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低温胁迫下三种冷季型草坪草的抗寒性变化


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安 徽 农 学 通 报 , n u A r SiB l 2 0 ,3 7 4 —4  A h i gi c u1 0 7 1 ( ):1 3   . . .

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低 温 胁 迫 下 三种 冷 季 型 草 坪 草 的 抗 寒 性 变 化 
池春 玉 

连永权  李 文君  丁国华 
( 1哈尔滨 师范 大学阿城 学院生命科 学系 , 黑龙江哈尔滨  100 ; 5 3 12黑龙 江畜牧兽 医职业学 院,黑龙江双城 10 1  5 1 ) 1



要: 本试验 采用短期( 4 2 h内) 温(  ) 低 5 胁迫处理 紫羊 茅、 优异 和抢 手股 等三种 冷季 型草坪草 , 以电导 法测定 叶 

片膜透性 、 茚三 酮比色法测定叶片脯氨酸含量 、 酮比 色法测 定可溶性 总糖含 量 , 蒽 分析 三项指 标的 变化规律 , 以此  并

来判断三种草坪草抗冷的 能力。结果表 明 , 5 低 温胁迫 下 , 坪草叶 片 内脯氨 酸含 量增加 , 加量 为 紫羊 茅 >优  在   草 增
异 > 手股 , 抢 可溶性糖 的含量增加 , 增加 量为抢手股 >优异 >紫羊 茅 , 透性 的增加 表现 为 紫羊茅 >优异 >抢 手股 , 膜  

综合评 价三种草坪草的抗冷性 能为抢 手股 >优异 >紫羊 茅。膜 透性 、 脯氨 酸和 可溶性糖含 量在 2 h的增加过 程上还  4
表现 出以下特点 , 即低 温处理 1 h内增加较 小 , 3 1— h明显增加 , 9 3— h增加 平缓 、 至有所 降低 , 2 h又 出现 显著的  甚 9— 4
增加 。  

关键词 : 草坪草 ; 脯氨 酸含量 ; 可溶性糖含量 ; 膜透性 ; 电导率 ; 抗冷性 
中 图分 类 号 ¥ 8  68 文献标识码 B   文章编号 10 7 3  07 0 4 — 3 0 7— 7 1 2 0 ) 7— 1 0  f

Ch l n   s t n e Ch n e o   r e T r g a s Va ite   n e   w  mp r t r   t e s , i i g Re i a c   a g   fTh e   u f r s   r e is u d r Lo Te e a u e S r s   l s

C i u y   L a   o g u n Li ej n DigGu h a (  i  cec  e at n ,H ri  oma U   h  Ch n u in Y n q a     na   W n   o u  1Lf Sin eD p r e me t abnN r l —  

nvr t, Habn 1 0 0 ; 2 elnj n  V ct n l o ee f A i a ub n r ad e r a  Sine  les y i ri ,   3   5 1   i gi g oai a H o a o  C l g o  nm l l  H sa dy n  V t i r cec , e ny S u nc e g 5 1 ) h agh n ,1 0 1  1
Ab t a t T i p p rr p r t a  te sn   n t r e v r t s o  u fr s ,C n y sr c : h s a e  e o t h tsr s i g o  h e   a i i   ft r a s i d ,Me ta d Ble c i     ee g i r   n   u   h p,u d r 5 d ge   o   n e    e r e lw

