当前位置:首页 >> 农林牧渔 >>

纤维素-刚果红培养基鉴定产纤维素酶真菌的机理研究


维普资讯 http://www.cqvip.com

第l 5卷第 2 期 
20 0 7年 6月 

纤  维  素  科  学  与  技  术 
J ur a  fCel o e Sce c  nd Te h ol y o n lo   l uls   in e a   c n og  

.5 NO 2 b11   . 

J n. o   u 2o 7

文章 编号:1 0 -4 520 )20 3 -6 0 48 0 (0 70 -0 90  

纤维素一刚果红培养基鉴定产纤维素酶真菌的机理研究 
张 超   , 李艳 宾 2 ,   张 磊  ,   张 琴2   魏世清 
(. 1 重庆 市农 业科学院 果树研究所 ,重庆 426 12 西南大学 资源与环境学 院,重庆 40 1 ) 020 .   076 
摘 要 :对产纤 维素酶真菌 F 6 和不产纤维 素酶 阴性对照菌毛霉在纤维 素一刚果  10

红培养基 中刚果 红染 料移动情况进行研究 ,结果表 明刚果红染料进入产纤维素 酶真  菌的机理为 ,产纤 维素酶真菌首先分解纤维素物质 为含有葡聚糖等结构 的多 聚糖类  物质 ,多 聚糖 与刚 果红形 成多聚糖 一刚果红复合 物 ,复合物不仅被吸 附在菌丝外 ,   而且能被进一步转运 吸收至菌丝 内部 。通过进一步 的降解 ,多聚糖被分解而加 以利 
用 ,而刚果红则被保 留在菌丝体 内,使菌落呈现红 色。所 以 ,纤维素 一刚果红培养 

基 可作为分离 、筛选纤维 素分解 真菌的特异性培养基 。  
关键词 :纤 维素 一刚果 红培养基 ;产纤 维素酶真菌 ;多 聚糖 ~刚果红复合物 :机理 
中图分类号 :Q 3 9  文献标识码:A  

纤维 素酶是一种具有广 阔应用前景 的酶类 。 良的纤维素分解菌是纤维素酶生产的关键  优 条件之一。目前 ,纤维 素分解菌 的分离方法有很多种 ,如 C -天青法 ( MC aue 、凉  MC C . i) z' 乙醇沉 淀法 (rcptt nw tc ie mao) 台盼 兰法 (rpnbu ) 刚果红 法 (o g  d   peii i  i  hlde n 1、 ao h l t a le 、 y cn or ) e 等… 。其 中,刚果红法是 目前 比较公认的一种有效分离方法 。Wo d - o[] 2 研究发现 ,刚果红与  4

结构 中具有D1 . . ., D 吡喃型葡萄糖的多糖有强烈相互作用 , .,D 葡聚糖及一些半纤维素  4 与DI . . 3 的乳糖一葡甘露糖聚合糖存在明显 的相互作用 。 为刚果红同纤维素水解后的多糖水解物形  认 成了一个颜色浓郁 的多聚糖 一刚果红复合物 ,刚果红对鉴定多糖水解物具有 明显的指示作  用 ,为纤维素一刚果红培养基分离、筛选纤维素分解菌提供了理论基础 。 et r Wo d 】 Ta e和 h o【 5   用纤维素 一刚果红固体培养基 , 对牛瘤 胃中的厌氧纤维素分解细菌进行计数和特征描述 , 认  为纤维素 一刚果红培养基能够快速 、 灵敏地检测出纤维素分解菌 。 e r k 等【 H ri s 6 dc   将其进一步  发展成为一个鉴别性培养基 , 用于测定土壤中纤维素分解菌的数量。叶姜瑜[ 7 1 则用纤维素 一   刚果红培养基测定土壤 中好 氧纤维素分解菌的数量, 以评估土壤肥力和不 同土壤之间肥力  用 的差异 , 认为根据透明圈能够清晰 、 准确地判定微生物是否具有产纤维素酶的能力 。 高榕等【 8   提出以透明圈直径与菌落直径 比值作为筛选产纤维素菌株酶活高低 的一个指标 , 更符合菌株  产酶的实际情况 ,并将此结论应用于实际生产中。   在笔者根据上述资料所做的实验中, 也观察到在纤维素 一刚果红 固体培养基上 , 纤维素 

