取出,然后用小块滤纸吸干附在蜗体周围和胶带上的多余药

液, 对照组浸清水。 处理后的玻片分别放在上述的大养虫皿中, 5 下经 1h 在2℃ 2,
2h后,利用双目解剖镜检查结果,检查时,用小毛笔尖轻轻触及蜗体,无反 4 应者记为死亡个体。

四川大学硕 t 了 学位论文

()卵的A定     l 参考M l y  1的浸叶碟法(e dk m t d", 2 i e d( 9) o 1 9 La i d e o)  f  i h ' s p  并加以改进。 采集平整的四季豆苗叶片, 净化后剪成 2 2m X c 小方块, 叶面朝下

贴 在水隔离饲养台上f, + 每块叶片 ) 挑接二 斑叶瞒 雌成蜗2 。 置于20 0 头, -3 5 C
下产卵 1h 2,然后去掉雌成蜗,检查记录卵数,每一浓度处理 4块叶片,共计

卵数在 10 0 粒以上,当卵龄在 3-4h 6 8 进行测定 ( 卵龄不同, 对药剂的敏感程 度有差异) 。将带卵的叶片分别浸入各处理的药液中,轻轻摇动,5 秒钟取出, 然后放在吸水纸上晾干,再放回水隔离饲养台上,待对照组卵孵化并发育至若 瞒阶段,统计各处理死亡率,再用 A bt公式求得校正死亡率。 bo t 2323 ... 拒食活性测定

参照张钟宁等(93"的方法,      1 )  9 ' , 并略加改动。 用去离子水+ 丙酮(02v 8+0八)
溶液分别对原药稀释 4 个浓度。将供试样品做为处理液,涂在洗净吸干水分后 的叶片正反面沿叶中脉的一侧,另一侧溶剂做对照。待药液干后接种瞒虫 2 0

头,分别于 1,  检查叶中脉两侧蜗虫栖息数目,栖于叶中脉的瞒虫不计算 2 2h 4
在内。共设 3 次重复。

3实验结果
31 . 触杀毒力测定结果

311 .. 雌成蜗的测定结果见表 1和表 2  S 统计软件分析,回归与相关结果 SS P 表明,处理浓度与处理效果具有非常显著的相关性,对柑橘全爪蜗其相关系数 在 095099 .4-.9 之间,对二斑叶蜗其相关系数在 098098 .5-.7 之间。从表 1 和 表 2可看出,紫茎泽兰、苦参、川株、鱼藤及益母草的乙醇提取物均对柑橘全 爪瞒和二斑叶瞒有较强的毒杀效果, 并随着处理浓度的提高和处理时间的延长,
其效果也随之增强。其中,紫茎泽兰的乙醇提取物对柑橘全爪蜗和二斑叶瞒的 触杀效果最好,在稀释 10 00倍后,对柑橘全爪蜻仍然有 7.3触杀效果,对 35% 二斑叶靖也有2.7的触杀效果。结果还表明, 91% 鱼藤提取物、 苦参提取物对两 种害蜗触杀作用较小 ( 1 2a 表 ,表 )

四川大学硕 卜 学位论文

表 1 提取液不同浓度对柑橘全爪蜻的校正致死率
植物 紫茎泽兰 苦 参   
川 辣    鱼 藤    益母草

15 2 倍稀释液
1 h  2        2h 4
1 0. 0 0 0 89 4 .7

20 5 倍稀释液
1h 2
8 . 7 8 8

50 0 倍稀释液
1 h  2      4 2h
7 .0 90
4 .  7 3 7 4 . 2 9 4 2 .  8 4 3

10 倍稀释液 00
1 h  2      4 2h

2h 4 10 0 A 0.0 6 5 D 2. 0 
7 5 R 9 2

10OA 0 .  O

8 . A 33 3 5 . C 0O O

10 OA 0 .  O
8 .  B 94 7 

6.6 31
6 . 4 4 2

: 一 } :
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门了

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刊 24

5 8  4 . 7 6    4 4 7 D  1 . 7    9 61





卜日



9 .1 C  31 2 4 2    .5

6. 4 71  C 5_:F 日 3弓

9 91 E

1 0 0    1 0. 0    6 .1 0 . 0  0 0 A  9 4

1 . 5  0 0 0  9 8 9 7   5 . 0    . 8

2 .1 D 9 7

注:施药后 2h 4 ,防效栏内标有相同字母者表示经 。盯 法检验在 5水平 卜 M % 差异小破 著。下同。

表 2 不同浓度提取液对二斑叶蜻的校正致死率
植物

15 2 倍稀释液
1 h  2       h 2 4

20 5 倍稀释液
1 h  2       2h 4

50 0 倍稀释液
1 h  2      h 2 4
八 口 6
 .          

10 倍稀释液 00
1 h     2      h 2 4


紫茎泽兰 苦 参   
力    I辣

100 0.0 7.0 50

10 0 A 0 .0 7 .  E 8 9 5 

: : . : :

7 . 8   2 . 9 7 7 A  8 8
21 0 E  1 . 0 . 5    0 0
1 1 1


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9 6    2 . . . 3  9 1 A 7
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9 . 9  9 . 8  2 8    0 6 D  4 4   2 . 4   9 7   2 . 5  8 6 D  . 8
8 . 3  9 . 2    5 . 9  2 7 C  5 4 6 8    2 6 C  7 8   6 . 1  1 . 4
』 ,

q 户 R


q 〕

0 0    9 5 B . 0  .  5 


鱼 藤   
益母草   




0. 0  9. 5  0    6 B

9 . 7  9 . 7  4 3    4 3 B  7 4   7 . 2    4 0    4 3 C  0 0    9 7 B   6 . 1  2 9 B  2 . 7  2 . 1         . 2  . 0 

312卵的测定结果见表 3 SS 统计软件分析,回归与相关结果表明,处理 ..   PS

浓度与处理效果具有非常显著的相关性,其相关系数在 099088之间。从 .9-.8 表3 可看出紫茎泽兰、苦参及益母草的乙醇提取物对二斑叶蜗的卵具有较好的
触杀作用。

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表 3 不同浓度提取液对二斑叶蜻的校正杀卵率
植物

15 2 倍稀释液
81 3 B .  6
口 Q 八


20 5 倍稀释液
4 乙

 .          

50 0 倍稀释液
q 乙

10 倍稀释液 00
1 . B 48 9

紫茎泽兰
苦 参    百部   

卜了 孟 任 n






n 〕 8 4

八 曰 C


 .          

叶 左 n 通
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八 J

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B 乙 盯 1




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曰 八 J

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07E 0F 3:D 81A

川 辣    鱼 藤   
益母    草

6 n 乙 ,
n C

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通 l 生 l nJ n


Q ‘. 口 1 6 1了 D


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6 n

山es


行卜

卜‘ 卜

7 . C 63 2

6 . A 44 1

3 .  A 89 8

32 . 拒食活性检测
结果见表 与表 5 经 SS 统计软件分析,回归与相关结果表明,处理浓      4 PS

度 与处理 效 果也具有非常显著的相关性 ,对柑橘全 爪瞒其相关 系数在 095096之间,对二斑叶蜗其相关系数在 092099之间。从两表可看 .2-.8 .6-.8 出,紫茎泽兰、苦参、川株及益母草的乙醇提取物对柑橘全爪靖和二斑叶瞒, 都有较好的拒食效果。其中,苦参乙醇提取物对柑橘全爪蜗的拒食效果最好, 川株乙醇提取物对二斑叶蜗拒食效果最好,鱼藤乙醇提取物的对二斑叶蜗的拒
食效果较差 (00 10 倍液的拒食效果小于 5% . 0)
表 4不同浓度提取液对柑橘全爪蜗的拒食作用
植 物

15 2 倍稀释液
1 h  2    2h 4 7 . D 29 7
Q 〕 0 乃

20 5 倍稀释液
1 h  2     4 2h 7.9 12 8 .9 42 5 .7 66 8 .5 05 8.3 29
卜n 八廿


 …        

50 0 倍稀释液
1 h  2     4 2h
户 卜

10 倍稀释液 00
1 h  2     4 2h
尸 卜
C 曰

紫茎泽兰 7.3 35
苦 参   
川 棣   
鱼 藤    益母草   


 



6.7 66
直 凡

『匕 s
 .            



一了

6 .  57 9
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9.5 54
8 .  71 0
8 .4 68 9 .8 68
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7 .6 32

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9 . A 37 5
                       

 

8 . B 7 .  46 2 77 8

7 . B 64 7

一 : . : :

U L

7 . B 18 7

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表 5 不同浓度提取液对二斑叶蜗的拒食作用
植 物

1 倍稀释液 2 5
1 h  2      h 2 4

20 5 倍稀释液
1 h  2     2 h 4

50 0 倍稀释液
1 h  2 h 2      4

10 倍稀释液 00
1 h  2      4 2h

紫茎泽兰 9 .3 8 . 8 7 . 9 48 96 6 67

7 . 7  7 . 6 8 5 8  5 8
8 . 6 8 .8 3 9 A  1 5 8.5 7.0 2 0 A  0 0
5 . 2  5 . 8 8 8 D  7 5

苦 参   

9.3 8 . 8 06 94 7

8 .  6 1 9

川棣   
鱼 藤   
益母草

9.  73 0
8 .3 33

9 .  8 . 3 45A 3 3 9
6 .2 45

8.8 7 .  10 02D 7

一一

8 .  7 . 0 05C 5 0 6

6 . 2  7 . 7 8 4 C  0 2

6 . 9 6 . 6  7 2 C 3 8 D  5 2   5 . 3

4讨论
紫茎泽兰作为一种世界性的恶性有毒植物,一直受到全世界的广泛关注。      多年来科研工作者对其进行了多方面的研究,证明紫茎泽兰不仅是一种有利用

前景的香料,而且还可通过发酵脱毒做饲料、 制造纤维板和沼气【 4 i ]
本实验室致力于开发紫茎泽兰作为植物源农药的研究。本文的研究表明,     

紫茎泽兰乙醉提取物对近年来严重危害农业的两种害蜗 ( 柑橘全爪蜗与二斑叶 蜗) 有很好的触杀活性和一定的拒食活性, 并对二斑叶蜗的卵有较高毒杀作用。 说明紫茎泽兰具有开发为一种新型植物源杀蜻剂的价值。关于紫茎泽兰杀蚜与
杀蜗活性物质是否属于同一类型还有待验证。

本文的研究也表明,自      然界存在许多可开发利用为植物杀蜗剂的资源。苦 参、 川橄、 鱼藤、 百部及益母草都是在害虫防治中得到公认的几种植物, 本实验
室的研究表明, 苦参其次是鱼藤对柑橘全爪蜗与二斑叶靖具有很好的作用效果。 本实验的研究为增大杀蜗植物谱提供了理论依据。

本文实验结果显示,紫茎泽兰对害靖具有较好的杀灭效果,若能加以有效      开发利用,有望研制出以紫茎泽兰有效成分为主的植物源农药,以代替 目前广 泛使用的化学类杀蜻剂,利于保护生态环境,生产绿色食品。

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第二章 紫茎泽兰杀蜗活性物质的分离与检测
摘要:采用索氏提取法对紫茎泽兰杀靖活性物质进行了      提取、 显色鉴定, 用紫外分光光度计进行了测定。结果显示,紫茎泽兰的石油醚、氯仿和乙醇三 种萃取物中氯仿萃取物的杀靖活性最高, 得率最高,占乙 醇总提物的 3.% 87, 表明紫茎泽兰的杀蜻活性物质多为一些低极性,亲脂性物质,大多存在于氯仿 萃取物中。显色反应表明 其具有杀蜗活性的氯仿萃取物中含有生物碱。按照总 生物碱侧定方法, 测定吸光度,计算出 紫茎泽兰提取物总生物碱含量为96. .% 田间实验结果表明,紫茎泽兰总生物碱 20 倍与紫茎泽兰总生物碱 50 倍对 50 00 柑橘全爪瞒均具有较好的防治效果, 以紫茎泽兰总生物碱 20 倍的防治效果最 50 好。 在相同 条件下紫茎泽兰总生物碱 20 倍与 4% 50 0乐果乳油 1 0 0 倍的防治效 0
果存在显著差异. 关键词:紫茎泽兰;杀靖活性物质:生物碱;测定;田间实验     

1 引言
四川大学生物工程研究所刘世贵等人的      研究证明紫茎泽兰提取物对蚜虫具 有很好的毒杀作用, 并首次从紫茎泽兰中分离得到一种灭蚜活性物质一一紫茎 泽兰素 A ,属于一种叫跺类生物碱,其化学名称为 3 , 一 05 一3 经基一雄幽一1 6

一 型 11 b 1 甲 A , 分 式 2 3 O 分 量 738 内 [,- ] ’ 基M 其 子 为CH5 , 子 为3 [3 67 - 一 6N 7.e 6] 
本研究已证明,紫茎泽兰乙醇提取物对柑橘全爪瞒和二斑叶蜗具有很好的触杀

活性与一定的拒食作用。 在此, 我们对紫茎泽兰中的主要杀靖活性物质进行了 提取、分离及含量测定,同时进行了紫茎泽兰杀瞒活性物质的田间实验,结果
如下。

材料和方法
1 实验材料

211 .. 实验材料及来源 紫茎泽兰由四川省草原工作总站提供,采自      四川省凉山州, 材料采集后洗
去泥土晾干备用。

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2 12 . . 供试害瞒

柑橘全爪蜗采 自本实验室川大校园实验地相橘树上。
2 2仪器与试剂 . 

U-2 5 V 6 型紫外分光光度计:日本岛津公司 PS 5 P 计:上海精科 H-2 数 H 咖啡因酵溶液:山西省药品检验所 澳甲酚绿:天津天泰精细化学品有限公司 次硝酸秘:上海绿源精细化工厂一 次硝酸秘 碘化钾:上海光桦科技有限公司 澳 甲酚绿:天津市三强电子科技有限公司 石油醚 、氯仿、冰醋酸等试剂均为国产分析纯。

23 . 试剂配制 231 ..  标准溶液的配制 咖啡因醇溶液,质量浓度为 1Og       .  / m
X1 0

漠甲酚

72 . 缓冲溶液 ,浓度 为   

.  l L O m 4l , H 4 2 精 称 澳 酚 2 g 用浓度为 0 2o / Na H m 几 p= .  密 取 甲 赏1m, o 4 , 5

溶液 1. L 25m 溶解后,加入邻苯二甲酸氢钾 25g加少量蒸馏水溶解后,转移 0 . , 5

至 20L 5m 容量瓶中。 用蒸馏水稀释至刻度, 摇匀, p 计校正, 用 H 使得 p=44. H .  2 232改良的碘化锡钾 (rgnof )试剂的配置 .. daedrf
溶液 1 08g次硝酸秘溶于 lm 冰醋酸及 4m 水中。溶液 1,  碘化      .  ,  5 ol 0l 18 g 钾溶于 2m 水中。取 1 1 等体积混合物 ll 2 l乙酸、lm 水混合即可 01 ,  1 m与 m ol

用显〔 于 色? 书 〕 。

233 甲酚绿指示剂 (.% 的配制 .. 澳 02)

称取 02      嗅甲酚绿,加入 6L .  g m 氢氧化钠溶液及 5L  的乙醇,摇动使其 m 9% 5 完全溶解,用水稀释至 10L 0mo
. 4实验方法
..  41 实验流程

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步骤一:

干燥的紫茎泽兰粉末

提取液

残渣

浓缩液

产臀 浓 ‘


浸膏 一-卜 毒力测定 -.