tmp rtr  uig2   o r ,me rn   e e blyo  ela e r  a ue  yc n u t i ,P0iec n e taino  e e eaue d rn  4h us mb a ep r a it fh  e v saemes rdb  o d ci t m i t v y r1  o c nrt  ft   n o h
la e   r  ee i e   y n n y r   oo i t c meh d.a d s l be s g rc n e to   e l a e   r  ee ie   y e t r n   e v sa e d t r n d b   i h d i c lr m n mer   t o i n   ou l  u a   o t n  f h  e v s a e d tr n d b   n h o e t m c l r t c me h d,r s e t e y h   e ut  h w t a  n e    e r e l w t mp r t r  x o u e h   r l e c ne to   o oi r   t o me i e p ci l .T e r s l s o   h tu d r 5 d g e   o  e e au e e p s r ,t e p oi   o tn   f v s n t rg a s la e  n r a e ,w ih i ce n   u t g u   i d > Me t> B u   h p;t e c n e t fs l b e s g ri  h  u - u fr s  e v si c e s s h c  n r me tp t n   p C n y i i r lec i h   o t n   o u l  u a n t e t r   o f ga s la e  n r a e ,t e i ce n   fB u   h p b i g t e g e t s ,s c n a   en   rt t a  fC n y b i g lwe t t e r s  e v sic e s s h  n r me t   l ec i   en  h   r ae t e o d r b i gMe i , h t   i d   e n   o y o o s; h   me r n   e e b l y o   et rga sa s n r a e .w ih i c e n  h wig C n y >Me t>Ble c i .T e c i ig r — mb a e p r a i t  f h  u fr s   loi c e s s h c  n r me ts o n   i d m i t i r u   h p h   h l n  e  l ssa c   f h  h e   a it so   rg a si  v r le au t d i n e o   e t r e v rei   f u f s  so e a   v a e .wh c   x r s i g B u   h p >Me t >C n y t t e t r l l ihe pe s   lec i n i r i d ,T e a a y i o   h   n l ss f   me r n   e e b l y h   o tn  f b t  ou l s g   n   rln   h r ce it al  n ia e   h tt e i c e s   ft e mb a e p r a i t ,t e c n e t o   oh s l b e u a a d p oi e c a a trsi l i d c t s t a  h   n r a e o  h   m i   r c y t r e i d x sa e ic n p c o s w ti      o ra o  e e a u e e p s r ,a ec n p c o sf m     o rt  r   o r n   h e  n e e    n o s i u u   i n 1 t u   slw t mp r t r  x o u e r  o s i u u  r r h sh o 1 t u   3 d h u ,a d sh o a e g n l fo   r   o rt  t  o r e e   n t a   fd c e s . T e i c e s   o s i u u l  r s n s a an f m  t   o r t  r  e t   r m 3 d h u   9 h h u   v n i se d o   e r a e e o h  n ra e c n p c o s p e e t g i  o 9 h h u  o y   r
2 h  o . 4t h ur  

Ke   r s T rga s p o ie;s l b e c r o y r t y wo d : u f s ; r l r n o u l  a b h d ae;me r n   e e b l y c n u t i mb a e p r a i t ; o d c i t m i v y;c i i g r ssa c   h l n  e itn e l

我 国北方 地 区夏 季 干 旱 、 平 均 气 温低 , 成 冷 季 型  年 造 草 坪草 常遭受 低温 和干 旱 的双重胁 迫  , 因此 草 坪草 的抗 

本 文报道 低温 胁 迫下 三种 冷季 型草 坪草 的 电导率 、 脯 
氨 酸含量 和可 溶性 糖含 量 的变化 , 而综 合评 价 三种 草 坪  从 草 的抗冷 性能 。另 外低 温 胁 迫 的文 献 报 道 多数 是 关 于 不  同低 温 的影 响 研 究 的 , 文 所 研 究 的是 低 温 胁 迫 草 坪 草  本

寒、 抗旱的研究备受关注。低温等外界伤害首先作用于植 
物 的细胞 膜上 , 透性 的增 加往 往早 于其 他危 害症 状 的 出 膜   现  。膜上类 脂在 临界 低 温 下 发 生 由液 晶相 向凝胶 相转 
变, 膜脂 相 变引 发两个 主要 继 后 反 应 , 即膜 透 性 增 大 和膜 

2 h内膜 透 性 、 氨酸 含 量 和 可 溶 性糖 含量 的变 化 , 4 脯 尚未 
见该 方 面的报 道 。  

结 合酶 活化能 增高 , 中 , 物 膜透 性 改 变 的 鉴 定方 法 简  其 生 单 , 简 便 , 为 目前 鉴 定 植 物 抗 逆 性 的 主 要 指 标 之  操作 成
_ 。J 2