被水解后 , 菌落周 围颜色变浅形成透 明圈, 颜色浓郁 的红色物质主要集 中在菌落生长区域(   图 l ;在纤维素 一刚果红液体培养基中,红色物质主要集 中在菌丝球 中, A) 溶液的红色显著变 
浅甚至无色 ( 1 图 B,图 5 。但是刚果红与纤维素类物质水解后 的多糖产物形成的红色多  A) 聚糖- ̄果红复合物究竟是附着在真菌菌丝表 面, J J 还是进入了菌丝 的内部 ?如果是进入菌丝 
收稿 日期 :2 0 —11  0 60 -0 +通讯联 系人 :张 磊 ,硕 士生导师 eh @s uc .   c o wa . c qn

基金项 目:重庆市 高等学校优秀青年骨干 教师资助计划 专项 资助课题  作者简介 :张 超 (9 2 ) 17 - ,男 ,助研 ,硕 士 ,主要从事应用环境微生 物方面的的研究 。  

维普资讯 http://www.cqvip.com

纤 维 素 科 学 与 技 术 

第 1 卷  5

内部, 其进入的机理如何 ?这些问题至今未见深入的研究报道 。 而对此类问题的研究有助于 

明确纤维素分解菌分解纤维素 的机理 , 更好地发挥纤维素 一刚果红培养基 的作用 。 本文研究  了产纤维素酶真菌 F 6 、不产纤维素酶 的阴性对照菌毛霉及其菌丝体在纤维素 一刚果红液  10
体培养基中对刚果红的反应 ,对上述问题进行 了探讨 。  

1 材料 与方 法 
11 菌 种  . F  P nc l mrg l u ,产纤维素酶真菌 ,本实验室保藏菌种 。 10( eilu   u sm) 6 i i u o  

毛霉 ( c r,不产纤维素酶 ,本实验室保藏菌种 。 Muo )  
1 培 养基  . 2 培养基 1纤维素一刚果红分离培养基 ) 】 MCN  .g ( H ) O  .g Mg O 。 2   ( 【: 9C —a 0 , 4S 4 0 , S 4 H0 2  N 2 2  7

O  ,KH O  0 , a 1 .g .g 2 P 4 .g N C  5 ,刚果红 0  , 5 1  0  ,g 琼脂 2 , 4 O 去离子水 10 m , H 7 。11 g 00 L p   0 2  ,
℃灭菌 3   i 。 0m n 

培养基 2( 液体富集培养基 )【 :C - a .g N 4 S 4 ,g l 川 MCN  0 ,(H ) O  4 ,Mg O " 2   3 , 2  2 1  S 4 H 0O     7 .g
KHE O4 ,  P   0 g,Ca 2 . g 2 CI O 3 ,F S . H2 5 mg,M n O4 16 mg,Z CI 17m g     e O47 0    S   .  n 2 .  ,CO 2 1       C1 . mg,   7

刚果红 0  ,去离子水 10  L H 7 。分装在 20m .g 2 00m ,p  . 0 5  L三角瓶中,每瓶 10 L 2 ℃ 0  ,1 1   m
灭 菌 3 i。 0m n 

培养基 3 :成分同培养基 2 ,不加刚果红 。   培养基 4 :刚果红 O  ,生理盐水 10  L H 7 。分装在 2 0m .g 2 00m ,p  . 0 5  L三角瓶 中,每瓶 
10m 0 L, 1 1 2 ℃灭 菌 3 0mi 。 n 