I 石油醚萃取物

U氛仿萃取物

m 乙醇萃取物一J卜毒力测定

显色反应

步骤二:紫茎泽兰乙醇浓缩裔一制备生物碱 ̄毒力测定一测定生物碱含量      步骤三:紫茎泽兰杀蜻活性物质 ̄田间实验      242 .. 杀蜻活性物质的提取 2421 ... 样品的处理 将紫茎泽兰植株洗净后,于恒温箱内6℃烘干,      0 粉碎, 放于密闭容器中待
用。

2422 ... 杀蜻活性物质的分离
根据经典的系统溶剂法进行分离,流程图如下:     

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浓缩后的乙醇提取物 加 入 等 量 的 硅 m 土搅 拌 均 匀,置通风橱中干燥后粉碎
总提物分散体 倍量 的石油醚,室温 日-- m 液苯取二次, 合并萃取液 ,减压浓缩 ,回收溶剂 ,干燥

石油醚萃取物

残渣 5倍量的氯 方法同上

氯仿萃取物

残渣

乙醇萃取物

残清

243 .. 显色反应

作为标准品,      取一片复方黄连素片在研钵中研碎溶于含 I H I % C 的甲醇溶液

( 1 中 (H 3, 小 3 ) P - ) 即 巢碱3m + m 酸性甲 混匀, 层液为蛋黄 m < 0 g 31 醇, 取上

色 用9 备( 4 1

显色反应的操作,取样品少许滴于下面衬有白色纸张的载玻片上,用玻棒     

滴加 1 滴显色剂,观察所呈现颜色的变化。 一2 244 .. 总生物碱的制备

准确称取紫茎泽兰干粉 5 用渗浓法浸提,      鲍 得到的浸膏倒入 IOm 的烧杯 OOL 中,并用蒸馏水约 40L 0m 稀释,然后用 6o/ H1 m 1L  的溶液调其 P 值为3 , C H -4 搅拌均匀, 抽滤, 再往所得滤液中加入体积分数 16 0的氨水, 9 并调节其 P 为8 H -
9 ,用氯仿萃取二次,每次 5m ,充分振荡,静置分层,合并氯仿萃取液。将 0L

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所得氯仿液蒸馏,回收氯仿,所得的黄色液体即为溶有生物碱的氯仿液。此为    生物碱粗品。   

将生物碱粗制品        溶于40L 0m 水中, ml H1 用6o /  溶液调节其p 值为3 L  C H -    4 然后用乙醚洗涤二次, , 每次 1m,弃去乙醚层,然后在水层中用体积分数 5L 1 的氨水调节 p 值为1 左右。    0 % H 0 再用氯仿萃取二次, 每次2m, 5L 合并氯仿层, 回收氯仿,所得即为生物碱的精制品,将其定容为4L    mo 245    总生物碱的测定方法 ..
用刻度移液管准确移取 00m        . L的生物碱精制品到 1m 8 OL比色管中,再分别

, 加入 1L m 澳甲酚绿缓冲溶液和 2L m 无水乙醇溶液。用蒸馏水稀释至刻度,摇匀 后用 c    lm比色池以试剂空白为参比,于波长 64Om 3.  处测定其吸光度。 n 24   6田间实验 .. 实验于 20 年 月 0日        4 2 在四川省华阳市白沙镇相橘园区进行,实验对象 03 为三年生柑橘。实验共设 4%    0乐果乳油 10 倍液,紫茎泽兰总生物碱 20 00 50倍 液和 00    50 倍液,及清水对照 4 个处理。用背负式喷雾器喷雾。 调查方法:每处理固定 3        株调查树,在每株树冠的东、西、南、北、中五 个方位随机取点,施药前调查统计虫口基数,    施药后第 2 7 ,  ,巧天各调查统计 一次,计算平均校正防治效果,进行差异显著检验〔。    训

3实验结果
31 . 杀蜻活性物质的提取及分离 311 .. 杀蜗活性物质的提取及毒力测定

3111 ... 杀蜻活性物质的提取
表 6 杀蜘活性物质的提取结果
实验次数

平均值
lo g oo

紫茎泽兰粉末
总提物      得率     

28 58
2 .% 58

四川大学硕 { 一 学位论文

得率二                    总提物干重/ 粉末干重X  % 10 0
由表 6      可知,紫茎泽兰乙醉总提物的平均得率为 2.% 58 。
3 1 12 乙醉 总排物 的杀蟒 讯 力沏} ... 分

表 7 乙醉总提物对柑橘全爪蜡毒力测定结果
稀释倍数
反 }式 n d

校d L  几I 夕' : 率
9_ 63
s q


, C L  ( gI m/ )

9 5  7        1 9 8  8_ 56 8、 5

9. 73

0 兀 o

8 .  51
6 9 4

327 7 .  4

H n )( U e 日 叮 径 『 月 竹

曰 门



6 .      . 5 5  6 7 2 3 3  .       .  33

注:表中数据为死亡率

表7      数据显示, 紫茎泽兰乙醉总提物在稀释20 5 倍的条件下杀蛾校正死亡率
达到 9. 在稀释 10 73, % (0倍时,校 I  I率大 J 6% ) I ' = . 死 飞 0 .其毒力回 归方程   

为: 1 .-.3x I. 7.  /,说明 y 0 9008,  为327 gI =9 , C , 4 m 紫苹泽 ` . :  J有很好的杀瞒活性, l
可作为一种生物杀蜗剂开发利用。
3 12杀蜻活性物质的粗分离及i力测定 .. i i .

3121 ... 杀蜗活性物质的¥分离 1 1
乙醇总提物用不同溶剂由低极性到高极性依次萃取,其萃取浓缩汗燥后,      几 称重,计算得率,结果见表 8 a
表8 不同溶剂萃取物的 得率
不油醚 1
2 .% 05

氯仿
3.% 87

乙醇
2.% 64

得率二                    萃取 「 / 谊 乙醉总提物 } 1 9 工X  6 ( 1 0 从表8      中数据u以看出, 丁 氧仿萃取物得率最高,为 ; 了,足f 8% . i 油醚的将近
2 信,乙醇的 15 . 倍。

31 .  .  2 . 不同溶剂萃取物的杀瞒毒力测定 2

四川人学硕 1 学位论文

将干燥后的三种溶剂萃取物做毒力测定,结果见表 9 。
表9 不同溶剂萃取物对柑橘全爪蜗毒力测定结果
样品

稀释倍数
10 5 30 0

1 2. 98 2 .  65 98 . 37 . 9 .  63 8. 65 5. 59 2 .  11 9 5 2 7. 25 5 .  4 1 2. 43 50 .

2 2 .  96 2 7 4 I .  t3 0 9. 了2 91 4 .  5 .  94 1. 81

3 31 5 . 2 ( 」 i 9 I 42 .  9 . 86 91 4 . 5 0 9 1. 08 9〕 1 ( 7. 12 51 8 2. 52 f7 , . 

校正死亡率
:   3 9 . 1
2 .i 6( 1 .  0( i (( )) . 10 0 0. 9 .  5 1

石油醚萃取物
61 ( 0 10 20 10 5 30 0

氯仿苯取物
60 0 10 20 10 5 30 0

6. 15 2 .  13
9 .  74 7. 63 5, 63 2. 74

9. 16
7. 18 5. 25 2 .  68 59 .

乙醇萃取物
60 0 10 20

对照
注 :表 中数据 为死 r 率

比      较表 9中三种萃取物的杀瞒校正死亡 我们发现氯仿萃取物的杀M活 率,

性最高, 各稀释浓度的杀瞒校正死亡率均高于其他两种萃取物, 在稀释 1 倍时, 5 0
达 10, 0%在稀释30 0 倍时仍然有9.  51的校正死亡率。 从表321 % 而且 ..  结果可知,

氯仿萃取物的得率最高,占乙 醇总提物的 3. ,表明紫茎泽兰的杀蜗活性物 87 % 质多为一些低极性,亲脂性物质,大多存在于氯仿萃取物中。这 结果与本实
验室刘世贵等人做的紫茎泽兰灭蚜活性部位 一 致。而 [,刘”贵I  f l . t j : 人的研究己
经证明其有效物质_要为 一 } 1 种/物碱类物质泽 、素 八 据此,我们推测紫从洋 几 ‘ 兰的氯仿萃取物的杀蜗活性物质也,能属 1 ! 1 1 一 . 物碱类。 '
32 . 显色反应

四川大学硕 L 学位论文

复方黄连素片上层液滴加 daedrf      rgnof 生成絮状的橙色沉淀,紫茎泽兰的 氯仿层萃取液滴加 daedrf rgnof 也生成絮状的橙色沉淀。 结果显示, 紫茎泽兰的

氯仿层萃取液与复方黄连素片上层液滴加 daedrf rgnof 反应现象一致,说明紫 茎泽兰的氯仿层萃取液中含有生物碱类, 这种反应现象也符合与改良典化秘钾 反应, 样品呈现橙色即为生物碱圆。 33 .总生物碱的毒力 检测与 含量测定 331 .. 总生物碱的毒力检测 表1      0结果表明紫茎泽兰的总生物碱对柑橘全爪蜻在稀释 10 00倍时仍有
8.% 45的毒杀效果,相同条件下其药效明显好与表 9中的氯仿萃取物的杀蜗效 果。这一结果说明,紫茎泽兰的杀靖效果随着生物碱含量的提高而提高,结合

前面己经证明的活性物质都大多位于氯仿萃取物中,说明紫茎泽兰的杀瞒活性
物质主要为其中的生物碱类。
表 1 总生物碱对柑橘全爪蜻毒力测定结果 0
稀释倍数
50 0
10 00 1

2 10 0 0.
8. 49

3 9 .  71
8. 33

校正死亡率
9 .  81
8. 45 4. 76

9. 72
8 . 53

20 00

4. 59

4. 84

4. 85

注: 表中数据为死亡率

332 .. 标准品的选择 因为紫茎泽兰中具有杀蜗活性的生物碱主要成分未确定,因此标准品需要      一种生物碱来代替。本实验对咖啡因、米哇和东食蓉碱三种生物碱分别与澳甲 酚绿作用进行了比较。实验结果表明,三种生物碱与澳甲酚绿都能,其中咖啡 因与澳甲酚绿形成络合物和从紫茎泽兰中提取的总生物碱与澳甲酚绿形成的络 合物的 最大吸收峰一致, 均为 64O耐图 1, 3.  n ) 因此我们选用咖啡因作为标准代
替品。

333 ..标准曲 线的绘制

四川大学硕士学位论文

用刻度移液管准确移取咖啡因乙      醇溶液到lm 比 OL 色管中, 再分别加入1L m
溟甲酚氯缓冲溶液和 2L无水乙醇溶液。用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,用 lm m c 的比色池以试剂空白为参比,于波长 64Om处测定络合物的吸光度。以测定 3.  n

结果计算得直线方程: =332A .  , 098。在2-35 / L C 6. 十078 R .  7 27 z 94 = 9 3u m g
的范围内,浓度与吸光度有良 好的线性关系。
I0 .

0 容 .

02 .

5 0  70 0     0

吸收波长/                恤 a 懊甲 - 酚绿。 - 因; 一 b 咖啡 。 咖啡因与澳甲 酚绿形 成的络合物, 一总生物碱与 d 澳甲 璐绿形成的络合物
图 t 吸收光图谱

334 .. 总生物碱含量的测定

按照总生物碱测定方法[,      [ 测定吸光度,计算出 5 2 ] 紫茎泽兰提取物总生物碱
含量为 96,结果见表 i. .% i

四川大学硕 L 学位论文

总生物碱含f的测定 ( 以咖啡因计)
序号

吸光度
八 曰
 .        

含量 ( ) %
96 .

R D () S %

咋 ‘ o
…  

‘ 今 J 自 月了 O Q 介 咋 ‘ 八 【了 J 门 了 4 扮h

94 . 99 . 93 . 
99 .

077 .3


n 曰

18 .6

076 .1

34田间实验 .

实验结果 见表 1)表明:紫茎泽兰总生物碱 20      ( 2 50倍防治效果明显好于 紫茎泽兰总生物碱 50 00倍与 4% 0 乐果乳油 10 00倍的防治效果。紫茎泽兰总生

物碱 50 倍与 4% 00 0乐果乳油 10 倍的防治效果不显著。施药后第 7 00 天,紫茎 泽兰总生物碱 20 倍防治效果达 9.%药后第 1 天, 50 24: 5 紫茎泽兰总生物碱 20 50
倍仍达 8 .% 36 0
表 1 紫茎泽兰总生物碱防治柑橘全爪蛾的田间实验 2
试 样
( 倍) 紫茎泽兰
9 .  0 1

施药后第 2 天

施药后第 7天

施药后第 1 天 5
平均防效 () %
8 6 3

平均防效
() %

差异显性
5 %

平均防效
() %
9. 24

差异显性
5 %

差异显性 5 %

总生物碱 20 50
紫茎泽兰   
7 .          5 0  b

总生物碱 50 00
4%    0 乐果

7. 97

63 9 : . 

7 .          5 3  b

81 1 . 

6. 59

乳油 00    10

4 讨论
有机溶剂分级萃取是天然产物化学提取及粗分离的经典方法。根据相关文     

献资料,有两种相似的系统溶剂分离法。在狼毒杀虫活性物质的提取研究中,

四川大学硕 t : 学位论文

结果显示两种方法基本等价。考虑到乙醇具有渗透力强、溶解性能好、价廉、 易于回收、毒性小等优点,将是大规模提取时的首选溶剂,我们在紫茎泽兰杀 蜗活性物质的提取研究中选用了首先以乙醇提取杀蜗活性物质,再用石油醚、 氯仿、乙醇分级萃取的方法,并获得了很好的实验结果。 人们对天然产物农药活性物质的研究一般分为两个过程进行。第一步是对      天然产物粗提物的生测筛选。本人在第一章己经做了紫茎泽兰乙醇粗提物的杀 蜗活性检测。结果显示,紫茎泽兰的乙醇提取物对柑橘全爪瞒和二斑叶蜗具有 很好的触杀效果与一定的拒食效果,并对二斑叶瞒的卵具有一定的触杀作用口 这说明紫茎泽兰具有很好的杀蜗活性,我们完全可以认定有毒植物紫茎泽兰含 有高活性的杀蜗活性物质,可作为一种生物杀蜗剂开发利用。 天然产物农药活性物质的研究一般过程的第二步是对某种具有农药活性的      提取物,通过分离、跟踪生测,肯定活性,判明结构。本人通过对紫茎泽兰的 乙醇提取物的分段萃取,得出氯仿萃取物得率最高,为 3.% 87 ,是石油醚的将 近 2 乙醇的 15 比 倍, . 倍。 较三种萃取物的杀蜗校正死亡率, 我们发现氯仿萃取

物的杀蜻活性最高, 在稀释 10 5 倍时, 10, 达 0%在稀释30 0 倍时仍然有9.  51的校 % 正死亡率。确定紫茎泽兰的杀蜻活性部位大部分存在于氯仿萃取液中。刘世贵 等人测定的紫茎泽兰氯仿萃取物的灭蚜活性最高,并分离鉴定出主要杀蚜生物 碱活性物质的紫茎泽兰素 A 。根据本人测定的紫茎泽兰的杀瞒活性与刘世贵等 人测定的紫茎泽兰杀蚜活性存在同一有机提取部位,我们大致可以确定紫茎泽
兰的杀瞒活性物质主要为一些低极性,亲脂性生物碱类物质。 前面的实验结果显示紫茎泽兰的杀蜗活性物质大部分存在氯仿中,而且氯      仿萃取物对柑橘全爪蜗具有很好的杀灭效果。但对比表 8 与表 9的数据我们发

现,在相同条件下,紫茎泽兰乙醇总提物的杀蜗效果要比氯仿萃取物的好。表 9 的数据也显示乙醇萃 取物对柑橘全爪蜗也具有很好的杀灭效果。另外,对比

表 1 与表 9 0 数据可看出,紫茎泽兰的杀蜻效果随着生物碱含量的提高而提高.
所有的这些数据表明紫茎泽兰的杀蜗活性是多种组分共同作用的结果,而且其 主要的杀蜗活性物质属于生物碱类.