1 材料 与方 法 
11 材 料 . 试 验 选 择 草 地 早 熟 禾 属 优 异 ( o  rtni P ap aes  s



可溶 性糖作 为 渗透 保 护 物质 , 可提 高 细胞 液 的浓 

C.M r) 抢 手股 ( o rt s V l  h ) 紫 羊茅  V et 、 i P a a niC.Bu ci 和 p e s e p
属 的紫 羊茅 ( etc u r  V id ) 种 常 见 的冷 季型  F s arbaC .Cn y 三 u 草 坪草 品 种 。在 试 验 前 一 个 月 , 温 1  左 右 播 种 , 室 5 播 

度 , 细胞 持水 力及 组 织 中非 结 冰水 , 而 降低 细胞 质  增加 从 的冰点 。糖还 可 以促 进 A A 的积 累 , B 间接 诱 导 蛋 白质 的 

合成, 从而提高植物的抗冷能力H 。脯氨酸也是植物体   
内重要 的渗透 调节物 质 , 量 与植物 抗逆 性 之 间存在 相  其含 关性, 常作 为衡量 植物抗 逆 性 的生理 指标  。  

种时选择 p H值 为6 5的沙土较为适宜 , . 并在使用前用沸 
水 对 土 壤 进 行 杀 菌 。生 长 初 期 用 聚 乙烯 薄 膜 覆 盖 播 种 

床 。约 5 7 — d紫 羊 茅 先 萌 发 , 手 股 和 优 异 陆 续 萌 发 。 抢  

基金项 目: 黑龙江省 自然基金项 目资助( 2 0 2 , C 0 56) 黑龙江省教育厅科研项 目( 编号 :0 5 0 2  15 5 3 ) 作者简介 : 池春玉( 94一) 女 , , 16 , 汉 黑龙江省双城市人 , 副教授 , 本科 , 主要从事生物学研究 与教学工作 。 通讯作 者。    
收 稿 日期 :0 7—0 2   20 2— 0

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待 苗 长到 1c 5 m高 左 右 时 , 行 胁 迫 处 理 , 理 采 用 5   进 处 ℃ 的低 温 。   12 方 法 . 脯氨 酸 含量 测 定采 用 磺 基 水杨 酸 提 取 , 茚三  酮 比色 法  。 具 体 步 骤 如 下 : 个 处 理 组 随 机 取 叶 片  每

2 2 可 溶 性 糖 含 量 变 化  植 物 体 内可 溶 性 糖 包 括 还  . 原 性糖 如 葡 萄 糖 、 糖 等 和 非 还 原 性 糖 如 蔗 糖 等 。本  果
试 验 测定 的 是草 坪 草 体 内 的可 溶 性 总 糖 含 量 。 图 2显 

示, 低温 胁迫处理后 , 抢手股 和优异表 现可溶性糖 含量 
逐 渐 升高 , 处 理 3 在 h时 达 到 最 高 , 后 下 降 , 9 随 在 h又 
继 续 增 高 , 胁 迫 2 h时 含 量 增 高 了 1 3 和 1 0 。 到 4 9% 6%  

05, 3 . g用 %磺基水杨酸研磨提取( 终体积为 5 L , m ) 匀浆 
转入 玻 璃 离 心 管 , 水 浴 1mn 冷却 后 30 rmn离 心  沸 0 i, 00 i / 1mn 取 上 清 2 L 加 入 2 L 水 、 2 L 冰 乙 酸 和  0 i, m , m 1m 4 L .% 的茚三 酮 , m 25 沸水浴 6mn 冷却 加入 4 L甲苯 , 0 i, m 静  置后取 甲苯相 测定 0 50值 。 D2   可 溶性糖 含量 测定 参 照 张 志 良的蒽 酮 比色 法  稍加 
改动 。  