培养基 5 葡萄糖 2  ,N 4 5 4 .g Mg O . 2 .g KH O  0 , a t .g : .g ( H ) 0  0 , S 4 H 00  , 2 P 4 .g N C 5 , 0 2 2  7 5 1  0    刚果红 O  ,去离子水 10 m .g 4 0 0 L,p   0 2 ℃灭菌 3 i。 H 7 。11 . 0 n  m
1 培 养方 法  . 3 接种后液体培养基在 3  ̄ 5 r n 0 C,10 / i 旋转摇床振荡培养 ;固体培养基在 3  ̄生化培养  r a 0C 箱静 置 培养 。  
1 样 品处 理及 观 察  . 4

处理 I :在纤维素 一刚果红固体培养基和液体培养基 中分别接种 F 6 、毛霉,观察生  10 长情况及培养基颜色变化及转移方向 ( 1 图 A、1 、图 5 。 B A)   处理 I:将产纤维素酶真菌 F 6 I 10接种于培养基 2 0C 5 r n ,3  ̄、10 / i 振荡培养 1 天后 , r a . 5   在 1, 0 / i 离心 1  i,倾去上清液 。将菌丝球用无菌生理盐水充分悬浮,反复离 心洗  0 0 r n 0 r a 5 n m 涤5 次, 用解剖针挑开菌丝球 ,再用生理盐水反复充分冲洗 5 次 , ~6 使洗涤液清亮 、无色 。  
在显微镜下观察菌丝的颜色 ( 2 图 A、2 。 B)   处理I :将 产纤维素酶真菌 F 6 接种于培养基 3 I I 10 ,在 3 ℃、10r i 振荡培养 1 O 5 r n / a . 5天 

后 ( 3 ,停止振荡 。无菌操作 ,在 1, 0 m n 图 A) 0 0  i 离心 1  i,倾去上清液 ,将菌丝球用  0 d 5 n m 无菌生理盐水充分悬浮, 反复离心洗涤 5 , 次 尽可能洗去菌丝球 中残 留的营养物质。 将洗涤  好的菌丝球转人培养基 4中,3 ℃,10r i 旋转摇床振荡培养 1 天 ,然后 1, 0r i O 5  m n / . 5 0 0  r n 0 /   a 离心 1 m n 将菌丝球用无菌生理盐水充分悬浮, 5 i,   反复离心洗涤 5 , 次 用解剖针挑开菌丝球 ,   再用无菌生理盐水反复充分冲洗 5 ~6次,使洗涤液清亮 、无色。显微镜下观察菌丝的颜色 

维普资讯 http://www.cqvip.com

第2 期 



超等 :纤 维 素 -N果 红培 养基 鉴定 产 纤维 素酶 真 菌 的机理 研究 

4  1

( 3 图 B、3 。 C)  

处理Ⅳ:将产纤维素酶真菌 F 6 接种于培养基 3 10 ,在 3  ̄、10r i 振荡培养 1 天  0 C 5  m n / . 5 后停止振荡 。2  ̄静置 、 饥饿 ”培养 7天,尽可能使培养基 中的多糖类物质被消耗 ,以消  5 C “ 除多糖对刚果红的影响 。其余步骤与处理I 方法相同 。显微镜观察结果见图 4 I I A、4   B。 处理 V:将毛霉分别接种于培养基 2和培养基 5中,3  ̄ 5 / i 振荡培养 3 。 0C、10 r n m 天 
其余处理步骤与处理 I 同。观察结果见 图 5 I 相 A、5 、5 。 B C 

2 结果 与讨论 
21 培 养过 程 中颜 色变 化  .