、      田间实验结果表明,紫茎泽兰总生物碱 20 50倍与紫茎泽兰总生物碱 50 00
倍对柑橘全爪蜻均具有较好的防治效果, 以紫茎泽兰总生物碱 20 倍的防治效 50

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果最好。说明紫茎泽兰具备开发为农药的条件。 本人要说明的是在以刘世贵为主的开发紫茎泽兰的灭蚜活性研究中已经分      析了灭蚜活性成分,本实验虽然研究的是紫茎泽兰的杀蜻活性效果, 但主要的 目的是开发紫茎泽兰的实用价值,所以没有再继续对紫茎泽兰的杀靖活性成分
进行提纯分析。

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第三章 紫茎泽兰杀蟒活性物质的安全性实验
摘要:为确保开发以      紫茎泽兰为主的植物源农药的安全性。按照 《 农药登 记毒理学实验方法》介绍的方法,采取小鼠急性经口毒性实验、大白兔急性皮
肤和眼刺激实验、 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核计数及小鼠精子畸形实验等方法, 对紫茎泽兰杀蜻活性物质进行了急性毒性和遗传毒性实验。 结果表明, 受试物对

两种性别的小鼠急性经口 毒性实验, %均大于50m/g 属于微毒级, L 00gk; 对皮 肤无刺激性;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验及小鼠精子畸形实验结果均为阴
性。表明在本实验条件下,紫茎泽兰杀蜗活性物质微毒,未见遗传毒性。 关键词:紫茎泽兰;安全性:急性毒性:遗传毒性     

1 引言 已      有的数据表明紫茎泽兰对多种农业害虫, 害蜻, 包括棉蚜、 柑橘全爪瞒、
茶叶绿叶蜗、二斑叶瞒等具有很好的毒杀效果,本人的田间实验也证实了在室

外紫茎泽兰对柑橘全爪靖具有很好的毒杀效果。弄清楚紫茎泽兰对哺乳动物是 否有毒以及毒性大小,是涉及到以紫茎泽兰为主的植物源制剂应用于生产的关 键问题。在此,我们对紫茎泽兰的杀靖活性物质进行了小鼠急性经口、家兔急 性皮肤和眼刺激、小鼠骨髓细胞微核及小鼠精子畸形实验,为其生物安全性提
供毒理学依据 。

2材料和方法
21 . 供试材料
紫茎泽兰:      四川省草原工作总站提供,采自四川省凉山州。 昆明种小鼠:      体重 1-2 ,由四川大学华西医学院实验动物中心提供。 82g

白色新西兰家兔: 1825g      体重 .  k,由四川省中医学院实验动物中心提供。 -.  22 . 仪器与试剂
医用注射器、针头:上海医疗器械工业集团公司     

电热恒温水浴锅:北京西城区医疗器械厂     

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光学显微镜 旧 本 OYPS LMU 光学显微镜器械厂
托盘称 :北京精 良衡器有限公司

低速离心机:北京泽祥永兴科技有限公司 解剖器械:上海医疗器械工业集团公司 吸管、纱布、计数器等常规器械由本校实验器材设备处提供。 磷酸氢二钠 (a P,  Ns 0) H :成都高新区蜀都化验设备厂

磷酸二氢钾 (H O) K, ,  P :成都高新区蜀都化验设备厂
二甲苯 : 宁波海曙工商实业总公司 松柏油: 上海标本模型厂 环磷酞胺 (P 上海华联制药有限公司 C ): 小牛血清 (C ): FS 上海复旦天呈公司
其他试剂均为国产分析纯。

23 . 试剂配制
231  68  .. p . P H  B的配制

甲液 ( /5o/ K P ) 72g  P 加蒸馏水到 l0m 。乙液     1mlL , , 2.  K, 。 1 H O  : 2 H O 00l (/5o/ N, O) .2 加蒸馏水到 10m。 液 5. 与乙液4.  11mlL  P, :16g a H 7 001 甲 081 m 92l m 混匀即为 p 68 P 缓冲液。 H  的 B . 
232甲醇一冰乙酸固定液 ( :)的配制 .. 31
甲醇 3      ,冰乙酸 1 。现配现用。 份 份

234 es 染液的配制 .. G ma i 吉姆萨染色粉 1O,置于研钵内,      .  g 先加数毫升甘油, 仔细研磨至呈无颗粒
的糊状,加甘油到 6m ,移入 5 6 ℃水浴中 2 ,不时摇动使其溶化,待冷 6l 5-0 h 后加 6m 6l甲醇,混匀。 贮于棕色瓶内。室温下放置 2 - 周后,以粗滤纸过滤。 ^3

临用时取 Ges 染液 ll p 68 P 缓冲液 lm 混合,即为工作液。 ima m 与 H  的 B .  ol
24 . 实验方法

241 ..  实验流程

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紫茎泽兰杀蜗活性物质 ̄ 急性经口 实验 ̄ 急性皮肤和眼刺激实验
 ̄ 精子致畸实验 ̄ 小鼠微核实验

242 .. 安全性实验 2421 ... 急性经口实验

参照《      工业毒理学实 验方法》 ] 性毒 分级 1极 性 标准( 表) 0 m/g 3 5 见下 , 0 gk, 设5 0 20m/g 1 0gk 三个剂量组。 50gk,  m/g 2 5 小鼠L. D采用简易测试方法〔, “ 体重 1- , 8
2g 2 健康小白鼠5 只,随即分为 5 0 组,每组 1 只,雌雄各半,禁食 1h 0 6 后, 间隔 2 分两次经口染毒,仍合并作为一次剂量计算。 h 连续观察 1d 4,记录中毒 症状及死亡情况。
表 1 化学物质的极性套性分级修订表 3
人经    口的可能致死t

大鼠一次经口

6 只大鼠吸入4 死亡 h

兔涂皮时L D (/g gk)

总1()                t  g

L (gk)  2 只的浓度( m D m/g -4 p )  (gk) p         m/g
剧 毒
商 毒 中等毒
低 毒 微 毒

( 体重6k 计)            以 0g

<5

: 一
5-
b 日u-

0 < 0 . 0 .  0 5 - 5
>  0 10 0 , 

5 0 -

00 0-
00 0-

3 4 5 4 0 -
2 10 ,8 -

500 ,0-

2422 ... 急性皮肤和眼刺激实验 均选用健康白      色新西兰家兔, 采用一次性涂皮 (g、滴眼 (.g 法, 2) 05) 根

据G 1 7- 95 分 准 行 分 【. B  0 1 评 标 进 评 判定“ 5 6 9 ,
2423 ... 小鼠骨髓细胞微核实验

受试物设 10m/g 50gk, m/g      00gk, m/g 20gk 3 0 5 个剂量组。 另设空白 对照 ( 蒸 馏水) 、阳性对照 ( 环磷酞胺4 m/g 用生 0 k, 理盐水配置) g 。每个剂量组8 只小 鼠,雌雄各半。采用间隔 2h 4 两次灌胃 方式给予受试物,于第 2 给受试物后 次

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6 处死动物, h 取胸骨骨髓, 按常规方法制片K, ma m i i Ges 染色, ' 镜检, 计数含微 核的细胞数,计算微核细胞率 (NF  MC) 。数据处理用SS 软件。 PS 2424 精子畸形实验 ... 小鼠 受试物设 00gk, m/g 20gk 3     10m/g 50gk, m/g  0 5 个剂量组。 另设阴性对照 ( 燕 馏水) 、阳性对照 ( 环磷酞胺4 m/g 用生理盐水配置) 0  k, g 。每个剂f组5 . 只 性小鼠. 各组动物采用亚急性染毒方式, 灌胃方式连续给予 5 受试物, 以 d 每天 1 对照组也相同处理。在首次给受试物后的第 3d 次, 5 颈椎脱臼处死小鼠, 剪
开腹膜,取出辜丸,分离附皋,常规方法制片,Ges i a染色,镜检,不同畸形 m

精子分类计数,计算出每组动物精子畸形百分率。数据处理同上。

3实验结果 31 . 小鼠急性经口 毒性实验 连续观察 4 .高剂量组动物出      1d 现中毒症状,表现为活动缓慢,食欲差,
潮式呼吸,流涎,并在 7 d内有动物死亡,7 d后存活小鼠逐渐恢复正常。1d 4

时高剂量组动物体重与对照组动物体重差异显著 (<. , P00) 且试验组小鼠毛发 5

比 对照组仍欠光滑.实 验结果表明 致死中 L. 0m/g 按评分标准冈, 量 D >00gk, 5 其毒性分级为微毒级,见表 1. 4
表 1 紫茎泽兰杀蜻活性物质对小鼠急性经口 4 毒性实验结果
组别

剂量   

动物数
(    只)
钾. 二

1 天体重 4 ()    9
2 .  0 1* 5

死亡率
()    %

(gk) m/g
50 00

n 目

受试物组

20 50


一.

n U

2.   9 6 2.   8 5
2.   8 8

1 5 2 0

对照组

: :

注:各组与阴性对照比较 *P00,下同。 >.  5

32 . 家兔急性皮肤和眼刺激实验

家兔皮肤涂抹 2 该紫茎泽兰杀蜻活性物质并持续 4 后,未见家兔皮肤有      g h

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8, 。 红斑、 水肿等刺激症状, 连续观察 4h 家兔皮肤的刺激平均值为0 家兔眼滴 l 观察,眼球有血丝,不停的骚爬,结膜 h 入 05 紫茎泽兰杀蜗活性物质后,   .  g 轻度充血,并有少量分泌物, 4 观察,眼睛恢复正常。故该紫茎泽兰杀蜻活 2h
性物质对家兔皮肤及眼均无刺激性

33 . 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验 先在低倍镜下选择细胞分散均匀、染色良      好的区域,再转至油镜下进行计 数。骨髓嗜多染红细胞呈灰蓝色,成熟红细胞呈橘红色。微核大多数呈圆形或 椭圆形,边缘光滑整齐,嗜染性与核质一致,呈紫红色( 2。微核细胞率以 图 ) 千分率表示,一个细胞中出现二个或更多个微核,仍按一个计算。各剂量组不 同性别动物骨髓嗜多染红细胞微核细胞率与阴性对照组比较均无显著性差异 (>. 。阳性对照组与阴性对照组相比    0 ) P0 5 有显著性差异 (<. 。表明受试 P00) 1 物在 10m/g 00gk 下,未见有诱发小鼠 骨髓微核细胞率增高作用,见表 10 5
表 1 紫茎泽兰杀峨活性物质对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验结果 5
组别

剂量    ( /g m k) g
》 八 卜 〕 n K 仲 }叭 卜1 林

动物数
(    只)
n 己 (匕

观察细胞数
(      个)
80 00 80 00

微核数
(    个)

微核率
(    %)

受试物组



80 00
C O

阴性对照组
阳性对照组

80 00
80 00

: { : . : : . : :
2 9  2       . 3 2 6* 8

34 . 小鼠精子畸形实验 每只动物镜检 1 0      0 个完整精子, 0 精子畸形的类型有: 无钩、 无定形、 香蕉 形、双头和双尾,以 及胖头等 ( 如图3。各剂量组动物精子畸形率与阴性对照 ) 组精子畸形率比较均无显著性差异 (>. 。阳性对照组与阴性对照组比较, P00) 5

有显著性差异 (<.1,见表 10 P00) 6

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表 i 紫茎泽兰杀蜻活性物质的小鼠精子实验结果 s
组别

剂量   

动物数
(    只)

检查精子数 畸形精子数
(      个)
50 00


畸形率
()    %
25 .2 26 .8
23 .6 3 1 .  2

( /g m k) g

(      个)
n 卜七 哥 ‘ }


10         0 0  1 0

受试物组

5 0  0           1 0
1 卜 ‘. 1

50 00 50 00


八 d 1 J 几 n n 乙
魂. ‘ 卜H

n } n 户
11

阴性对照组
阳性对照组

50 00


二 吕 d

50 00

l 凡0  ̄

1 .  6 3* 2

4讨论
在本次实验中,对紫茎泽兰杀蜻活性物质进行了 2      个阶段的毒性实验.第

一阶段急性毒性实验选用昆 种小鼠 结果 Lw 明 , D 雌雄两性均大于 50m/g 00gk, 大白 兔急性皮肤和眼刺激实 验结果为阴性, 紫茎泽兰杀蜗活性物质对有益 说明
生物微毒,并且具有来源于自 然易于降解的特性。 第二阶段遗传毒性实验,      考虑单项短期诱变实验有各自 的局限性, 所以 选 用了微核实验和精子畸形实验这两个短期筛选方法,以期从不同的检测终点和

靶细胞的角度, 对受试物的遗传毒性进行探讨。 微核实验是一种简便、      快捷检出 染色体断裂剂和有丝分裂毒物的实验方法。

细胞质中 微核来源有二:1断片或无着丝粒染色体环在细胞分裂后期不能定向 ( ) 移动, 因而遗留 在细胞质中: 2有丝分裂毒物的作用使个别染色体或带着丝粒 ( )
的染色体环和断片在细胞分裂后期被留在细胞质中。本研究表明,在测试剂量

范围内( 高剂量组动物已 显示中毒症状) ,紫茎泽兰杀靖活性物质不能诱发骨髓 细胞微核增加, 亦不引 起染色体损伤[ 5 7 1 精子形成是由生殖细胞的常染色体及性染色体上的不同基因决定的,      精子

形态的改 精子形成基因 突 结 } Tpa 变是 发生 变的 果[o hm指出s y性 锁基因 '  o [ 一连 s 7 r 
控制畸形精子的数量, 而常染色基因控制精子畸形的类型。 精子畸形率的增加, 在一定 程度上反映雄性生殖细胞的遗传损伤,畸形率增高, 待测物能干扰 表明 精子正常生长与成熟,至少能说明它对精子生成具有潜在有害影响。当 环境化 学物质使生殖细胞的基因发生突变或干扰了基因的表达过程,受到诱变损伤的

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()         苦参、 1 选用紫茎泽兰、 川糠、 鱼藤、 百部及益母草的乙 醇提取物对柑 橘全爪蜻和二斑叶瞒两种害蜻进行了    触杀与拒食活性。研究研究表明 紫茎泽兰 的乙醇提取物对农业上重要的两种害蜗(    二斑叶靖和柑橘全爪蜻) 具有很高的 触 杀作用和一定的拒食作用,并对二斑叶瞒的卵有较高毒杀作用。说明紫茎泽兰    同时具有灭蚜和杀蜻作用,具有开发为优良的植物源杀虫、杀靖剂的潜力。自    然界存在许多可开发利用为植物杀瞒剂的资源。本实验室的研究表明,除了    紫 茎泽兰外,苦参和鱼藤也对柑橘全爪蜻与二斑叶靖具有很好的毒杀效果,这样   
本研究也为增大植物资源利用范围开发植物源杀蜻剂提供了依据.    ()          2 采用索氏提取法对紫茎泽兰杀蜻活性物质进行了提取、 鉴定, 用紫外 分光光度计测定了.表明紫茎泽兰的杀蜗活性物质多为一些低极性,亲脂性物   

质,大多存在于氯仿萃取物中。显色反应表明其具有杀瞒活性的氯仿萃取物中    含有生物碱。并证明了紫茎泽兰的杀蜻效果随着生物碱含量的提高而提高。所    有数据显示,紫茎泽兰的杀蜗活性是多种组分共同作用的结果,而且其主要的    杀靖活性物质属于生物碱类。按照总生物碱测定方法,测定吸光度,计算出紫     
茎泽兰提取物总生物碱含量为96.      .% ()田间实验结果表明,紫茎泽兰总生物碱 20 倍与紫茎泽兰总生物碱          3 50

50      00倍对柑橘全爪瞒均具有较好的防治效果,以紫茎泽兰总生物碱 20 倍的 50 防治效果最好,      在相同条件下紫茎泽兰总生 物碱 20 倍与 4% 50 0乐果乳油 1 0 0 0

倍的防治效果存在显著差异. 紫茎泽兰具备开发为农药的条件。    说明 ()本实验研究表明,紫茎泽兰杀瞒活性物质的小鼠急性毒性实验,Lw          4 D 雌雄两性均大于 50m/g 大白 性皮肤和眼刺激实验结果为阴性,      00gk, 兔急 说明 紫茎泽兰杀瞒活性物质对有益生物微毒,并且具有来源于自      然易于降解的特 性。小鼠      骨髓嗜多 染红细胞微核实 验及小鼠 精子畸形实验各剂量组与阴 性对照 组均无显著性差异 (). ,      P00) 也表明受试物未见遗传毒性。 5 为寻找符合未来农 药的发展趋势[      7 1 ,本项目 研究, 的 提供了 利用紫茎泽兰开发为植物源农药的生
物安全性的实验依据.     