紫羊茅 的表现 稍有 不 同, 即低温 处理 后可 溶性 糖含 量 
没有上升 , 而下 降, 处理 6 反 在 h时下 降 了 1 . % , 迫  25 胁

2 h后 , 4 含量增加 了 8 . % , 远低于其他 两个 品种 的  75 远
增加量 。  
+ 紫羊茅+ 优异 + 抢 手 股 

细胞 膜透 性采 用 电导法  , 电解 质渗 透率 表示 。将  J以 室 温对 照和处 理完毕 的叶 片 剪 成 03— .c 的小 段 , . 05m 每  个 注射器 中放 人 03 叶 片 , 加 入 1m 蒸 馏水 , 住 注  .g 再 0l 堵 射器 进行抽 气 , 叶片呈 半透 明状 , 部沉 入 水底 , 至 并全 然后  注入 试管 中 , 并将 试管放 置室 温 下保 持 1 , 间要 多次 摇  h其 动试 管 。待 充 分 摇 匀 , D S一1C型 电 导 仪 测 电导 值  用 D 1 S, 1将各 试管 盖 塞封 口, 沸水 浴 中 1mn 以杀 死植 物 组  置 0 i, 织 。取 出试 管 后 用 自来 水 冷 却 至 室 温 , 在室 温 下 平 衡  并 1mn摇 匀 测其终 电导值 s , 0 i, 2 最后 设蒸 馏 水 为空 白, 0 狈 空  白电导 值 。以相对 电 导率 的大 小 表示 细 胞 膜受 伤 害 的程  度。 可根据 以下公 式计 算 :   相对 电导率 ( ) S 空 白电 导率 ) (2一空 白电  L =(1一 /s 导率)  
0  h 1    h 3h   6h   9h   24h   低温 胁 迫 处理 时 间 H   )

图 2 低 温胁 迫下 三种草坪草 内源可溶性糖含量变化 

图 2 显示 , 种草 坪草 最初体 内( 还 三 低温 处理 前 ) 可溶  性 糖 的 含 量 比 较 相 近 , 互 间 含 量 差 异 的 平 均 值 为  相

1.% , 75 处理 2 h 4 后差异的平均值达到 了4 .%。说明低  58
温胁 迫处 理对 三种 草坪 草 可 溶性 糖 含 量 的影 响程 度 是 有 
差异 的 。  

2 结果 与分 析 
21 脯 氨酸 含量 变化 . 脯氨 酸作 为植 物 渗透 作用 最 为有 

23 电导率 的变化 .

低 温 、 温 以及 干 旱 等逆 境 对 植 物  高

效的物质 , 无论是干旱、 冰冻 、 高温 、 低温和盐渍 , 还是其他 
的逆境 因素都可 造 成植 物 体 内的脯 氨 酸 的 大量 积 累 。图  1 显示低 温处 理 后 三种 草 坪 草 的脯 氨 酸 含 量都 有 较 大 的  增加 , 加 的趋 势 和 增 加 量 比较 相 近 , 表 现 出在胁 迫 1 增 都  


体 伤 害首先 表现 在膜 上 , 即破 坏 膜 的完 整 性 , 引起 细 胞 内 

容物外漏。目前细胞电导率 已成为衡量植 物受逆境伤害 
程 度 的常用 指标 。本 试 验采 用 相 对 电导率 表示 细 胞 受 伤  害的程 度 , 3显 示 , 种 草 坪草 在 低 温胁 迫 3 图 三 h时 , 胞  细 受 伤 害程度 最大 , 后 降低 , 9— 4 之 在 2 h表现 重新 上 升 。无 

3 h有一个 快速 的增 加 , 后增 加 缓 慢 甚 至停 止 , 在 6 之 并   9 h又有所 下 降 , 9— 4 时 含 量重 新 快速 上 升 。胁 迫  在 2h



论处理 3 h还是 2 h 细胞 的电导率值均是优异) 4, 抢手股 )  
紫羊 茅 , 与处 理前 相 比较 , 但 电导率 的增 加 量 分 别 为优 异 

2h后脯 氨酸 的增加 量 分 别是 优 异 98 , 手 股 63 , 4 0% 抢 2%   紫羊茅 14 % , 20 即紫羊 茅 > 异 > 优 抢手股 。   另 外 , 1 显 示 , 种 草 坪草 处 理前 脯 氨酸 含 量 差  图 还 三 异 的平均 值为 6. % , 理 2h后 减小 为 2 % , 明低 温  08 处 4 2 说 胁 迫对三 种草 坪草脯 氨酸 含量 的影 响结果 比较 一致 , 都达  到 了较高 的含量 。  
+ 优异 + 紫 羊茅 + 抢手 股 