在培养基 1的平板上,F 6 10浓郁 的红色主要集中在菌落生长部位 ,菌落周 围形成颜色  变浅 的透明圈 ( 1 。由于真菌 F 6 本身不产色素 ( 3 ,菌落生长部位 的红色只能  图 A) 10 图 A) 来 自于颜色变浅 的透 明圈部位原有的刚果红 , 即刚果红与多糖水解后产物形成的多聚糖 一刚  果红复合物 ,这与 Wo d o 等人的报道相一致 ,证 明真菌 F 6 是产纤维素酶微生物 。而毛霉  10 在培养基 1 上几乎完全不能生长 ,也没有透明圈形成 ,说 明毛霉是不产纤维素酶的。   在培养基 2 中, 10 F 6 培养 1 天后三角瓶 中形成大量直径 2   m的菌丝球 ( 1 ) . 5 ~3 m 图 B;   与不接种的培养基 2 溶液相比 ( 1 , 图 C) 接种处理的培养液颜色发生明显变化,溶液颜 色变  浅或者几乎为无色 ,菌丝球变为深红色 ( 1 、1 ) 图 B C 。联系 Wod 的理论 , o[   判断发生这种 

改变的原因可能为 : 纤维素类物质水解后形成大量含有p1 一 一 一, D 吡喃型葡萄糖 、3 , D 葡聚  4 [1 一 一 -3 糖及乳糖 一葡甘露糖聚合糖等结构的物质 , 与刚果红染料结合形成大量的红色多聚糖一刚果  红复合物,菌丝吸收多聚糖 一刚果红复合物, 使刚果红也伴随着多糖进入了菌丝体中, 所以 
液体培养基 的颜色变浅甚至无色。 而进入菌丝 中的多聚糖 一刚果红复合物进一步被真菌分解  为可 以利用 的小分子多糖而加以吸收, 无法被利用 的刚果红染料则沉积在菌丝 中; 或者进入  菌丝 的刚果红与真菌细胞 中的葡聚糖成分再次结合, 形成多聚糖一刚果红复合物 , 使刚果红  固定在细胞 内,让菌丝呈现红色 。  

A 
? 

1  5

乙 

图 1 处理 I 同培 养基 中颜色的变化  不

A .培养基 1 平板 ,箭头所指为透 明圈;B .培养基 2中 F 6 10形成 的菌丝球 ;C. 培养基 2 未接种 对照 

22 显微 镜 观 察  .

2 . 刚果红培养后茵丝 中颜色观察  .1 2 经过处理 I步骤后 ,观察菌丝 , I 发现经过洗涤的菌丝红色并未褪去 , 洗涤液清亮 ,滤纸  上也无红色物质残留。 挑开反复冲洗后的菌丝球在载玻片上 , 盖上盖玻片, 在低倍镜及油镜  下观察 , 发现红色物质处于菌丝的内部。 说明红色物质并不是吸附在 菌丝的表面,而是进入  了菌丝内部 ( 2 。这也印证了 “ .”的推测结果 ,即刚果红是伴随着菌体对多聚糖 一 图 B) 21  

维普资讯 http://www.cqvip.com

4  2

纤 维 素 科 学 与 技 术 

第 1 卷  5

刚果红复合物的吸收而进入真菌细胞 。  

■ ■ 
A  B 

图 2 处理 I 10显 微镜观察照片  I 6  F

A. 低倍镜 1 ×2 ;B 6 0 .油镜 1 ×10 6 0 

222 无 刚果 红培 养 茵 丝形 态观 察  ..

经过处理I 步骤后 , I I 观察菌丝 。 把经过离心洗涤 的菌丝球转入培养基 4 后, 菌丝球很快  变成鲜艳的红色。转入培养基 4中培养 1 天后 , . 5 显微镜油镜下观察,在菌丝球外周新生菌  丝 中没有红色物质 ( 3 ) 红色物质主要集 中在菌丝球 中心部分,一部分红色复合物进入  图 B, 了菌丝 ,另一部分红色复合物包裹在菌丝外,形成絮状包裹物 ( 3 。 图 C) 该现象 的可能原因  是 :在培养 1 天后 ,培养基 中营养充分 ,位于菌丝球中心的菌丝代谢旺盛 , . 5 处于稳定期前  后, 其纤维素酶分解纤维素形成的多种多糖附着在菌丝上或进入菌丝 , 离心洗涤时不能被洗 