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结 语 紫茎泽兰作为一种公认的      世界性有毒害草,本着 “ 变害为宝”的原则, 本 实验室多年来一直致力于开发以紫茎泽兰为主要成分的植物源农药研究。刘世 贵等人的 研究已经表明紫茎泽兰具有灭蚜活性。本人的研究证明紫茎泽兰提取 物对柑橘全爪蜻和二斑叶蜻具有很好毒杀作用,而且对其杀靖活性部位进行了 生物活性跟踪分离、检测及含量测定,并将以紫茎泽兰为主的植物源农药剂型 有效的施用于田间实验,同时做了其杀瞒活性物质的安全性实验,为以紫茎泽
兰为主的植物源农药剂型的田间应用、推广提供了依据。

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参 考 文 献
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3 韩建勇, 曾鑫年, 杜利香, 儿种植物的杀蛾活性研究初报.’ 等. )尔农业科学, 0,)3 6 一 2 324- 0 (: 4

4 胡长 苏新林我国 物质农药苦株研究概况与展望. 农业学 20,(:- 效, 植 江西 报, 3 5 )2 6 0 135 5
5 钦俊德. 植物与昆 虫的关系. 科学出 北京: 版社, 8 17 9 6 刁久新, 刘秀华, 张其中等. 农药全能增效剂防治苹果叶蜿的初步研究. 蛛形学
报, 9, )0 3      12- 1 9(: 2 9 8

7 弓权炳, 长 雷慧德, 李鸿筋, 种环保型广谱植物源杀虫杀嶙剂一 等一 果圣水. 病虫害防
治, 0, )7 8      13- 2 31 : 3 0 (

8 彭萍, 侯渝嘉, 等. 林强, 果圣防治茶园土要害虫药效试验. 福建茶叶. 0,)- , 332 2 ( :3 0
9  at JA ceB t i l tnr2d L no:  br d  n. 4    x n  P kt a c Dcoa . e. dnBa u a Eas 89 P o .  o o n a ii y n d o r y n v 1 d 1 Sehr P  . cpv Pi e Ctou o O a et Te ad n F i r s 0  pe L D s ii rcd  a ge  r m n l  n P t rt e h d  C e rte e al f  n a r e  l ,  Te , a u
Vgt l n Ohr d. ny  syF m 17      ad  eSesSde N r r r , 5 ee b a e  t e y ue i 8

1 F lr  . outn  sr d  ua r m eohr iC l raI Vna 1  l T  Ir co ad e o Ept i a np ou n  i n .  ekt ue C n d i n p a f  o u d t m  af i n o :  a

Ro   e Poe i s  h t sn ai e c n oi ofe e      . c d g o t 8 Ai - ci W e Si c Sct C n r c. a B V d r e n f  h  a P f e  c  d  e e  e y  e n Bna r  a Te a s C m i 8 ofe e  sn a f e oiy     I i: Og i g  mte C n r coA i - ciW e Sc t agl ( d ) h r n i o t t o n n e h  e n f  P i a c  d  e,
18 , 72 0     -8 917 2

1 H y M. alh et Poel cae Ui S n o Ep t i aeohrm 2 o J  Et i m n o rcc ohr ti t e  ua r m  np ou sbs f  d s  l o n  o u d s  S rn.  e Z l dN w  l d  c 9032028      N w a n.  Za n JSi16, 0-0 pegi n  e a e e a .  ,  : 

1 Wh e  r o w e, ru ps Od  i 巩14,  5- 5 3  i C工Co n  da os  . A r . 945: 41 t t f e si e l g c e t 0 1 5 1 A lB  T e  r uo o Ep t i aeohrm r go t f nr ca o 4 u A h d tbtn  ua r m  np ou Se .  h a oh  s f d  .  i i i f  o u d s p n n  r  o t  e  t
Ne S uh  l .  rcR S c . ,  9 12 19 11      t Wa sJPo .  o . SW.16 , 0 : 5 -6 w  o e .  .  N. 9

1 Kn e . l i l t l rf n e, rta  np oa  t aee iSu 5 l R Bo g acn o o c t w dA e i aeohr (s r a)  ot g 1 io c o r f  o e g an d o A ec n  h

A i . i Eo. .19, : 71     r. sEv,9 1 7 8- 1 ra g fc A c c n 31 9
1 Mor M .  t  c it t i o e so fnu,  e u r p o t    rs  J H s sei i s d s  l f  t  gs P arm l i s.fr  6  i o p f y  e f  p u c u a h a a a  ,  h e

b l i l r f  o w e ( r i aeo r iSu fc ht hlta     cnooc fn  d e ta n o ) otAraPy py cc io c otl r o ga o t e A an d p a n  h i.  o a i. g
18 , 12 12 3       -8 99 2 :8

1 Mai G C erl A M L pz M e l ee l  r i p t ht w i    r N    N gi G   ,  e G    a Svr ieet g  n ta go wt 7  '  ,  l o  o t  .  a n sn l s  r t a h

四川大学硕 卜 学位论文

s t i l  s  r aa oie nl  e Jrn  t i d ar,    p a c p i Ga d P v c A a s l  d   o n o  M dd u r c  r   n  n bo o r n .  e d a i B a c e  i
18 , : 04 1      7 -7 934 4 0

1 Rh a O A a aM  Bo g ac t l r o we (ua rm eohr 8  m n  gr l  . l i l  r o c fn  d pt i a n ou a ,  w L io c o o f  n o t e E ou d p m
Sr gl y   t  r e d hr u i t e  ae Hm l a)  d  ,      b af if P c l ca s l S n i es r ia ys We Si p ne e )  r l o c o e ts  u y  i o n  t n a e c
19 ,29 -0      81 1 91 : 2

1 Vr a  , h R E e o Ep ti i o o tn  o o g why la 9  m T M na S fc f a rm  r r i is l  r t id  e S i s  .  t  u o u n p ao n  n  ,  n c i o e d
ntet  ha Co e(ir 18,1 -      w et r Rs  a , 8 : 615 ui i rn n  .  p  Hs ) 9 1 4 5

2 A d w A Fly  h e l y  ua r m  n hr in i ad  r e 0  r s  ,  e LTe  o oEpt i aeo o m  av n ip v ne C a v .  c g f  o u d p u n  e  m o d o t
ps r i nt r hin h l d.  ny T e  a s g  mt S et     n re Taad  h ns Sde:  Og in C m i e vn a u s  o h n  l te i a g y h r i o n e e h
C ne n oA i -ai      e  s nPc iWed  iy17, 1 5 ofr c f a e f c e Sc t 99 5- 3 o e ,  3 3

2 HlR A e ta  n hr ( r gl Mx a dv w e (sr e )Tcna 1  l  . r i aeo o S e e,  i n  i e Ata a .  i l   i L g an d p a  n ) ic e l d  e c e e c p h
C m ui tnC B  r tnl i e  ioi l t l 991 3 - 0      ao,  Ie aoaI t toBo g aC no 18, : 7 2 o m n i A n n i n t f l c o r,  0 1 3 c t su

2 Jln  e. oi l t l  e sA  r Ctou oA eta t i a e 2  i M    Bo g aC noo W e :  od o ge  gn n h r  t ue H d i v o r f d W l a l l f  s  e Tr d  g
Wed.  i f d  .C B Fr a R a 971      lg r( K) A ,  hm  yl18,3 esWan o U. :  a n o ,  - 2 向业勋. 3 紫茎泽兰的分布、危害及防除意见. 杂草科学, 9 51-1 1 1: 1 9, 0

2 姚朝 晖, 4 张无敌, 刘祖 明. 恶性 有毒杂草紫笨泽兰的防治 与利用 . 农业与技

术, 0, 12 2     ( : - 2 3 3 )3 8 0 2 2 5赵国晶, 云南省紫茎泽兰的分布与危害的调杏研究 杂草科学, 8,3- 等. 19: 4 9 37 0
2 Au B .vs e p i  f pt i aeohr .: na Ro  V 6  d  AI av c at o E a rm d po ml  ek a      l   n i a cy  u o u n u n V t a B 
e.oed g      i s  o          i - ci We         oiy d r e n     t Pc f  h e  8 t h  A a P i     e s af n c  d  Si c c ne  Sc t e     e C ne n .n a rI a T Og s C mt 8 ofe e  sn ai     e agle ni: e  ai g m i e  C n r c o A i - ci of ecB r o (d) h r i o t t n n e h  e n f a P f c
Wed  e , 1 4-      iy 18, 517 e Sc t 9 1 4 o

2 卿贵华, 7 王甸洪, 席俊林. 紫茎泽兰的危害现状及其防治措施. 西吕农业高等专科学校学 报, 0, 37 8      ( : -1 2 3 7 )8 0 1 2 植物 “ 8 食人鱼” 佼入中国 所到之处危害生灵. 农药市场信息, 03 5 8 20, : 01

2 9朱正方, 杨光忠等. 泽兰化学成分的 (. , 紫茎 研究 1 ) 天然产物研究与开发,9,3- 1 7: 3 9 9 59 3 0丁靖凯, 等, 余珍, 紫茎泽兰精油的香气成分及应用研究, 云南植物研究, 9, : 14 1 13 4- 4 9 14 4
3 1张无敌, 江蕴华等, 紫茎泽兰作饲料, 云南农业科技,)2 4 (:- 22 2

3 2杨正东. 紫茎泽兰刨花板生产技术的开发与研究. 林业机械与木 1 20,( : - ' . 设各, 2 0 )01 0 3 41 2 3 3李小平, 紫草泽兰提取液防治柑桔全爪蜗田间药效 试验, 等. 贵州省农业科

四川大学硕 L 学位论文

学, 9, 4 5      : - 1 53 9 0 9 2

3 李蓉涛, 紫茎泽兰的化学成分, 4 等. 云南植物研究, 9, : 6 0 1 7 91 - 0 9 1 92 3 5侯太平, 刘世贵, 有毒植物紫茎泽兰研究进展. 国外畜 牧学一草原与牧草, 9,)- 1 946 9 ( :8 3 张其红, 6 候太平, 刘世贵, 对紫茎泽兰中灭蚜活性物质的初步研究. 等‘ 四川大学学报( 然 白

科学版)00 7 )8- 4     0 3( : 1 8 , , 34 4 2
3 王一丁, 刘世贵, 紫茎泽兰灭蚜活性物质的分离、纯化及对棉蚜乙酞胆碱酷酶的 7 高平, 等.

影响.      高科技通讯, 0, : - 2 2 9 13 0 022 3 王一丁, 刘世贵, 紫茎泽兰提取物对棉蚜的毒力及其灭蚜机理研究. 8 高平, 等. 植物保护学 报, 0, 43 - 0     ( : 7 4 2 2 9 )3 3 0 2
3 赵博光,李小平,陈小平. 9 苦株果提取物对桑天牛产卵量及卵孵化率的影响 南京林业大

学 ( 然科 版 ,0,(:-      学 )026 )14 报自 2 21 4 4
4 强胜 . 界 性 恶 性 杂 草一 一 紫 茎 泽 兰 研 究 的 历 史 及现 状 . 汉 植 物 学 研 0 世 武

究, 9, 43 - 2     ( : 6 7 1 8 6 )6 3 9 1 4 1徐南 昌, 郎国 良, 刘立峰. 柑橘全爪蜿发生规律及 防 治措施. 植保技术与推 广, 0, 92 2     ( : - 2 3 3 )2 3 0 2 4 二斑叶a的发生规律与综合防治. 0, :  5 2 2 1 2) 4 0 ( 2- 4 2
4 F O Pat dc o ad  t t n 18,1 95 3  ,  Po ut n  P e i , 02 : -4 A l r n i n r co 9 o 4

4 吴霞 编译分离自 4 瑞香科植物根茎的瑞香烷Ai的杀虫活性 世界农药,0, (:- c 2 02 )5 9 0 2 31 1
4 J l yEo . t o 19, ( :  -14 5  o , mE o L 9 1 4 )12 1 . d c nm Me 8 4 18 3

4 6周玉书, 朴春树. 植叶蜻对P 酮的抗药性研究. 1 36 1 2 山 & 农药, 9,)5 2 9 (:- 4 张钟宁, 娄照祥, 墓二醛对蚜虫拒食活性. 虫学报, 9, (17- 6 7 刘殉, 等. 昆 1 3 6 )2 7 9 32 : 1 4 徐任生主编, 8 天然产物化学, 科学出 版社, 9, 1 1 32 9 1

4 中国医学科学院药物研究所编著. 9 薄层层离及其在中草药分析中的应用, 科学出版
社, 8,     2 1 23 9 1 5 0孙瑞 红, 尹纯 寿 , 忆青, . %哒 蜿 灵乳油 防 治 苹 果 害蛹 效 果研究 . 张 等 1 5 农 药, 9, 32 2     ( : - 1 5 4 )3 5 9 3 5 1奥? 米克斯. 色谱及有关方法的实验室手册. I 机械 一 业出版社, 7,  19 1 9 4

5 李慧芬, 2 卢继新, 张晓梅, 五种不同产地天仙子总生物碱的含量分析[. 等. [ 中草 J ]
药, 9, 85 - 3     ( : 2 8 1 9 0 )8 5 9 3
5 《 业毒理学实验方法》编写组. 几 3 _ 工 《} 业毒理学实验方法》. 上海科技 出版社. 7 17 9

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5 纪云晶主编. 4 实用毒理学手册. 中国环境科学出版社, 9 北京: 1 1 9

5 G 1 7- 9.7 5  5 01 5 -农药登记毒理学试验方法 B  6 9 1,

5 6孔志明等. 环境毒理学, 南京大学出版社, 9 南京: 15 9 5 7张静, 王静, 姜文玲 . 型齐炳素制剂遗传 毒性 的实验研究. 新 卫生毒理学杂
志, 0, 2 1 -      ( : 819 2 2 6 )1 1 0 1 5 8刘长令. 农药品种开发现状与发展趋势. 「 化 管理. 农药国家 r _ 程研究中心新农药创制研 究室, 0 8 1     ( : 2 1 )7 0

5 9逮晓波, 李北利, 金R平, 铅致幼鼠脑脂质过氧化的实验研究[. 等, [ 中国医科人学学 J ]
报, 0, ( : 41     1 ) 8- 6 2 2 31 8 0 3

6 Mc o a CI une  imn st o a eto l d sn g a . i l , 0  G w n n ec oVt iB tu n  c f  pi i irs o c Lt .f l f  a 6  s  s s e o o n n  Tx o e a p a t
1 8,78 -3      79 99 : 4

6 Bao G , uzi  e MC e a. i n imi B)  c o l d  x ao 1  t n  Z dk JB l ,  l h mi ( t n  e et n  ioi t n r R m , l  t  a T Va , f s  e n c i a t

ad psi o e i iu t a uc  e i [.  i l  l  r c ,     i n  l d  ts : r e i pt tl  Tx o A p Pa a l n d ot f  n  e h p t o na J o c p h m o e o a s e ]
18 ,914 12      6 -7 91 : 5

6 Eel Terpa P a m n T 2  a N r a hn H m od  r , et , C,e a. v o d e o o i te es  t  l i i i s  x av s s i ln v n c f  d i t r n

l d xo d  B / mc a e cd  r t n wt e ,  m r p s ic     e C 7 L6  e  r ue b ta et  m s 2 3 ie at uc i e - ps 5 ae i r d e  y  m e i h  o - c o c n - d
aio - e c tn 刀 Fe ai i d 19, : 71      ctl s i [ .r R d BoMe, 6 1 5- 1 c r a y ye e d  N e  c  l  9 2 1 6

四川大学硕 卜 学位论文

文献综述:紫茎泽兰的回顾与展望
在我国,有一群绿色的生灵搅乱了我们宁静、温馨的梦乡,它使原本属于      我们祥和、富庶的家园不得不紧急扎起栅栏。这些绿色的生灵便是外来有害植

物[ } 1紫茎泽兰俗称破坏草、 解放草、 臭草、 腺泽兰等; 其学名为 Ep t i uao u rm
aeohrm eg 您 cee tnm .  dnp o u S n . olslu L)英文名为Cotn  d或 Pmkn , p , rfo we e aaa t

菊科泽兰属多年生杂草, 便是这群外来有害植物的重要一员〔 7 ] 。在我国己引起
农业、林业、环保部门及相关部门科技工作者的高度重视。

1紫茎泽兰的传播途径及分布情况 11 . 紫茎泽兰的传播途径
紫茎泽兰具有特殊的生物学特性,有极强的生命力和传播性 。它种子很轻     

并长有冠毛可随风到处飘扬,既可进行有性繁殖也可进行无性繁殖。对四川省

凉山 州地区的调查发现紫茎泽兰主要是沿着河谷自 北传播或沿公路传播, 南向
说明河谷地区的生态环境特别适宜紫茎泽兰的生长,而且紫茎泽兰的种子成熟

期在 2 月,此时正值凉山州的干旱大风季节,且河谷风向沿河谷南北吹送, -4 所以紫茎泽兰多沿雅碧江、安宁河、黑水河及其支流传播蔓延,而且国道 18 0 线的走向也顺着安宁河谷,人畜流动频繁更有助于害草传播。由 此可见,紫茎 泽兰传人凉山的主要媒介为河流及公路交通干线。借助风力、水流以及人畜车

辆进传[ 等行播 W

12 . 紫茎泽兰分布 紫茎泽兰原产于墨西哥和哥斯达黎加一带,后作为观赏植物被引种到欧洲     

[ 后再被引种到海湾和亚洲‘ 显然, 4 ] , 习 。 长距离的 传播是借助于人的力量。 不过 短距离的传输扩散都是由 其自 身的瘦果扩散能力,经风力完成的【 紫茎泽兰 司 。
现己广泛分布在热带、亚热带地区的3 多个国家和地区。除中美洲原产地外, 0

还包括美国几、 〔 澳大利亚9 ” , [ ]新西兰1 南非II西 〔、 〔I 班牙〔、 度〔1 菲 0 ] I、 , L 1 印 I] 律 1 ] 1、 ,  6
宾、 马来西亚、 新加坡、印度尼西亚、巴 布亚新几内亚、 泰国「、 叫 缅甸、 越南 [I I] t 、中国、尼泊尔〔、巴基斯坦以 , B ” , 及太平洋群岛【I 1J 7 ,  h
我国原无紫茎泽兰,大约于 2 世纪 5 年代由中缅边境传入中国云南省。      0 0