2 . %、 3 8 抢手股 37 .%和紫羊茅 3 .% , 25 表现为紫羊茅) 优  异) 抢手股。图 3还显示 , 三种草坪草低温处理前细胞 电  
导 率相互 间差 异 的平均 值为 1.% , 理 2h 96 处 4 后差 异 的平  均值 为 1. % 。说 明低 温 胁 迫处 理 对 三种 草 坪 草 电导 率  42
的影 响程 度 比较 接 近 。  
+ 优异 + 抢 手股 + 紫 羊 茅 

04 . 
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6  h

9  h

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低温处理持续时问 () h 

图 1 低温胁迫下三种草坪草内源脯 氨酸含量变化 

图 3 低温胁迫下三种草坪草电导率变化 

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4  3

3 讨 论 
本 试验 测定 结果 表明 , 温处 理均 引起 三种 草 坪草 的  低 膜透性 、 溶性 糖含 量和脯 氨 酸含量 发生 变 化 。一些 研 究  可

参考 文献 
[] 1 卢少云 , 郭振飞( 0 3 . 20 ) 草坪 草逆境生 理研究进 展 . 地学报 , 草  
( 2 :3— O 1)l 2 

指 出膜 透性 增加 越多 , 明 细胞 受 损 越 严 重 , 说 即植 物 的抗  逆性越 差 ¨ 可 溶 性 糖 作 为植 物 体 内一 种 渗 透 调 节 物   。 质 , 有提 高植 物保水 力 的作用 , 具 是一 种抗 性 物质 , 含 量  其 的增加 可 以提 高 植 物抗 逆性  。 王世 珍 等  测 定 4   ℃ 下高羊茅 叶片 内可溶性 糖类 和脯 氨酸 含量 逐渐 升 高 , 粉  淀 含量缓慢 降低 , 总可 溶性 糖 与淀 粉 的 比值 明显 增 加 , 相应  部位 的抗 冻性 显著 增 强 。可 溶 性 糖类 含 量 的增 加 是造 成 
高羊 茅抗 冻性 增强 的重 要 因 素 。脯 氨酸 也 是 植 物 体 内 的 


[] 2 王国莉 , 郭振飞( 0 3 . 20 ) 植物耐冷性分子机理的研究进展 . 植物 
学通 报 , 0 6) 6 1— 7   2 ( : 7 69

[] 3 王荣富 (9 7 . 18 ) 植物抗寒指标 的种类 及其应用 .植物生理 学通 
讯 ,3 :9— 5 ( )4 5 .  

[ ] r J , a g   , l o      , a e F ( 9 3 . r z go   4 Fy   L n  S Ci n GP M r r   19 ) Fe i t —  D N t f R i  P en l
ea c   n  c r o y r t c n e t o   o — e e au — c l t d r n e a d a b h d a e o t n   f lw -tmp r t r -a ci e   e ma a d n n c l td c n i e g a s Crp S i n   o a c i e   e t d r s . o   c ..3 1 5 ma p 3: 0 1—1 5 . 0 5 

[ ] u aLV Wi n   F   (9 6 .Lw— e p r u  r s l 5 G s    , l   W, uP 19 ) o t e t s s t ? t eR m ar t     e e o
ea c r n e:t e r l     b csc a i h   e o a s ii  cd,s g r ,a d h a —sa l  r ti s o f u as n   e t tbep en. o  

种 渗透 调节 物 质  , 多 数 试 验 证 实植 物脯 氨 酸含 量  但

Hot i 3 1 :9— 5 r c, 1( ) 3 4   s

增加 程度 与植 物 的抗 逆性 呈 负相关 

, 即逆 境下 脯氨 酸 

[] 6 李美如 , 刘鸿先 , 以柔 ( 9 5 . 物细胞 中的抗寒 物质及其 与 王 19 ) 植  
植 物 抗 冷 性 的关 系 .植 物 生 理 学 通 讯 ,l5 :2 3 4 3( )3 8— 3 .  