下, 转入培养基 4 后与刚果红结合 , 使胞外附着的多糖 和菌丝着色。 而菌龄较短菌丝没有或  较少纤维素酶活性 ,所 以菌丝 内外无色 。 上述结果形象地验证 了 Wod等人的结论,即刚果  o 红与纤维素分解多糖有强烈的相互作用 , 同时说明纤维素酶 的产物产生后并未扩散开来 , 而  是与菌丝较紧密地结合在一起 。  

A 

一 ■ 
B  C 

图 3 处理l  10显微镜观察照 片 (6 0 ) l F6 I 1 ×10  A 培养基 3 . 中菌丝球 ;B 菌丝球外周菌丝 ;C 菌丝球 中心菌丝  . .

223 无 刚果 红培 养 茵 丝 “ .- 饥饿 ”后 形 态观 察 

经过处理 Ⅳ步骤后 ,刚果红 的红色被吸收到菌丝球 中,溶液变清亮 ;反复离心洗涤后 ,   洗涤液为无色 , 菌丝球仍然为红色 , 但在油镜下观察红色的菌丝球 , 发现完整 的菌丝内外均 
呈 现无 色 ( 4 。 图 A) 

那么经过处理Ⅳ步骤后的菌丝球为什么是红色的呢 ?由图 4 B可以看出,处理Ⅳ得到的  菌丝球呈现红色的部分是处于菌丝球 中心 的菌丝碎片。“ 饥饿 ”处理使菌丝球中心的老化菌  丝首先 自溶成菌丝碎片 , 刚果 红染料同细胞壁中残余 的含有甘露聚糖、 葡聚糖等结构 的物质  着色㈨, 而不能使没有纤维素分解多糖 的菌丝球外 围完整菌丝着色 。 此结果再次证明刚果红 
染料与多糖结合 的特异性 ,印证了 “ .”中对刚果红进入菌丝机理 的推测 。 21  

维普资讯 http://www.cqvip.com

第2 期 



超等:纤维素一刚果红培养基鉴定产纤维素酶真菌的机理研究

4  3

■ ■ 
A  B 

图 4 处理 I  10显微 镜观 察照片  V F6 A .完整 未着色菌丝 1  ̄10 .红色 物质集中 的菌丝碎 片 1 X 10 6 0 :B 6    0

22 .. 不 产 纤 维素 酶 的 阴性对 照 茵毛 霉  4

在培养基 2 培养 3 天后 ,毛霉也可以生长 , 但生长能力弱 , 形成少量的菌丝球 ,直径 1   ml左右 ( 5 ,与 同一培养基 中培养 1 天的 F 6 形成鲜明对比 ( 1 ;在培养基 5 i l 图 A) . 5 10 图 B)   培养 3 天后 ,毛霉生长较好 ,菌丝球数量多而且大 ,直径在 2   i 左右。在处理 V培养  ~3 ml l 过程 中, 毛霉两种处理的菌丝球均为红色; 反复离心 、 洗涤 5 次后 , 洗涤液仍呈淡淡的红色 ;   将菌丝球用解剖针挑开洗涤 5 次时 ,滤纸上有红色物质残 留,而在处理 I~Ⅳ中,产纤  ~6 I 维素酶真菌 F 6 没有发现该现象。由此推测红色刚果红是在形成菌丝球过程中被包裹在菌  10