四川 大学硕士学位论文

紫茎泽兰的光合效率高,比其他植物具有更强的环境适应能力和更快的生长速 度.它繁殖快,生物产量大,广泛分布于公路边、山坡上、水沟边、草场边及 农田里,且以2K /  0m  的速度向北扩展。经约半个世纪的传播扩散, 在云南、 a 己

广西、贵州、四川等省广泛分布和危害〔川 近年在西藏聂拉木县也有发现。 川, 一
目前, 仅云南省的发生面积己达 2. 万 k 广泛分布于 1 个地州 9 个县市, 48 O, 0 8

占 全省面积的6%- 7ro ` ' 
紫茎泽兰喜温暖、湿润的环境,可以在年平均温度大于 10      0 C、年平均相对 湿度高于 6% 8 、绝对最低温度不低于一1.  15 0 C、最高气温 3 ℃以下、最冷月平 5

均温度大于 6 ℃的气候条件下生长洲。 据赵国晶和马云萍在云南省垂直带调查
发现,紫茎泽兰可以适应在热带直至温带的宽气候带下发生和生长,不过,以

亚热带气候区域生长最茂盛[。 n 紫茎泽兰在澳大利亚水平线上热带至温带( 7 南纬 2 度一3 度) 5 5 范围内分布和危害〔。 2 从世界范围 2 1 来看, 最北分布区在北纬度的 西 班牙〔, , 直至南疆 3 度的 : n 5 南非和澳大 利亚p11 从海拔高 "3 ,  .。 11 : 度看, 约在海 大
拔 60 00 的垂直地段均有紫茎泽兰的生长。 0-30m 因此, 紫茎泽兰可能在这一范 围内的广大适宜地区发生和分布。我国长江流域以南地区都处于这一纬度范围 内,而且其他气候因素适宜。据推测,再经半个世纪,紫茎泽兰可能入侵整个

长江以 南各省区〔并大量蔓延而排斥其它植物的生长。紫茎泽兰作为一种世界 . 1 1 ’
性的恶性有毒植物,一直受到全世界广泛的关注。科学工作者对其进行了多方 面的研究,取得众多的成果。 2紫茎择兰的生物学特性

21 态 [ .形 特征2 9 ]
紫茎泽兰为多年生草本,茎常木质化变硬而呈半灌木状 ,一股高 5-      0

1 c, 2 m 高的可达2 m 茎和枝呈紫色, 0 -3e 密被灰白 色短柔毛和腺毛: 分枝对生, 斜上。 叶对生, 菱状卵形, 叶质较薄, 40 . , 30 . , 长 .  5m 宽 .  5m 边缘有 -7 c -4 c
粗大锯齿,基出三脉,上面深绿色,下面色较淡,两面疏被短柔毛,下面沿叶 脉毛较密,间有腺毛;叶柄紫褐色,长 2 c 。头状花序多数在茎枝顶端排成 -3m

伞房状或复伞房状;每个头状花序长约 5m 径约 5m 有 4-5 个小花:总 m, m, 0 0
苞片 1 层,线状披针形,背部具 2 -2 -3条宽纵肋,长 3m m ;管状花淡紫色。

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瘦果黑色, 长约 16m . ,宽约 03m, 5 m .  有 条纵棱;冠毛 1 3m 层,刚毛状,白色, 长约 3m m ,密生短刺毛。

紫茎泽兰和飞机草是同属邻近种,      其形态和生态特征相似。二者有时在同 一地区出现, 容易混淆,二者区别见表 1 <
表 t 紫茎泽兰与飞机草的形态与分布比较
名称






分布

茎暗紫色, 紫茎泽兰

近画球 南亚热带至中亚热 叶片菱形,仅于背面沿全 头状花序,

分枝斜上举
茎绿色,

脉被毛,叶柄紫褐色无毛 形,花白色

带, 60 00 海 0-30m

飞机草 分枝平展

叶片三角形,两面被灰色 头状花序 .长圆 热带至南亚热带, 海

绒毛,叶柄绿色被茸毛

形,花淡黄绿色

拔 10m以下 40

22 . 繁殖与发育 紫茎泽兰具有极强的繁殖能力,寿命约为十三、四年,以      种子繁殖为主,

是 种 融 生 的 倍 ( 1 , 常 成 配 种 〔 。o g n 一 无 合 殖 三 体( 7 通 形 无 子 子2 H m e 于 n ) = 5 lr 一 州
19 9 年在研究该 减数分裂 程中 先发 无融 殖[, e 发 1 种的 过 首 现了 合生 2 Bk 现了 a ar ,
该种的体细胞染色体为5 条, 1 可不经受粉和受精即形成种子的特性, 进一步明 确了 该杂草的 这一特性[ n ] 紫茎泽兰根与茎都能生长不定根,      无主根, 须根发达,孕蕾时间多从 1 1 月下旬开始,1 月下旬现蕾, 月中、 2 2 下旬始花, 它能同时进行有性繁殖和无 性繁殖,根茎能行无性繁殖,每株结实量为70-1 8 粒,瘦果小而轻 ( 20 0 0 0 千 粒重约 005 左右) 成熟期恰值干燥多风的 .  4 g , 早季,有利于借冠毛随 风飘扬。

散落地面的 瘦果, 6月雨季来临时, 到 在湿润和有 1 以上的日 0 % 光条件下, 5 天后开始萌发。幼苗生长迅速, 8周即可成株。因此,少量的植株,能迅速蔓 延占 领大片的空旷地。植株当年生长缓慢,以后逐年从根颈部发生分枝,形成 灌丛。 在茎枝的顶端开花, 花后枝端枯萎,由 两侧枝继续向上生长[ [ 2 1 3 紫茎泽兰种子的萌发严格需光, ud 光为主要因子,      Al 等以 研究了光强和照 光时间 对紫茎泽兰种子萌发的影响, 发现其种子的发芽率随光强的增加而提高
[ .  1W 1

四川人学硕 卜 学位论文

23 . 光合作用 刘文耀等研究了紫茎泽兰的光合作用特征,发现紫茎泽兰是一种阳性偏阴      的 C植物,对光照的适宜范围比较宽,光补偿点低,只有 70x : , 01。而光合速率

相对较高,最大净光合速率能达到 2mCz d- h,且在 1 3gO. m ? - ' ' 年的较长时间都 能保持这样较高水平〔。这些也是 7 v 1 紫茎泽兰能够侵占森林、草场和经济林地, 排斥掉其它植物而成为单优势种群的生物学基础。但在于早条件下,紫茎泽兰 光合速率明显降低。当土壤含水量降到 1% 7时,叶片萎缩. 光合速率接近 0 。当 土壤含水量在 1% 1以下时,植株会干枯死亡。经过干旱的植株,恢复供水后的 第三天, 其光合速率只达到其正常的5%" 当 3[。 土壤含水量低于 1 时, ` l 1 植物会 % 千枯死亡[。显然,紫茎泽兰需要湿润的土壤条件,这也是紫茎泽兰大都分布 m l 于沿海地区( 如澳大利亚) 或者其它较湿润地区( 如我国的西南地区) 的主要原
因。

24 . 化感作用 紫茎泽兰根部会分泌化感作用物质,抑制其个体周围生长的其它植物的生      长发育,能明显降低三叶草(rfl  ees和酸模(ue nplni) Tioi pn) u  r Rmx  eess种群 e

数量0。 7 植株的水提取液明 1 1 显具有化感作 应c: 且随浓度增加效 增强 用效 ,, 21 ., , : 应 [7 紫茎泽兰的这一作用特性是使其成为具强侵染力并导致其常形成单种群 :9 11 1 .
的重要因素。

25 . 紫茎泽兰的种群动态 紫茎泽兰当年萌生的植株通常生存率很高,不开花结实,待次年春季开花      之后生存率明显降低【 紫茎泽兰幼苗的重新定植量受该生物环境中数量和成 , ? 1

长状况的明显影响和调节【, 叫 繁殖能力最高是在3 年龄植株。 -5 据观察, 紫茎 泽兰种群发育大致可分为四个阶段:1 年生为幼年期;3 年生为青年期: -2 -6 7 1 一1 年生为成熟期: 2 5 1 -1 年后为衰老期〔。 u 在火烧地, l l 紫茎泽兰种群的数 量增加要比非火烧地更多。幼苗在火 烧地的成活率比非火烧地更高0。 , 土壤含 ; 1
氯量高时,紫茎绎兰的种群数量生长量处于较高水平,反之则低。种群数量还

受到光照强度的明显影响C , . 1

紫茎泽兰在泰国的人工草场上的生态学也被观察研究【。 同

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3紫茎泽兰的化学成分

许 龙 对 泽兰 抹的 学 进 分 从 和 序 分 到9     紫茎 植 化 成分 行了 析, 叶 花 中 离 云 等
个 单体 ,鉴 定 出 5个成 分 的化学 结构 ,它们 分别 是正三十二烷 (dticnae) 0一谷晰醇(  iotr l、豆渊醇(tgatT l、 noraotna 、 0 -stseo) s im seo)

蒲公英醇棕搁酸醋( rxsey pliae、蒲公英乙酸酷( rxsey t aatrl  mtl a a ) t aatrl a aeae"。华中师范大学有机合成所的 ctr) 朱正方等从紫茎泽兰的茎、叶中分出 1 个化学物, 0 经波谱( , ` M,  R分别鉴定为gcoaeahrn, 1 M ,  R"- ) R SH -N CM -x-grpooe g-yrx-grahrn bhdoyae-pooe, 表 木 全 醇 ( iieeio), 豆 小 醇 e fldlnl p ( imseo) s gatrl ,正二十八烷 酸 ( tcsni ai) 1一 胡萝 卜( t o aoaoc  d ,  c c i p -acseo),邻轻基桂皮酸( hdoy nnc d, duotrl。 o yrx cnai ai 阿魏酸( rl - i c) f ui e c

ai , cd 咖吗酸( f i ai , 异丙 基一 一乙 基一 -1 ) c f c d 2 a e c ) 一 烯 5 酞一 6 7基苯骄 ' 峡
喃的乙酞化物洲。中国 科学院昆明植物研究所植物化学开放研究实 验室曲 李蓉
祷等从利用紫茎泽兰的角度出发,从紫茎释兰的地上部分中除分离得到日一谷 幽醇及正三十二烷外,还得到 8 个化合物,分别为 3 2 一(’一0 一毗喃葡萄 一。 糖) 一苯基一2 一反正丙稀酸:6 一甲氧基山奈酚-7 一甲基醚-3 ( 一毗喃 - 一。 3 葡萄糖贰;6 -轻基山奈酚-7 R 一葡萄糖贰;棚皮万寿菊素一4 一甲基 - 一。 ’

醚-7 0 -葡萄糖贰; 一甲 - -o 6 氧基芜花素; 伞形花内 醋及正三十二醇[。 4 丁 1 Q
靖皑等对紫茎泽兰精油进行了化学成分分析,经色谱一质谱分析,定性定量地

鉴定了4 个化台物,主要成分为对聚伞花素、乙 5 酸龙脑酷等[。 l 1 ’ 据有关资料报道〔 ,泽兰属主要有毒成分是:佩兰毒素( eeo,      1 4 ] t mtl r CH23、 620) 泽兰苦内醋( prtn: e aoi) 香豆梢类等。 n 这一属的大泽兰( cie L E hnn ) . 
的主要有毒成分是二甲基百里香对草醒、飞岌草醇、乙岌草醛、香豆素。 西双版纳热带植物研究所曾报道紫茎泽兰含有大量水解丹宁及缩和月宁。      数种黄酮类化合物,其精油中有明显的烃类及香豆素颜色反应。 据江蕴华测定,      昆明地区春末夏初的紫茎泽兰顶端枝叶中含月宁 7 8%皮 一 .  1 粉法) ;其乙醚溶性成分在薄板层析时有典型的香豆素荧光反应。 江蕴华等 19)      (92从紫茎泽兰获得石油醚溶物、乙醚溶物、乙酸乙醋溶物、 乙醇溶物、水溶物。将这些粗提物分别给小鼠皮下注射,发现含有香豆素的乙
醚溶物与含有丹宁的乙醇溶物都有中等毒性。其芳香油有中等毒性。

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紫茎泽兰的毒素研究虽有进展,但主要毒素还有待研究。
4紫茎泽兰的常、微量元素 紫茎泽兰含有大量的氮、磷、钾以及丰富的常量和微量元素硫、钙、镁 、     
锰、铁 、锌、铜等 ( 2 ,其中紫茎泽兰叶片中含有 50 %的氧化钾 ,开发作 表 ) .4

为生物有机肥具有很高的利用价值刚。
表 2 紫茎泽兰的常、微盘元素含且
部位


常量元素含量/ %
P . A,
11 .  2 08 .9 06 .0

微量夕 素含量/ 〔 %
M g
02 .4 0 1 .4 0 1 .0 F e 0 1 .  5 00 .1 02 .0 Z n 18 7
81 1 .

K0 .
50 .4 4 1 .  2 28 .0

S 05 .1 0 1 .  2 00 .9

C a 19 .9
17 .8

N a
1 41 5 .1 2

C u 17 4 1. 64

M n 9. 62 1. 72 4. 00

N i 35 .  9 2 1 .  2 38 .0

C r

目 十
茎 根

02 .2 03 .2 02 .0

36 .8
18 .9

04 .0

12 5

7 .  3 . 7 7 28

32 .  5

5紫茎泽兰的危害性 51 .  危害发生的生境
紫茎泽兰发生和分布的国家和地区都有报道,紫茎泽兰侵入农田、草地、      草原、路边、宅旁、经济林地和森林。在印度 ,紫茎泽兰入侵麦田、影响小麦

的生长发育和产量【。 , 在中国, 5 1 发现其侵害经济林地、 路旁、 沟边、荒坡、 村 旁、 丢荒轮歇地以 及放牧草地[。 2 ' 在泰国 1 j 北部的高地, 对豆科牧草危害严重〔。 同 在南非, 紫茎泽兰入侵草原、 林地和溪边〔。 u 在澳大利亚,紫茎泽兰特别喜欢 ) 定植裸地或间裸地,而且在等于或大于2 度坡度生长最茂盛( ] 0 6 } 2 5
52 . 紫茎泽兰具有极强的侵染能力 紫茎泽兰为多年生草本,其茎基部常木质化,茎枝基部甚至整个茎靠近地     
面生须根,萌发出根芽,入土便能产出新植株,这使之在竞争并拓展生存空间

中处于有利地位【。 N 而且紫茎泽兰的结实力强, ] 每株可结种子3 . 万粒, -45 多 的可达 1 万粒。瘦果细小, 0 其顶端具冠毛,随风飘移散落(: 极易 P , 在棵地和 ,  z 0
稀疏植被的生境中定植生长。 53 . 紫茎泽兰竞争力强

四川大学硕 [ : 学位论义

虽然紫茎泽兰幼苗很小,      但其生长速度很快, 在定植苗的2 周内, -4 每周

可生长 14g 8 .  周成[f 紫茎泽兰一旦侵入草场、 3,  E] ,  2 i 林地和丢荒地, 便很快形
成单优势种群。 这与其具有分泌克生物质、 抑制其周围的其它植物生长有关〔。 川 据研究, 紫茎泽兰叶的 5水提取液和根的乙醚提取液, % 对陆稻、 黑麦、白三叶、 兰按、玉米等植物种子的萌发和幼苗生长抑制可达6.9一10。 30% 0% 这导致了原

有 物 落 衰 和 失2,3 植 群 的 退 消 [24 11] ,3 :, 1
54 .紫茎泽兰对农业的危害
紫茎泽兰对土壤肥力的吸收力强,能极大地耗尽土壤养分。据分折,紫茎      泽兰植株干重的氮、 钾含量分别为038,  1% 124, 磷、 .  226和 .0% 发生较重的 0% . 