增加 越多 , 物 的抗 逆 性 越 低 。综 合 本试 验 的钡 定 结 果 , 植 0   可 以获知 三种 草坪 草 的抗 冷 能力 依 次 为 抢 手股 > 异 > 优   紫羊 茅 。     ’
本试 验还 分 析 了三 种 草 坪 草 的膜 透 性 、 溶 性 糖 和  可

[] 7 张殿忠 , 汪沛洪 , 贤( 90 . 定小麦 叶片游离 脯氨酸含 量  赵会 19 ) 测
的方 法 .植 物 生 理 学 通 讯 ,( ):2—6 . 4 6 5  

[] 8 张志 良, 瞿伟菁 (0 4 . 物生理 学实验指 导 . 三版 . 京 : 20 ) 植 第 北  
高等教育出版社 ,13—16 7 7 

脯氨 酸含 量 变化 与低 温处 理 时间 之 间 的相 关性 。低 温 处 
理1 h内变 化很 小 ,h一3 1 h是 一 个 明显 变 化 期 , h一6   3 h一

[] 9 白宝璋 , 汤学军 (9 3 . 19 ) 植物生 理学测 试技术 .北京 : 中国科学 
技 术 出 版 社 ,3—17 7 5.  

9 h变化 比较 平 缓 , 至 有 所 降低 , 在 9 2 h又 出 现  甚 而 h一 4 较大 的增 加 。这 样 的变 化特 点 可 以解 释 为植 物 在 低 温 胁  迫后 1 一 h 一个 快 速反 应 时期 , 时 细胞 膜 损 害 较 快  h 3是 此 也较 严重 , 同时低 温促 进 淀 粉 转 化 为 可 溶 性 糖 。 在 3   h一 9 h阶段 , 细胞 膜 的 自我修 复 启 动 , 膜 透 性 不 再 增 加 , 使 同  时细 胞代 谢 增强 , 可溶 性 糖 消耗 过 多 , 量反 而下 降 。当  含 低 温 处理 持续 至 9 2 h时 , 物 体 细 胞 膜 的 自我 修 复  h一 4 植 能力难 以维持 导致 膜 透 性 继 续 增 高 , 胞 内部 可 溶 性 糖  细 合 成加 强 , 量 有 较 大 的 上 升 。赵 福庚 等  证 实 , 麦  含 大 受 盐胁 迫 后 脯 氨 酸 有 两 条 合 成 途 径 , 胁 迫 8 在 h之 前 以  Gu 成途 径 为主 ,h之后 O n 径 则 占主 导 地位 , 种  l合 8 r途 这
合 成过 程 的两 步 形式 与 本试 验脯 氨 酸积 累 的阶 段性 表现 

[ O 魏臻武 , 1] 王槐三( 9 7 . 19 ) 两种 草坪草抗 寒特性 及其超 氧化物酶 
的作用 .草业科学 ,5 2 :2— 6 1 ( )6 6 .  

[ 1 王世珍 , 1] 蔡庆生 , 孙菊华 , 崔照平 ( 0 3 . 2 0 ) 冷锻 炼下高羊 茅抗冻 
性 的变化与碳水化合物和脯氨酸含量 的关 系 .南京农业 大学学  报 ,6 3 :O—l  2 ( )l 3

[ 2 D l ny J e aD ( 9 3 .P l eb sn e s n  S 1 ] e u e A, a   .V r   .P 19 ) r i  i yt s  d O   m o n o h ia ?
mo g l o npat h  l t ora,( )2 5— 2 , e r ua ni l .T ePa   unl4 2 :1 2 3 i f   n n J  

[3 H r PD C s W A 19 ) e bl i p ct n o s e — n 1 ] a    , r s e e (9 7 .M t o c m la o s  r s i   a i i i f ts ?
d c   a i e a c mu ai n i  ln s P a tGr wt   g lto u e prln   c u lt  n p a t. l n   o h Re u a n,21: d o i   7 9一l 2  o.