丝球 中,而不是进入 了菌丝 的内部 , 所以在离心 、洗涤过程 中有红色物质渗出。显微镜观察  发现 , 毛霉菌丝 内部和菌丝周围都没有红色物质 , 处理 V两种培养基中毛霉菌丝均为无色 ( 图  5 、5 ,这与产纤维素酶菌株 F 6 B C) 10的显微镜照片图 2 、图 3 C形成鲜明的对照。  
根据 Wod的理论 , o 在有纤维素水解多糖存在时, 遇刚果红才能形成多聚糖一刚果红复  合物。在培养基 2中,由于毛霉不产纤维素酶, MCN 不能被水解形成多糖 , C -a 不能形成多  聚糖-N果红复合物 ; 而在培养基 5中也只有葡萄糖单糖 , 也不能形成多聚糖 -N果红复合  物 。因此 ,刚果红不能直接进入毛霉菌丝 的内部 , 图 5 5 如 B、 C所示 。 在处理 Ⅱ、处理I 中, I   I F 6 则相反 , 10 能够形成多聚糖 -N果红复合物 , 刚果红随复合物进入了菌丝 的内部 , 如图 2  、
图3   C。

● ■ ■ 
A  B   C 

图 5 处理 V不 产纤维素酶的毛霉 阴性对 照生长情况和显微镜照片  A.毛霉在培养基 2中的生长情况 :B .在培养基 2中生 长的毛霉 1 X 10 6   ,培养 基 2碳源为 CMC Na 0 . :   c .在培养基 5中生长 的毛霉 1 X10 6  0 ,培养 基 5碳源为葡萄糖 

3 结 论 
根据产纤维素酶 F 6 10真菌和不产纤维素酶的阴性对照菌毛霉实验结果表明,形成多聚  糖 一刚果红复合物是刚果红进入真菌菌丝 内部的必要条件 。   根据文献[2,虽然纤维素酶是外切酶 ,但作用于纤维二糖和纤维寡糖的纤维二糖水解  1】

维普资讯 http://www.cqvip.com

纤 维 素 科 学 与 技 术 

第 l 卷  5

酶 (B C H)大部分酶活仍然处于细胞壁上 ,这些密切结合在细胞壁上 的 C H酶可 以水解纤  B 维二糖和纤维寡糖为葡萄糖 , 并使葡萄糖被菌丝体迅速吸收, 减少葡萄糖流向外部环境。结  合 Wo d o 等的结论 , 可以推测 ,刚果红在培养产纤维素酶真菌的纤维素 一刚果红培养基 中可 

能的转移机理为: 具有纤维素酶活性的真菌首先分解纤维素类物质为含有葡聚糖等结构的多  糖类物质 , 多糖与刚果红发生特异性结合而形成多聚糖 ~刚果红复合物 , 复合物在细胞壁上  被 C H酶等分解成葡萄糖而被利用 ,解离出来的刚果红则沉积在菌丝 中,使菌丝体变为红  B 色,进而使菌落呈现红色。   这一机理有待于进一步用多糖分布、原子示踪等试验证明。  
参考 文献 :  
… 赵新 刚.洗 涤用碱性纤维素酶及其产生菌 的分离方法【 .微生物学通报, 9 9 2 ()6 —5 1   J 】 19 , 6 1: 36 .  
f1 2 Wo dPJ F l e . .neat no  me y s i  eel —lcn[ . ee . h m.18 ,5 9 29 6 o    uc r G It c o fo   e  t cra Bgu asJ C ra C e , 9 0 5 : 5 ?6 . , h R r i s d wh   ] 1  

【 Wod   T en rco f icde wt w t   l ls ste  ll e n  ra[ l as]Id 3 】 o  J h  t atn  r t ys i a ro b   bt t c l o   dc e  ̄ u n[.n. P . ie i o d e     h e s u e u i d e u s a e l - c J u g  
En . e P o . s De . 9 0 1 : 9 2 . g Ch m. r d Re . v ,1 8 , 9 1 — 3 