生境上, 每亩生物量达35K, 24g消耗的氮、 钾分别达1.27.4 92Ka 磷、 00,  和3.  21 0g  对土壤可耕性的破坏较为 严重u u
紫茎泽兰在山地蔓延,带来了不可忽视的影响。据赵国晶等研究,紫茎泽     

兰严重影响水稻生长〔, 川 研究结果如表3 0
表3 紫茎泽兰提取液对陆稻种子发芽和幼苗生长的影响
处 理
1 2 3 4 5

紫茎泽兰 提取液

陆稻苗   

平均高度( ) c m
0 05 .9 19 .7 0

抑制率( % )
10 0 8.3 44

叶的水提取液 根的水提取液

叶的乙醚提取液
根的乙醚提取液
对照

6.9 40
10 0

37 .9



据和爱军等研究,紫茎泽兰水浸提液对玉米、紫花首借、白车轴草等的发      芽率、发芽势、发芽整齐度、胚根胚芽的伸长、干物质、粗蛋白、灰分等均有

不同 程度的抑制作用。1 的紫茎泽兰水提液能使玉米的产量降低 3 [, 0 % 0+ %a  55 . 紫茎泽兰对畜牧业的危害 551 ..  紫茎泽兰对草地的危害
紫茎泽兰侵占草场,抑制多种牧草生长。紫茎泽兰入侵草地的第一年同草     

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地植物共生,株高可达 3c;第二年紫茎泽兰成丛生长,其它植物因缺少阳光 0m 而发生徒长, 紫茎泽兰株高达 l m以上; 第三年形成单一的紫茎泽兰植被, 其盖 度达 8 % 5 见表 4 ,高度 1 m 5 -9 %( ) -2,最高可达 3 2m .  ,造成受危害的地区 6

以 遍野密集成丛的单植物群落出现, 满山 其它草类无法与它抗衡〔, 4 造成牧草 4 1 生长受到抑制,原植被遭到破坏, 牧草产量急剧下降, 牧畜饲草缺乏〔 2 1 1
表4 紫茎泽兰入侵凉山 草地三年后牧草产f的变化传入
紫茎泽兰    被侵害草地类型 干热河谷稀树灌丛草地 山地灌丛草地 山地草甸草地
在草地上的盖度
9 5
8 5

单位:%, h2 k/m g
对照样方
牧草产量
12 0 0 4 5 .  76. 800

紫茎泽兰
鲜草产量
3400 62.
2590 86. 21 6 . 30 0

紫茎泽兰   

草地内鲜草产量
24. 900

23. 40 0 20 . 40 0

9 0

150 0 15 .

552 .. 引起牲畜发病

紫茎泽兰的枝叶有毒,      且有特殊的气味,对马有明 显的毒害性(, 4 牛拒食 ; ] 该草〔 司 。紫茎泽兰带纤毛的种子和花粉使马属动物引起哮喘病,带刺的冠毛飞
入牲畜眼内,刺激眼角膜而致盲,马尤为敏感。种子上的纤毛带钩被牲畜吸入 后直往气管和肺部钻,引起组织坏死。它的毒素可危害牲畜心脏,造成心力衰

竭。用其喂鱼能引起鱼的死亡,用其垫羊圈,可引 致羊蹄腐烂〔。 叫 牲畜误食一
定量的紫茎泽兰轻者引起腹泻、脱毛、走摇晃,重者母畜不发情,怀孕母畜流 产等【 3 1 。

56 . 紫茎泽兰对林业和其它产业的危害
紫茎泽兰在山地蔓延之地多是气候温和、雨量充沛,适宜于各种林木生长     

发育的地区。据调查,这些地区的松树和萌生力强的阔叶树种,过去在砍伐之 后能迅速恢复。而现在满山遍野都是紫茎泽兰,使林业无法天然更新,人工造 林十分费工,生长也非常缓慢,严重影响营林工作。 此外,它还会破坏蜜源植物的生长,妨碍养蜂业的发展。云南是养蜂业的      越冬基地之一,生长着上百种蜜源植物,四季都能采蜜。但紫茎泽兰成片生长
之后,蜜源植物即被排斥,特别是毁坏冬季蜜场,降低春季蜂蜜质量,影响收

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益。

6紫茎泽兰的毒理学评价 紫茎泽兰压榨液对小鼠、兔、马、牛及猪 5      种动物静脉或皮下注射急性染 毒时,均急性中毒死亡。最大剂量为 1.  9m / 体重。经计算,压榨液 1 -40g  7 K g

对 皮下 小鼠 注射的LM 4 g  体重, D为41 /  , m K g 属于中 等至窝毒范围[, i 具体结果 d ]
h表 5 , 。

表 5 鲜紫茎泽兰压榨液对动物的毒性剂I t
受试动物 实验方法、 急性    小白鼠 毒理实验 急性    家兔 毒理实验 急性    马 毒理实验 急性    黄牛 毒理实验 急性    猪 毒理实验 毒物规格 与最大规格 染毒方法
和 次数

急性中毒    死亡率 ( %)

备注 L .9 lk D} m/ g =

0 llk .m/g

皮下注射
8 0

( 0gk) 4 m/g 9
25lk .m/g

1    次 肌肉注射
10 0

( 1gk) 4 m/g 4

( 2gk) 1 m/g 2
22m /g .8 lk

1    次

皮下注射与灌服
>0 9

动物实验 1    头 动物实验
>0 9

( lgk) l m/g l
32m / g .6 lk

共 6次      静脉注射 共 6次 静脉注射
>0 9

(1m/g 10gk) ( 3gk) 2 m/g 7

1    头 动物实验 1    头

共 4次   

江蕴华(91用鲜紫茎泽兰纯水溶物对小鼠颈部皮下注射,证明纯水溶物      9) 1

的毒性也是中等级别,14m / 的剂量可使鼠全组急性死亡。 30l  k g 他随后又用鲜 紫茎泽兰枝叶烘干物配成毒饵饲喂, 剂量达 38 /  .  k,小鼠 g  g 连服 3 至第四 天, 天全组死亡,剖检可见小鼠心、脏、肺、肝等有明显淤血或胸腔出血,与 “ 翅 摇病”有相似处。张吟祖( 7) 1 3认为紫茎泽兰引起的急性中毒病状与香豆素引 9

起的 “ 翅摇病” 十分相似〔。 , 咭 ,

四川大学硕十学位论文

7 紫茎泽兰的防除方法研究
71 .  紫茎泽兰的非生物防除方法 711 .. 人工和机械防除方法
在秋冬季,人工控除紫茎泽兰全株,晒干烧毁。该法可用于经济价值高的     

农田、 果园和草原草地[, o 但劳动强度大, 7 1 劳动效率低, 难以在大范围内 应用。
用装有旋转式刀具的轮式拖拉机,可以较快地清除单种群的紫茎泽兰植株。在

陡坡上, 履带拖拉机驱动〔。 可以 Y 但是, , ] 经这种方式清除后, 土地遗留残根的
萌生和新幼苗的定植,使得成功率不高。此外,由于紫茎泽兰发生生境的复杂 性,如陡坡,零星边地。耕地中和疏林下等,使得可以 进行机械防除的生境非

常 限1 有 [。 ” 杨 ]

712 .. 隔离带建设
紫茎泽兰种子轻且带絮状冠毛,根茎都能进行无性繁殖,传播和繁殖速度      快,风力、水流、交通工具、人、畜及苗木调运等是其主要传播媒介。为了维 护未受紫茎泽兰侵 占地区的生态安全,应在紫茎泽兰入侵的前沿地带,建立绿

色人工隔离带。
人工隔离带应选择在重要河流的峡谷地带、交通要道两旁等紫茎泽兰主要     

传播途径处。设计人工隔离带时,每处长度不应少于 2k ,宽度不少于 2m 0m ko 隔离带内紫茎泽兰应全部清除,保证清除地无紫茎泽兰残枝、残根,并将紫茎

泽兰定点就地销毁。清除地及隔离带内空地应种植优质速生牧草, 进行植被替
代,保证绿色隔离带内无紫茎泽兰生存空间。 各人工隔离带处应成立紫茎泽兰联防小组,对紫茎绎兰进行动态监测,对      越过绿色隔离带的零星紫茎泽兰,要组织群众,在未开花前及时采取措施予以 清除,发现一株,清除一株,杜绝紫茎泽兰向前推进,保证人工隔离带内无紫

茎兰播叫 泽 传源口
713 . 化学防除 . 化学防除是控制紫茎泽兰的主要方法之一,主要除草剂配方有:( 06      1 .% )
一08 的 2 4 溶液;() % .  2 4 丁醋和 2 4 5 ;  50 .% ,  一D 203 -06 的 ,  .  % 一D ,  -T () % ,  3 .  氯酸钠溶液。 前 2个配方在夏季植株旺盛生长季节中应用是非常有效的。而最后一个配     

四川大学硕 七 学位论文

方在春夏之交长期使用,相当有效【。 2 要达到最佳的防除、 ; ] 需要喷湿全株, 特 别是下部口 但这样施用,易因药物飘散而使临近作物产生药害C, 2 如要杀死成 5 ]
株,可在花期使用氯酸钠粉,但氯酸钠粉易燃烧 ,亦限制了该法的普遍使用。

此外,每亩用 1%      0肥草甘磷水剂 10-10m ,  4 20 00 501 2 -D5g加敌草隆 , 

50u4 0gs3 ,  7 ,于紫茎泽兰营养器官生长旺盛时期喷雾, 亦有良 好防效。 但要达到
最佳防效, 则需较多的喷雾量, 而且其防效受季节变化的影响。而且, 化学防治

应考虑除草剂所产生的环境污染( vrnetl  lto) e i mna pluin及杂草产生抗性 n o o

( ss ne等问 r it c) 题。由 e a 于这些因素, 制了 也限 化学防 措施的发 1 。 治 展1 侧
72 . 紫茎泽兰的经典生物防除方法

721 ..  植物的替代控制
如既进行人工和机械防除,又对被清除地加以垦植,则可控制紫茎泽兰重     

新侵染。 例如三叶豆( jns a) C au cjn生长较快,易形成密丛, a a 可通过种植该植 物阻止阳生性的紫茎泽兰发生和生长.种植三叶豆既可放养紫胶虫(acfr Lcie
Lca,还可收获三叶豆种子。选作替代控制的植物须是适生、生长快、具有 ac) 较高的经济价值,在短时间内郁蔽度可达到 7% 0 。以此法,最终可达到既能控 制紫茎泽兰危害,又能取得较大经济效益的目 们 的〔。 722 .. 用昆虫的经典生物防除 紫茎泽兰的经典生物防治始于 14      95年,美国人从墨西哥引进泽兰实蝇

( oeiohrs ii Soe到夏威夷,研究其生物学特性及用于控制紫 P ccdcae u ls  n) r t t 茎泽兰的可行性。泽兰实蝇属双翅 目 实蝇科的一种体形较小的蝇类,其幼虫白 色,成虫颜色加深。它在气温 1℃以上便能生长繁殖.其生活史为:成虫在紫 0 茎泽兰植株的生长点附近产卵,经 4 天孵出幼虫,幼虫钻入茎表皮组织内。 -5 形成 “ 虫澳结” 幼虫在虫瘦结内长大, , 化蛹,羽化成为成虫,钻出后 自己到其
它紫茎泽兰植株上展翅交尾,产卵,完成其个体生活史。泽兰实蝇一般羽化后

2h 4 即开始产卵, 天内完成产卵。 7 随环境条件的不同, 其个体生活周期最短为 1 天, -4 最长可达 1 天[ 4 2 + )
泽兰实蝇是紫茎泽兰的专食性重要天敌。其幼虫蛀入紫茎泽兰幼嫩茎枝端     

部,蛀食并刺激被害部位形成膨大虫痪,阻碍紫茎泽兰的生长,它虽然可形成 侧枝, 但开花结果数量显著减少, 产生不孕的头状花序, 直至植株最终死亡[几 0J l“ 。

四川大学硕 卜 学位论文

泽兰实蝇引起紫茎泽兰茎形成虫澳的机理是由于组织的细胞分裂素异常造成的

E, nt 人研究了 瘦形成的 程和结 ; 此外, ' Bnet等 " e 1 虫 过 构(。 2 1 泽兰实 蝇抑制紫茎
泽兰生长的主要生理机制是影响其光合速率风5。 」 但是,泽兰实蝇也有自 , 然发 生的天敌。 eatgms 如Mgsiuu 能抑制泽兰实蝇种群数量的扩大, 从而限制了 它的
控草效果『 。 “ ,

澳大利亚于 92      15 年便引 进该虫,以 控制紫茎泽兰晰洲 新西兰于 1 0 ?。 9 年 6 报道引进释放泽兰实蝇种群叫 度、南非亦引进泽兰实蝇在本国 。印 释放,建立 自 然种群, 控制紫茎泽兰〔1 我国已 0 以 ,4 1。 ,  3 于8 年代开始研究泽兰实蝇的生物学 特性、安全性测试及繁殖释放,建立自 然种群(; ;x 71 . 另一种昆虫— 食花虫(iams  ett Ar v也      Dhmu agnau ui) 受到人们的关注, r s  并与泽兰实蝇和一种真菌结合起来用于控制紫茎泽兰(51不过并没有达到理 4S1 6-。 ,5 想的控制目 只是抑制了 标, 紫茎泽兰的 扩散速度〔, 川 更不能将其从己定植地清
除〔R i f1 , I

723 .. 用真菌的经典生物防除 能引起紫茎泽兰叶斑病的真菌,首次被报道为泽兰尾袍菌(ecsoa      Cropr

e aoi Pc.。它可引 u t i  k) p r e 起叶子被侵染组织的失绿, 使植株的生长受阻〔 + 4 1
该苗株有许多同物异名 。其在澳大利亚和美 国夏威夷被记录 为泽兰尾抱菌

( ro o e aoi Pc.。 C cs r u t i  k 在马来西亚记作飞机草尾抱菌( ro oa e p a  r e ) p C cs r e p
e aoi - oai n 。在 中国最初 被报道 为飞机 草 色链 隔饱菌 u t i  dr t Y ) p r o e

( a r u r e a ri d ai e L e Go1。 新西 也以 名 P e a l i u t i oo tYn i t ) 在 兰 该 h o m a a  o - r ( )  u 1 p u  2 1 报道〔 i f . 后 又 定 名 为 飞 机 草 纸 抱 菌 (v v l il 4 1, Mc e o el o ls a e aoi- o t Yn e)11 4 u t io r i e Yn(o  年该菌首次 p r da ( ) M 9 5 在澳大利亚的昆 被发 士兰 现 为 茎 兰 潜 的 防 敌【 , 又 别 南 u1新 兰‘ 中 ( 紫 泽 有 力 生 天 4 后 分 为 非〔6 西 〔 国6 6 ,  3 W ,  i f 、 “ 和 4 3
等国所注意,并研究用于控制紫茎泽兰。Mri 研究了该菌,发现它具有极高 ors

的 专一性, 主要感染紫茎泽兰‘ 4。郭光远等详细研究了该菌的致病性特征、 11 2 . 6 病原菌的形态特征等(, 6 发现致病的紫茎泽兰植株的营养生长以 4 1 及各种生理参 数都有明显降低,室内和野外感病组光合速率比对照组光合速率分别降低
3.% 6.% 96 ,  7 ;叶绿素含量减少 6.% 6.% 8 66 ,  8 ;蒸腾速率下降 6.% 6 .% 7 27 ,  6 ; 7 叶中可溶性糖增加 3.% 6.% 67 ,  6 :全氯降低 5.% 5.% 7 29 ,  0 :全磷减少 3.  6 17, %

四川大学硕士学位论文

6. ; 25 株高、 % 叶片数和花朵数均有明显降 " Wn 低〔.  g& Smeel } a umrl 又进一步
系统和详尽地对该茵的生物学特征、侵染机理、致病能力、安全性和培养条件

等进行深入研究,也得出 完全相同的研究结论『a  g& Smeel19) " Wn ' a 3 umrl( 5 9
尝试用上述 Paoauai s.菌作为紫茎泽兰的真菌除草剂。但由于该菌 hermlra  p 生长缓慢,侵染和致病速度不足以有效抑制和抵消紫茎泽兰的较快生长速度,

单独应用作为真菌除草剂, 被证明是没有应用前景〔 强盛和Bet ueel 川 。 rtASmrl .
曾研 究用 从 紫 茎 泽 兰 植 株 上 分 离 、筛 选 出 的 链 格 抱 菌 [lenra A t ai r a t n t(r )esld菌株的菌丝体发展为真菌除草剂, le aeF.  ise」 r K 以防治紫茎泽兰, 这是首次发现的紫茎泽兰的新病害。通过对从 3 个不同地点紫茎泽兰植株的叶 斑病害上采集的 3个菌株进行了杂草的重新感病试验和人工维持杂草种群的病

害自 然流行试验研究,井对 3 个菌株的生长、发育、形态、致病力等比 较,筛 选确定了 1 个致病力最强的菌株。详细研究了分生抱子和菌丝的侵染过程。侵 入过程中在气孔和表皮细胞连结处形成侵染结构.但分生抱子产生的菌丝多只
经气孔侵入,而菌丝体片段形成的菌丝,不仅经气孔处侵入,还多为直接穿透