[4 卢少 云, 1] 陈斯平 , 陈斯曼 , 潇, 梁 郭振飞( 03 . 20 ) 暖季型草坪草脯  氨 酸含量 和抗 氧化酶活性对 干旱的反应 .园艺学报 , ( ) 3 3 3 3 :0  O


3 6 O 

可 谓有 相似 之 处 , 示 我们 草 坪 草 在 受 低 温 胁 迫 后 脯 氨  提 酸 的积 累可 能 存 在 阶 段 性 的合 成 过 程 和 不 同 的合 成 途 
径。  

[5 赵福庚 , 1] 刘友 良(0 o .大麦幼苗 多胺合 成 比脯 氨酸合成对 盐  2o )
胁迫更敏感 .植物生理学报 ,6( :4 2 4)3 3—3   4

( 琪琪编 , 凤校 ) 张 魏  

( 接4 上 0页 ) 而且 还 要 求 采 取 合 适 的 化 冻 方 法 , 避 免  以 在 化 冻 过 程 中产 生 细 胞 内 的 次 生 结 冰 , 防 止 在 化 冻  并 吸 水 过 程 中 水 的 渗 透 冲 击 对 细 胞 膜 体 系 的 破 坏 。 为 
此 , 般 采 用 快 速 的 化 冻 方 法 。通 常 做 法 是 将 液 氮 保  一

参考文献 
[] 1 卢新雄 , 陈晓玲. 国作物种质 资源保 存与研究进 展 [ ] 中国农  我 J.
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[] 2 石思信 , 田珥 . 超低 温 ( l6 ) 一 9 ℃ 中保 存一 年的黑 麦草花 粉生 活  
力 [ ] 植物生理学报 ,9 9 1 ( :9 J. 18 ,5 4)3 3—3 6 9 

存 后 的材 料 在 3 7—4 ℃ 的 温 水 浴 中 化 冻 ( 有 人 认 为  5 也 快 速 化 冻 的温 度 是 在 3 4 ℃ 这 一 范 围 内 ) 一 旦 冰 完  0— 0 , 全 融化 以后 , 即 移 开 样 品 以 防 止 热 损 伤 和 高 温 下 保  立 护 剂 的毒 害 , 因为 超 低 温 冰 冻 材 料 化 冻 时 , 次 结 冰 的  再 危 险 温度 区 大 约 是 一 0 一1 o 5一 0C。所 以从 理 论 上 说 ,   可借 助迅 速 的 化 冻 速 度 通 过 此 温 度 区 , 而 避 免 细 胞  从 内 次 生结 冰 对 细 胞 的致 死 性 破 坏 。 值 得 注 意 的 是 如 果  材 料使 用 了冰 冻 保 护 剂 , 冻 后 一 般 需 要 洗 涤 , 清 除  解 以
保 护 剂 的毒 害 。  

[] 3 石思信 , 张志峨 , 肖建平. 玉米花 粉超 低温 长期保存 后其 后代 的   染色体观察 [ ] 作物 品种 资源 , 9 , ( ) 4 — 8 J. 1 52 4 : 4   9 6 [] 4 石思信 , 张志峨 , 肖建平 . 超低 温 ( 9 ℃) 一16 保存 l 年后小 麦种  1 子的活力 [] 中国农业科学 , 9 , ( ) l 一 5 J. 1 4 1 5 :2 l  9 0 [] 5 石思信. 米花 粉超 低温 保存 的研 究 [ ] 玉 J .作 物学报 ,96 2  19 , 2
( )4 9— 1  4 :0 4 5

[ ] odBV, ako    .B t ho g adm t d    ne ao  6 u y   J s M T i e nl y   e os c s v i   c n oc o   n h o o r tn f o  at ee c e ucsJ . i ehl 19 , 3( ) 2 7 26 f l   n t  s r [ ] Bo co, 9 1 4 1 : 4 — 5  p ng i ro e t [ ] w n m  .S r e na  r i s vn a a enf - s v g 7 L aa i Y t a    nO g c o e t    a  r r e i   og i n a   l   s m op rn e v b i o e  a [ ] t nT cnl y 9 2 4 ( ) 17— i it p l n i J .S i e o g ,1 , 7 4 : 3   al y l g n r a  h o 7

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( 莉编 , 袁 魏凤 校)  


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