【】 Wo dPJS e icyi te n rc o f i c de w tp lschr e[ . ab h r e.18 ,5 2 12 7 4 o   pcf i n h it at no d et ys h oyac a dsJ C ro d. s 9 0 8 : 7 -8. . it e i r i i ] R ,   【】 T ah r   , o    . eo   n or —ly a c aieitrc o    n me t na dc aa t z t n o   5 e te  D Wo dP J Us f o g   po sc h r   ea t ni e u r i  n  h rce a o   f R c d e d n i n a o i r i cl l y c atr  o t   vn  m nJ A pi   d ni n n l co il y 18, 34: 7 —8. e uo t  c i f m  e o ie u e [ . p l a   vr met  rboo ,  2 4 ()7 77 0 l l i b e ar h b r ] d e nE o a Mi g 9  
【】 H n r k C W  o l  D, ge     . w s l   du fre u rt g c l ls —t i n   a t ai  6 e d i     D yeJ Hu l B A Ne  o i me im   n mea n  el o euiz g b c r   c   y d o i u li e i n s i [ . p l da dE vr n e tl co ilg , 9 5 6 ( ) 2 1 -0 9 o dJ A p e     n i m na Mirbo o y 1 9 , 15 : 0 62 1 . ] i n o    

【】 叶姜瑜 .一种纤维素分解菌 鉴别培养基 【 . 7 J 微生物学通 报, 9 7 2 ()2  2 2 】 19 , 44: 5 -5 . 1   【】 高榕 , 8 8   邓迎 达.高生产效率纤维素酶菌株初筛方法 的研究【 .纤维素科学与技术, 0 4 1 ()2 —4 J 】 2 0 , 23: 02 .   [】 张宇吴, 9 王颉,张伟,等.一种改进 的纤维素分解菌鉴别培养基 【 . J 纤维素科 学与技术, 04 】()3 .6 】 2 0 , 2】:33 .   【0 王 淑军,杨从 发,陈静 .固态 降解农 作物 秸杆 纤维 素菌 株分 离筛选 方法 的研 究 【 .淮 海工学 院学 报, 1】 J 】  
1 9 , ( ) 4 — 5  9 9 7 1: 24 .

【1 周德庆.微生物 教程【 .北京:高等教育 出版社, 9 3 5 .8 1】   M】 19 : 75 .   【2 高培基 ,许平.资源环境微生物技术 【 .北京:化学工业 出版 社, 0 4 2 . l】 M】 20: 3  

S u y o   e h n s   fCel l s - n o? d M e i m   t d   n M c a im o   l o e- u Co g ? Re   d u i  d n i c t g Cel l s — r d cn   n i n I e t a i   l a e p o u i g Fu g   i f n u
Z HANG C a     h o, L   a—i  I nbn, Y   Z NG e   HA Li  , Z ANG Qi , H   n    WE  h—ig I i n  S q

( . r i Re e c  n t u e Ch n q n   a e   fAg i u t r   ce c s Ch n q n   0 2 0 Ch n ; 1 F u t s a h I s t t, o g i g Ac d my o   rc lu a S i n e , o g l g 4 2 6 , i a    r i l

2 Colg  fReo re  dEn io me t nSo twe t iest, o g i g4 0  6 Ch n ) . l eo   s uc s e n a   v n n    uh s Unv ri Ch n qn  0 7  , ia   r i   y 1

Abs r t t ac :Tr nsto  o   o g —e  i c lu o e c g -e  me u wa  sud e     e l l s — a ii n f c n o r d n e l l s   on o r d di m  s t i d by c lu a e  

p o u i g f n i     n   o? l l e p o u i g mu o . s l  h we   a  e l l s   sf sl   r d cn   u g   6 a d n ? e l a ? r F1 0 c u s ? d cn   c r Re ut s o d t t l o e wa   r t s h c u i y
d c mpo e   d t r e   n o po y a c a i s b   el l s - o cn   u g ,whih po s s e   f eo s d a   u n d i t   l s c h rde   y c lu o e pr du ig f n i n c   s e sd o   g u a s tu t r ,t e   l s c h rd s bo e   o o r d t  f r po y a c a i e — on  r d lc n  sr c u e h n po y a c a i e   nd d c ng -e   o o m  l s c h rd s c go e   co mpl x e .Th   o l x wa   o   n y a h r d on t e s r a e ofh ph e e c mp e   s n to l   d e e     h   u f c     y a ,bu  lo a s b d i i e ta s   b or e  nsd  