表皮细胞进入组织。 分生抱子侵染过程约需4 天左右时间, 而菌丝体则仅需 1h 4, 在 1h时,出现严重的病害症状。每毫升含 35 0菌丝片段的悬浮液可在 1 6 . X1。 一2 周内完全杀死紫茎泽兰幼苗,所有的处理,给予了 1h的保湿。初步探索 8 了病害发生的主要最佳环境条件和菌丝体的最好贮藏方式。从己取得的研究结 果看,该菌株菌丝体的侵染速度快,致病力强,对雾期的要求短,能很快杀死

杂草, 极有潜力发展为防除紫茎泽兰的真菌除草剂c " w }
73综合防治 . 无疑,要彻底根治紫茎泽兰这类恶性杂草,需要综合杂草学、植物学、微     

生物学、遗传学、分子生物学、农药学等多学科的研究力量,开展联合攻关, 协作研究.最后,实施综合措施,以达到逐步恢复原有的健全生态系统,利用 其健全性来抵御紫茎泽兰这类外来人侵种的传播蔓延.彻底的清除并抑制外来
人侵种的危害,保证生态系统可持续发展。 紫茎绎兰的利用 . 脱毒后用作饲料 1

四川大学f  学位论文 y[ ! :

紫茎泽兰脱毒方法有物理的、化学的、物理化学的、生物学的等等,其工 艺可以设想出上千种。云南省微生物研究所的张无敌等人经过近 6 年的研究, 先后找到了如下的一些工艺模式侧:
a鲜紫茎泽兰一接种好氧微生物发酵一饲料

b鲜紫茎泽兰 ̄接种好氧微生物发酵 ̄厌氧发酵一饲料

。鲜紫茎泽兰 ̄接种好氧微生物发酵一厌氧发酵 ̄简单化处理 ̄饲料 d鲜紫茎泽兰一接种好氧微生物发酵 ̄简单化处理 ̄饲料
把 4 个菌株(      4 细菌、 酵母菌、 放线菌、 真菌) 接种到只含紫茎泽兰压榨液汁 的琼脂上, 发现并非全部入试菌株都能生长, 能生长者只有 1 株。 9 将生长较好、 转化紫茎泽兰化学成分能力强的菌株进行分类鉴定,它们分别属于青霉属、短 梗霉属、曲霉属、捧状杆菌属、八叠球菌属、球拟醉母属、旋梗霉属、指轮柱

抱 属+ 霉o u

紫茎泽兰脱毒后,其碳、氢、脂肪减少,粗蛋白和纤维素增加,鲜紫茎泽      兰接种好氧微生物发酵脱毒前后的成分变化见表 6 0 把紫茎泽兰脱毒后用作饲料,      其主要营养成分稍次于槽渣, 而优于糠数类,

粗蛋白 含量为2.  " 04% ,与其它饲料的蛋白 2" 质含量比 较见表7 0
张无敌等人用脱毒后的紫茎泽兰喂养豚 鼠、猪 、鸡 ,发现其没有受抑制或     

中毒表现,生长、发育和繁殖正常,生理生化指标无异常。如果把云南紫茎泽

兰资源的1( %指重灾区) 变为饲料, 每年可获1 0 5 万吨, -2 有重要的经济意义叫。
82 . 生产沼气 鲜紫茎泽兰对沼气发酵微生物群不利,用好氧发酵法预处理紫茎泽兰作沼      气发酵原料,其脱毒效果得到了证明。尽管经预处理的紫茎泽兰原料的挥发性

固体( 82略低于未预处理的原料( 85,但其产气高峰期反而更早,峰值 0 8) . 0 9) . 更高。 发酵 2 天后, 4 两者才趋于一致。 其总产气量也高( 含家甲烷不低于 6% 0 0) 紫茎泽兰经预处理后作沼气发酵原料对其毒性部分消除〔。 川
鲜紫茎泽兰经好氧发酵处理后便脱毒成沼气发酵的原料。我们按常规测定     

脱毒紫茎泽兰作发酵原料的最大产气量为 26' t 4m/ 干物质。 每吨鲜紫茎泽兰可

四川大学硕士学位论 文

表 6 鲜紫茎泽兰接种好组微生物发酵脱毒前后的成分变化 有机成份
C H N

鲜紫茎泽兰

脱毒后紫茎泽兰
〔    重量百分比)
4 .  0 1 8

增或减
(   ) %
-. 06 -1 . 0 80

( 重量百分比)
4.3 04 63 .4 31 .  8

52 .0
35 .5 1.1 13 2 .  2 1 8

+ 16 1. 4
- 1 01 1.

CN / 粗蛋白

1. 1 27
1.4 97 2.0 47 1. 7 34 08 .0 780 .1

+ 20 1. 0

纤维素
脂肪 芳香油

1.3 06 00 .7

- 10 2 .8 - .0 91 2 -57 6 .  0

丹巧 ‘ 香豆素

260 .8

明显

未查到

显署减少

表 7 几类饲料的主要营养成分水平比较 ( 按干重,%)
饲料类别 糠数类   
1. 0 24 2 .0 26

粗蛋白

粗纤维

资料来源

云南省猪饲料营养成份 评定,刘天宇等,18 95

(1 1 种平均)
紫茎泽兰     
1.0 82

1. 5 72

( 按季节 7 次平均) 糟渣类   
2.0 46

云南省微生物研究所

1.0 16

云南省猪饲料营养成份
评定,刘天宁等.18 95

( 种平均 ) 了

生 产沼气 7 ' 7. m
83 . 用作杀虫剂
李小平等人研究发现,紫茎泽兰提取浓对柑橘全爪蜗具有杀灭作用。通过     

与氧化乐果田间药效对比实验发现, 紫茎浑兰提取液比氧化乐果的杀卵效果好, 持效期长达 1 个月, -2 且对柑橘全爪蜗的天敌无害。 由于桔园内多年施用氯化 乐果,柑橘全爪瞒产生了一定的抗药性( 、 85p) L 达 9pm ,因此紫茎汉兰提取液 C

四川大学硕士学位论文

在柑橘全爪蜻综合治理中与氧化乐果交替施用或单独施用,都可收到较好的防

治 效果[。 f 李蓉涛等在进行植物农药的 r e t 筛选过程中发现, 紫茎泽兰提取物对茶 叶小绿叶蝉有一定的杀灭活性[ w 1紫茎泽兰含有极其丰富的精油成分, 其提取 物 对米象, 米象, 和蚕豆象等储 虫 玉 豆象 粮害 有很高的 活性(。 杀虫 7 在尼泊 0 尔, 用 紫茎泽兰叶 直接防 铃薯 治马 黄蚂蚁 (o ls  et l) 1 四 D U oi a s 1' 川大学 ru rni 7. 8 , 7
草原鼠虫病害生物防治工程国家专业实验室的刘世贵等人从紫茎泽兰中提取出

有毒活性物质,以蚜虫为试虫进行了毒力测定,发现其对蚜虫具有较强的杀灭 作用。并采用分级萃取、薄层层析( C、G-M ( ) C S等技术对灭蚜活性物质进行 T L

了分离纯化,得到了一个高活性灭蚜活性物质— 紫茎泽兰素 A ,其 L二 C为 5.7gL 在稀释 50 99m/, 0 倍的条件下, 灭蚜校正死亡率达 9.%。 61 通过对其毒 理学研究发现,紫茎泽兰素 A 属于一种神经毒剂,它对蚜虫的乙酞胆碱酩酶有 明显的抑制作用,而且这种抑制作用随紫茎泽兰素 A 浓度的增加和作用时间的
延长而增强。该项研究的发现 ,对将紫茎泽兰开发成生物农药具有重要意义
1 n1 U-

84 . 制造纤维板
丁先学等曾用老化的紫茎泽兰的茎杆,加工成天花板纤维板,其质量指标     

符 合国家标准, 这项工艺已 获得国 家专利1。 2 由昆明 4 1 人造板机械厂研制开发的 紫 茎泽兰刨花板技术,以 紫茎泽兰为原料年产 70m的 00' 刨花生产线,己 20 于 02 年1 月在云南华坪验收合格1。云南省林业勘察设计院 7 8 1 研发出 “ 紫茎泽兰高压

微板1 粒 ,9 7 1

85 . 其它利用途径 云南省蒙胧县芷村林场和中国林科院有益昆虫研究所曾用鲜紫茎泽兰按一      定比例作成培养基, 栽培食用蘑菇,己 获得成功.许云龙等曾 对这种基质栽培 的香菇作了它与常用培养基栽培的香菇的对比,发现在生物碱、氨基酸、有机 酸、 糖类、酚类及靴质、 菇类、维生素的含量上没有差异, 在品尝食味鲜美度、

气味芳香度等方面两者相同〔。云南省的云南华工冶金研究所已 2 1 1 开发出 “ 紫茎 泽兰制害虫驱杀剂和草酸”项目 。另外,云南大理巍山的民间手工艺扎染厂利 用紫茎泽兰扎染黄色布料。云南日 报报道, 紫茎泽兰灾区的 群众曾 将老化的 植 株晒干作燃料。丁靖凯等( 9) 1 1曾提倡将紫茎泽兰芳香油( 9 精油) 用于香料工业

四川大学硕 卜 学位论文

9未来紫茎泽兰研究展望

就所有杂草而言,人类对紫茎泽兰所开展的研究己相当广泛而深入。但是      考虑到该杂草具有的危害性,己有的研究仍远远不足。而且值得注意的是,经

过多年的实践证明,各种各样的防治方法虽略有成效, 但都不足以全面控制紫 茎泽兰的危害。纵观上述,人们认为应在以下几个方面继续深入研究: ( 深入开展紫茎泽兰种群动态及其构成的植物群落的调查研究,      1 ) 可通过定 点定时观察研究和动态模拟研究,阐明紫茎泽兰作为一种喜侵入裸地的先锋植 物[,在植物群落演替及植被发展过程中的作用。为寻求积极主动地控制紫茎 7 , a [ 泽兰的措施,特别是充分利用防止水土流失和维持植被的覆盖等,提供理论依
据。

( 防除紫茎泽兰这类恶性杂草,      2 ) 需要一套综合防治措施。 其中, 多虫合用、
多菌合用、虫菌并用 、低量的化学药剂与菌类混配成为研究的焦点。而 目前,

另一新动向是直接利用可以杀死土壤杂草种子库中杂草种子的微生物,来研制 土壤处理生物除草剂品种。其优点是对环境要求不高,并有较长的持续效应。

另外,利用基因和细胞融合技术重组自 然界存在的优良除草剂基因成为研究热 点。因为其特点是大大加快了除草剂品种达到强致病、寄主专一、持效期长的

除草目 T 标C " ]
()      3在目前不能完全有效控制紫茎泽兰的情况下,对其进行综合开发利用,

也是重要的防控措施之一。防除和利用结合起来, 充分发掘其在饲养、农药上
的可能价值。废物利用,变害为宝。尤其是用来作为生物农药,不仅能有效地 控制这一有毒杂草的蔓延,而且还能克服化学农药对土壤危害严重、昆虫对其

抗药性强等弱点,对保护自 然生态环境意义重大。

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参考 文 献
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Vgt l n Ohr d. ny  s F , 5     ad  eSesSde N r r  m 17 ee b a e  t e y ue i 8 y r

6  u B M r P Te  e l y  ua rm  n hr Sr giA saa    l A ai M h at c o oEpt i aeo ou p n, uri A d  ,  n  .  u o g f  o u d p m  e n tl. t o
Wed sa h 17, 2 3      er ,  51: -1 eR e c 9 57

7  ueT Ir u i ad  a oEpt i aeohr iCl raI Vna    lr .  dco n s d  ua rm  n o m  afn .  ek a F l C no tn  p t e r f  o u d p u n i i n o :  t
Ro   d P e n o h t sn c i e c ne  iy  fe e      e. cei s  t 8 A i -ai W e Si c Sc t C n r c. a B V  r d g f  h  a P f o e  c  d  e o e o en
B na r  i :  Og s g  mt 8 of c oA i - c iWed  iy      Id )T e  ain C m i e  C ne ne  s n aic e Sc t agl ( a h r i o o n n e t h  r e f a P f o e,
18 ,7 -8        9 1 72 0 2

8 H y M. alh et Poel cae Ui S n o Ep t i aeohrm    o J  Et i m n o rcc ohr ts  e  ua r m  np ou s bs f  d s  l t i o n  o u d

Sr gi e Za n.  Za n JSi 9032 - 8     N w  l dN w  l d c 16,  0 0 p n.  e n  e a e e a .  ,  :  2 0
9 Whe  r o w e, r u ps Od  i J 14,  5- 5    i C下Co n  da os  . A r .  45: 41 t t f e s i e f g c ,  01 5 e t 9 1 u B  T e r uo o Ept i aeohrm r go t f nr ca o 0  l A h d tbtn  ua r m  npou Se . h a oh s f  A d  .  i i i f  o u d s p n n  r  o t  e  t
Ne S uh  l .  r .  o . . ,  9 12 191 1      t Wa sJP cR S c SW.16 , 0 : 5-6 w  o e .  o .  N. 9

1 Kue . l i l t l rf n  dA e ta  np oa s r ee iS u 1  l R  io c cn oo c t w e, r i aeohr ( ta a)  ot   g 1 o g a o r f  o e g an d B o A ec n  h

AraA i Eo.  ,9 171 -     r. s n.19, : 711 fc.  c c E v i g 3 8 9 1 2  rs  J H s s c cy d s  l f  t gs Parm l i s.f t  Mo i M  ot  i i s i o e so f u,  e u r p o h r .  p f t t e f  p u ei u a n h a a a  ,  e r 

b l i l r oc fn  d  ri aeo r iSu fc.  ohlta      ot l r o w e ( e ta n o ) otAraPy py cc io c cno f  o ga o t e A an d p a n  h i ht a i. g
18 , 12 123       -8 9 9 2 :8

1 3  r N C N gi G M, e G   a Svr ie sn p n t t  wt  Ma'    erl A  L pz  e l ee l r tg  t h g w  h i G ,  l o  o M t  .  a n e i l s  r i t a a o
sb o i  c s  r d P v c.  l d J d      l  p i G aaa  oi e A a s  l ri B t i d M di ut p a r r c o n  n r n n e e a n o n o  a c e ar , d
18 , : 04 1        7 934 4 - 07

1 am n A a aM  Bo g acnoo c fn  d pt i ae po m 4  h a O gr l  . oil  r f  o w e (ua r m  n hr  R ,  w L i c otl r l o t e E ou d o u
S r glb a  t  rcc ohr ti t e  a e i a ys ed  ,        f if Poel cae ul S n i es r Hm l a.We Si p ne)  r l e y  u y  d s  s  i o n  t n  a L  c
5  1

四川大学硕士学位论文

19 ,29 -0      81 1 91 : 2

1 e a  , hs  . co Ept i i o o tn  o o g why la 5  r T Mi a R E e f a r m  r r i is l  r t id   V m S n S f t  u o u n p ao n  n  ,  n c i o e d
ntet  ha Co e(i ) 9814-      w et r Rs sr 18,1615 ui i rn n  .  p  H a ,  : 5
1 A de s  ,  e L T e  l y Ep t i aeohrm nt e  ip vd 6  nr AC Fl y  h eo g o ua r m  np ou i av ad  r e w a v .  c o f  o u d n i n m o

ps r i o hr hin i ld. ny Te  ain o mt Svn      nre Taa h h ns Sde:  Ogn i C m i e  et au s  t n  l d  a t e n  g y h r sg  e e h
C n r c o A i - ci e Sc t 99 5- 3      e  s n ai Wed  iy 17, 1 5 of e en f aP f c  o e ,  3 3 1 7  i R  A ean aeohr (p ne,  i n  iw e ( s r ee Tcn a  Hl L grta  np oa  r gl Mic dvl  d  t a a) ehi l l  .  i d S e ) x a e e A e c .  c

C m ui t nC B  r tnl i e  ioi l t l 991 3 - 0      ao,  Ie aoaI t toBo g aC no 18, : 7 2 o m n i A n n i n t f l c o r ,  0 1 3 c t su

1 ue M e. oi l tl  e s W r CtouoA etad r  e 8  ln    Bo g aC nooW e : od o ge  gn n t i a t  J i H d i v o r f  d A  l a l l f  s  h Tr e g
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C n r c. na rI aT Ogn i o mt 8 ofe e  s n ci     e agle ni: e  ain C m i e  C n r c o A i -ai of n B e e o ( d ) h r s g  e t h  e n f a P f c Wed  e .  1 -     iy18. 517 e Sc t 9 1 4 4 o

2 史志诚主编. 4 中国草地重要有毒植物, 农业出版社, 9, 41 中国 1 7 2- 9 9 1 3
2 Au B E ptr m  e sei iA saa as 901: -6 5  l A ua i w d c s  ut l. n, 7, 8 8 d  . o u e p e n  r iP l 62

2 H lg n y l ih d n  r  Frfnug gr ad  a rm K l 6  o r I to s S i ue d opazn Ei o n Epti . . m e . o g c t e b i tl Z u e  r e n  u o u g
Ses vt k k H n1 99 9 -1     e nas d  d 11, : 1 v k e pa a , n a  51 7 2 B kr  . e  ecoC l in Sei .e Y r: ae iPe , 5 4- 8 7  aeH T G nts  o n i pc s w  k A dmc s 16. 71 G h e i f o z g  eN o c rs 9 1 6

2 孙锡治, 8 全骏纯, 紫茎泽兰个体生物学特征与防除技术, 等. 云南农业科技, 9: - 1 2 31 9 1 5 2 刘文耀, 9 刘伦辉, 郑征等. 紫茎泽兰的光合作用特征及其生态学意义. 云南植物研
究, 8, 1 -8      : 511 1 807 9 1

3 刘伦辉浏文耀, 等. 0 郑征, 紫茎泽兰个体生物学及生态学特性研究生态学报, 89 6 0 1 9 :- 9 ,6 7
3 ra i  S g R  i b  .ll a i o naoEpti ae pou :  1  i t R  i h ,  C Alo tc  tl ua rm  n hrm A  T p h S n SS g M e p h pt i f  ou d o i ,  n e
dm nn u r w e oMehl a rc t cA a P t i . i9 14 : 84     r e l  d  ga yP o.a . i cd rB  lc 18,  5- 5 o i t  a e f  a d a N l . S a BoS . 7 4 6
5  2

四川大学硕 卜 学位论 文

3 A ga N S g S  i h  . loa iee s  e s g mn i ad 2 nis  ,nh  ,n C  A e ptc  c o w e o e itn  r N i DS g M l  h f t f  d n  ao n l f r
s dn g wh  a e  s enI i W d . 98 0 2 7     r to m i ad ba. a J e Si18, : - e lg  ei o f z n o y n n  e c,  2 8 8 d

3 nis  ,  h  ,  h  .  l a iees  o e  d o gr i tn 3  ga N  S g S S g C  Alo tc  c o s w es  e n i  A r N i n D i n M l p h f t f  e n m ao e f m
ad wh  h ke (i r  tu L I i W d  , 9 1 5 7      o C i pa  eaii m  . a J e Si 18, : - n g t f c r o Cc r n . n n  e c 9 2 8 8 e ) d .

3 aa ^STi t R Eft s ct s cs 3  a rm  csI i 4  dv , a i . co a oie p i o Epou s i, a  Y r h S f f  ad  e n  u ti p e n n p e s e e d
J c l 9 4 1 : -9      8 , 1016 E o. 1 19

3 ra i , a A  outn a i oEpti aeohr Sr g ad 5  it R Ydv  . pli dnmc f a rm  n ou pe .   T p h S a S P ao y s  u o u d p m  n n
Ept i i r m  eiran o  i W e Rs 18, : 9 3      r ai Rgl  li tbrn. d  . 97 7 2- 6 ua r m  u e n tg  u g e e,  2 2 2 ou p e n 3 Ydv  S Ti t R Te  pli s  tn l t s dns pt i 6 aa A , p h   ra i  S h P u tn o r s a e e lg E a r m . o ao f  p n d e i a u ou
aeohrm n E i r m s gle y hi dl l t r E l      u  ad . ai a r u t b y e au p n .  p  o dnpo  r u p e a d  t r  t  s o c , a  T
18 ,42 1 5        1 9 32 : - 0 2

3 Ti t R  Y dv S Ppli r u tn  Epti ae po m d  7 ra i  ,  a A  ou tn  li o ua rm  n hr a E ph S a .  ao e ao f  o u d o u n g rau : e o ou tn  syo i gn  l t  nt P t  l     Ef t  ppli dni,i nr e ad h ies . n Si i rm fc f  ao e ts l o pi t n i n i l o, g t y a
18 ,53 -0        9 2 :55 6

3 许云龙, 8 单欣审, 王宗玉, 紫茎泽兰的化学成分初报. 等. 云南植物研究, 8, : 5 8 1 8 0 7- 1 9 11 1

3 朱正方, 9 杨光忠, 紫茎泽兰化学成分的研究(. 等. ( 天然产物研究与开发, 9,3- 1 ) 1 7: 3 9 95 9
4 李蓉涛, 紫茎泽兰的化学成分, 0 等. 云南植物研究, 9, : 6 0 1 7 9 9- 0 9 11 2 4 7靖凯, 等, 1    余珍, 紫茎泽兰精油的香气成分及应用研究, 云南植物研究, 9, : 1 4 1 13 4- 4 9 14 4 4 汪禄 祥, 2 刘家 富, 束继红, 有害杂草 的微 量元 素分析. 一 等. ) 东微量元素科 、
学, 0,6 3 4     ( : -2 2 2 )9 0 9

4 和爱军浏 伦辉, 3 紫钱泽兰浸提液对儿种植物发芽的影响, 杂草学报, 9,3- 1 0: 3 9 458 4 陶 正钢 , 牛拉 惹 , 4 吉 刘勇 紫 茎泽 兰对 草地危 害及 防 除对 策 . 四川畜牧兽
医, 0 , () 52       2-6 2 22 6: 0 9

4 ' l B . e i tn io  fn e (u ti aeohr ) i y  5  S l M I sg i s  C t w d p o u dn ou t c i  O ui  n tao n r o e E a rm  p m o i n v t o xt
hr sA s V t .,  5 23 3        e r .18, : - os .  t e J 9 6 0 2 e u . 

4 A lB  I i ne  a ae s b o ai s i aa Coo we it 6 u A n d c o d g cu d  r nm w c tc r n  d  h d  .  e f  c m a e y  s h h  k  f e n  g t t e
Rcm n T ed  o f  S t l. t .  16, :     -w e r i oN w u Wa s u .  i 99 213 i od h e n  e o h  e A s JS .  3 6 g c

4 佘宇平, 7 梁家社, 何大愚. 紫茎泽兰防除方法的进展. 杂草学报, 8,3- 1 8: 4 9 29 0 4 u B  C e i l r o Ep ti aeohr ,  o w e.  Ga ld 8  l A hmc c t l  ua rm  n ou c fn  dTo rsn,  A d  .  a o o f  o u d p m r n o t e r p sa
17 ,:56        9 2 5 -0 6

四川大学硕士学位论文
4 9

B s H  H r o F  Bo g a cn o o Pm kn Ep t i aeohrm  es A a m t H ioi l t l  a aai  a r m  npou i ,  a o  . l c o r f  u ou d n H w ib a hi glf , rc ohr ul.  ou t n d s  h w e,  a a y e ri a l 尸ol cae ti I Ppli s i o t edt i  t t p d l  y d s  s I i .  ao t e f  u e  h e

l n t a seot f . oy15 4 2 f ad pr is  e  Eo g,  , : 4 y  h at f l cl 99 0 4 e  h y
5 0

Eam s ,  ntP  S dn a ea Te  co gl i ue b t glf r u D Bne   ,  e J  t  h ee f s  cd  h a l s J e H t a vn  l .  f t  a n f l d y  l  e  y

Poedc r ul o vgti g wh  r r u i pt tl  r o w e, r c oh e ts  eete  t ad  o cv o nao c fn  d c i a s i n  av r i o n e d te e i f  p o t e
A e ta  np o .  p l i, 9, 0 7- 1 gr i aeohr A . p.  1 2 2: 31 an d a n A Bo 9 1 1 8 .
5 1

S dn   ,  ntPH G lf m t n Co o w e,f r cs w e nr a t e J a B ne    a o ao i r n  d ie ne bten  m l a vn e .  l  i n  f r t e df e e o

sm se  gliu r pctct in  l n r u m n fr  io  lr t t u ad l  e  e o  k il e ad  i et o i Vr c t e e i n a ts e t y n e s  e e s  n  s s s o v q t uu S理 B t19, : 6 4 .斤J .9 1 7 4- 8 o, 5 2 2
5 2

Bne P  S dn   .a f mtn  Coo we, pti a npo m en t  ,  e J aG l o ao i r n  d ua rm eohr t H t a vn l  i n  f e E o u d r t u Sr gsnA e ta  n hr)y  Epti glf Poedca s i p n. . r i aeo o , t ua rm  l  rc i hr ul e ( y g an d p m b h e  ou a l y  c o e ts i
S n (ie : pta) ut . , 6 4 7- 0 t e p rT ede A s JB t18, : 3 8 o D ta r i .  . o 9 3 4 4 y .

5 3

郑征, 唐继武, 刘文耀. 泽兰实蝇对紫茎泽兰生长及光合作用影响的研究. 杂草学

报, 8,2- 1 9: 2 9 3 14
5 4

Sae 1  ,  ntPH Ef t gl g  as le  i n g  Co o w e t n  a B ne    fc o ai o smit prt i i r n  d d vn e . e f l n  i a a i n n  f n to t e (grt a  np om . f.  o.9 1 71810 A eai aeohr ) .  J t19, : - n d SA r B , 5 2 3

5 5

D d A  .  s aos   t  sm  a l o a aai ua rm od  P b r tn n  e e  gl y   Pm kn Ept i  O e i  o h t v l  f   f ,  ou
padl u l u sm.尸 o.a o a. m lo. 31:1 4 n o rc w in n oSc 15, 4- H i Et . o 9 5 4

5 6

D d        Bo g a cno o   ua rm  aeohr       od  A  P .  ioi l  otl  f Ept i    dnpou    l c   r   ou m  i n
Q enl d ut.c.9 1 3 5-6 ues n . sJ i16 , : 63 5 a A .S , 2 3

气 苦 ‘ J 亡 、 O U O



何大愚, 刘伦辉, 荆桂芬, 等泽兰实蝇的安全性试验. 生物防治 通报, 8,1 1 7 :3 9 3-

张智英, 何大愚. 魏艺, 泽兰实蝇生物学特性的初步研究物防治通报, 8,1 1 1 8 :- 9 403
H sl W  .  st o ie s  ou d  t b l i l  t l wes  a e e r  H T e  u f  c i dc f h io c cno o e i h t s  n t n a s r t e o e  g a o r f  d n r  o
Q enl d .nSc l, 6 :4 ues nJE to. d 16, 1 a . Q .9 5-

6 0

Sh e r  ioi l  oo w esI F t eWw dRc t  ac iW e cr d D Bo g acn l  e .  lc r  e. e A vn s  e o e . l c ot f d n eh r :  e n d e n  d Rs r .  e:  ,  hm yl h G s m  s 18, - e a hSr yC B Fr a R a Te  h P s 93 1 8 ec u v A a n o :  r a r ,  4 6 e e
Wio FA v w t b l i l  r o i etad  d  utl ad  tln l n  r i o h io c cn l  s s  w e iA saa  A saa s .  e f  o g a ot f c n e n  r i n u ri e e  o n
nw  i a c.  m N . C m ow ah tu o b l i l  t l tw . e g n T h C m.  1  m n el I it f  o c cnoO a a ue e o o o t n te  i g a o r . s o

61

E g n:  ,  hm  yl 99 1 1 nl dC B Fr a R a 18, - a A a n o ,  6 7
6 2

刘锡进, 郭英兰. 中国色链隔抱菌. 植物病理学报, 8, : 1 1 21 ! 5 9 2一
5  4

四川大学硕士学位论文

6 3  kni E    N w at es r o s N w  a n : s lncs  gl  Mcez e H C e p n d a e r i e Z l d Mieaeu f a .  l i e  d n  s c ea cl u n

pt gn 1 e Za n J p  r.  9 , : -     1 N w  l d r H rc c 1 0 8 5 3 a oes  h .  e a Co oi Si 9 16 7 .  6 郭光远, 杨宁容, 国内新病害一一紫茎泽兰叶斑病原菌的研究. 4 马俊, 等. 植物病理学
报, 9, : 5 5     1 4- 0 11 2 2 9 2

6 5  o iM  Te  o p n pt g s  b l il  dot l Su Ara  M rs  J h ue  l t h e f io c wecno i ot fc r .  s f  a o n o o g a e a r  r n  h  i.
A r .c . v 9 1 7 3- 5     s n.19 , : 9 5 giE o E ,  3 2 2 c

6 杨宇容, 6 郭光远. 飞机草绒袍菌对紫茎泽兰生长及生理影响的 研究. 杂草学报, 9,6 1 1 1 :1 9 5- 6 Wag  h pt tl her u r s.  m chrc e c fn  dTes 7  n FT e  nao Pa a li pA a  oe id f r o w e.  i .  o i f  o m aa  s y b i o o e r  t e hs
f Ma e D r .  n      r  g e Sde U i rt ad h R yl t i G r n. de, o r  s t e e y y n e i n T e  a B a c a es yny v sy  o on d S
Autai.9 5       9 srl 1 a

6 强 世界性恶性杂草 紫茎泽兰 8 胜. — 研究的历史 及现状, 植物学研究,9,(:6 7 1 86 )6- 2 9 143 3
6 张无敌, 9 江蕴华, 紫茎泽兰作饲料, 等卜 云南农业科技,)2 4 (:- 22 2 7 李小平, 紫茎泽兰提取液防治柑桔全爪瞒 田间药效试验, 0 等. 贵州省农业科
学, 9, : 5     34- 1 5 90 9 2

7 李云寿, 1 邹华英, T禄祥, 紫茎泽兰提取物对四种储粮害虫的杀虫活性[1 等, Z. 昆虫知 识, 0, 32 - 6     ( : 4 1 2 18 ) 1 2 0 3 7 何大愚, 2 粱家社. 紫茎泽兰防治 研究进展. 生态学进展 1 8 : 31 9 ,1 - 8 8 56 6 7 CY ,  e RR, aBkWo i Pr r ei aA ruu Rs r Cne 3  -D Pn y  . h l  rn a eoRg nl i lr e a h  t,  G ad . D i . t . k g  p f  o gc te e c e r
19 (6: 3      11 9 72 ) 一

7 侯太平, 4 刘世贵有 毒植物紫茎泽兰研究进展. 外畜 国 牧学一草原与牧草, 9,)- 1 946 9 ( :8 7 张其红, 5 候太平, 刘世贵, 紫茎泽兰中 等对 灭蚜活性物质的初步研究. 四川大学学报( 然 白 科学版)00 7 ) 8- 4      0, ( : 1 8 , 3 34 4 2 7 王一 J高平, 6 . 刘世贵, 等紫茎泽兰灭蚜活性物质的分离、 纯化及对棉蚜乙酞胆碱m酶的 影响.      高科技通讯, 0, : - 2 2 9 13 0 02 2 ” 王一丁, 刘世贵, 紫茎泽兰提取物对棉蚜的毒力及其灭蚜机理研究. 高平, 等. 植物保护学 报, 0, 43 - 0      ( : 7 4 2 2 9 )3 3 0 2 7 杨正东紫茎泽兰刨花板生产技术的开发与研究一 8 林业机械与木 I : 20, ( : - 设备, 2 0 )01 0 3 41 2 7 卿贵华, 9 王甸洪, 席俊林, 紫茎泽兰的危害 现状及其防治措施 西吕农业高等专科学校学
报, 0, 37 8      ( : -1 2 31 ) 8 0 7

四川大学硕士学位论文

在读期间发表和已接受论文目录
1 刘燕萍, 高平, 刘世贵, 紫茎泽兰等几种植物提取物对两种农业害瞒的毒 等. 力研究.    四川大学学报( 然科学 ,044( : 225 自 版)20,1l 2 -1 )1 2 高平, 刘燕萍, 刘世贵, 紫茎泽兰醇提物的毒理学研究. 等. 农药,待发表) ( . 3 潘为高, 刘燕萍, 刘世贵, 瑞香狼毒各组分杀蜻活性及组分间相互作用的 等. 研究.四川大学学 自    报( 然科学版)20,1l: 821 ,044( 2 -1 )0
4 江德洪, 刘燕萍, 刘世贵, 植物源绝育型灭鼠剂的微胶囊化剂型的研制. 等. 四 川大学学报( 然科学版)20,  )       自 ,044 ( . 13

四川大学硕十学位论文





本人声明,      所呈交的学位论文是在导师刘世贵教授的指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论 文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所
做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。

本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师刘世贵教授指导下取得      的,论文成果归四川大学所有,特此声明。

硕 士 生: 导 师:


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