t e , d d c mp s d t  eg u o e wh c   o l   e u i z d b  u g   a i . d t a , o g  e   h m a   e o o e   b   l c s , i h c u d b   t ie   y f n i sl An   t c n o r d n o l e y h d p st di   y h , o o e   ec l n  e . o c n —e   e i m  a   e u e   sas e i l d u e o i   h p a c l r d t   o o yr d S , o g r d m d u c b   s d a    p c a  e n h n me i m 
t  d n iy f n   o s s i   e l l e  o i e tf  u gip s e sng c lu a . s Ke   r :c lu o e c ng r d  di m;c lu a e p od i g u i y wo ds e l l s — o —e me u e l l s ? r ucn  f ng ;po y a c rd sc ng  r d l s c ha i e — o o e   c mp e me h im  o l x; c a s n


相关文章:
产纤维素酶真菌的分离和鉴定
产纤维素酶真菌的分离、 产纤维素酶真菌的分离、...(CMC培养基) 筛选培养基 培养基 :羧甲基纤维素钠...培养5-7d后用刚果红染色、NaCl 脱色后筛选菌落周围...
纤维素分解菌的分离和鉴定
由于在自然界中存在着大量产纤维素酶的细 菌和真菌,因而纤维素的生物降解主要...4、刚果红鉴定 配制刚果红培养基,将菌株点样与刚果红培养基上,置于培养箱培养...
上海市崇明县2016届高考生物一模试卷 Word版含解析
研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明...纤维素酶的活性 D.培养基中纤维素的含量 (4)研究...④目的基因的检测与鉴定. 农杆菌特点:易感染双子叶...
产纤维素酶菌种的筛选与优化
分解纤维素类物质的生物,小到 细菌、放线菌、真菌...筛选培养基上生长,利用筛选培养基分离产纤维素 酶的...二、实验原理刚果红能和纤维素结合,纤维素酶能水解...
(论文格式)纤维素降解菌的筛选及其发酵产酶条件研究(1)
的 两株菌,通过形态观察、生理生化试验初步鉴定菌种...把菌种初筛得到的菌落分别在刚果红纤维素培养基上...等.1 株产纤维素酶真菌的鉴定及其酶学性质初探[J]...
微生物综合实验
纤维素酶比活力较低、生 产周期长、纤维素酶复合...实验目的 一. 了解纤维素降解菌株选育的原理和筛选...利用含纤维素刚果红鉴别培养基从不 同分离源...
开题报告-产纤维素酶细菌的筛选
产纤维素酶细菌的筛选_教学案例/设计_教学研究_教育...纤维素分解菌的菌种鉴定 4,初步测得所筛分解菌的...37 ℃培养48 h ,用刚果 红染色10 min 后,再用...
实验一 产纤维素酶菌种的分离与初步鉴定
和饲料工业中的应用的纤维素酶主要是真菌纤维素酶。...本实验以羟甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基作为筛选...分离出能产纤 维素酶的菌种; 刚果红是一种酸性...
产纤维素酶霉菌的筛选.doc5
纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理:通过刚果红鉴定板来鉴 定产纤维素酶霉菌是...为了防止非目的菌株的生长,可 在真菌培养基中加入链霉素、青霉素等抗生素使之达到...
产纤维素酶细菌的分离和生物学性质研究(实验内容)
微生物是纤维素酶的主要来源, 其中主要有细 菌、放线菌和真菌,目前研究的最...1.2.3 刚果红染色鉴定法 将所分离的菌株活化后,点样接种于筛选培养基B平板...
更多相关标签:
纤维素刚果红培养基 | 刚果红纤维素钠培养基 | 纤维素酶培养基 | 刚果红培养基 | 刚果红培养基配方 | 刚果红纤维素筛选 | 纤维素酶 | 纤维素酶用途 |