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岛津LC2010AC型高效液相色谱仪基本操作规程(sop)


岛津 LC2010AC 型高效液相色谱仪基本操作规程(sop)点击次数:51 发布时间:2012-7-19 1 仪器组成和开机 1.1 本仪器由 Class-VP 工作站、在线脱线机、输液泵、自动进样器、柱温箱和检测器等部 件组成。各部分的操作均可以由工作站或液晶面板控制完成。 1.2 分别打开计算机、LC-2010A/C 高效液相色谱仪的电源开关。 1.3 仪器约需 3min

时间完成自检过程,此时左键双击“Class-VP”快捷方式图标后,左键 双击“Instrument l”可以进项链入联机状态;左键双击“Offline Processing”可以进入脱机 状态(联机状态下可以实现计算机对仪器的操纵控制以及在线据的采集和分析;脱机状态下 可以实现已采集数据的处理和再分析)。 1.4 在联机状态下,计算机屏幕显示 Class-VP 6.12 工作站画面,此时得用工具栏上的“Auto Purge”按钮对仪器管路进行彻底的冲洗并排除可以能存在的气泡, “Auto Purge”功能将会 按照操作者的设置自动进行和停止(本机为四元低压梯度系统,分为 A、B、C、D、R 五个流 路并配有五路在线脱气机。其中 R 流路为自动进样器的清洗流路。在进行 Purge 时,可以以 只选择所需要的流路进行 Purge,但第 R 路是必选项)。 2 分析方法的建立、存储和调用 2.1 分析方法的建立 2 .1.1 左键单击菜单栏中的“File→Method→New”以便建立一种新方法。 2. 2 此时 1. “LC Setup Assistant-System” 对话框将会显示当前的分析方法名为 Untitled.met, 左键单击“Simple Setting”可以进行常规分析条件的设定;左键单击“Method→Instrument Setup”可以进行复项链杂分析条件的设定。成都雅源科技专业提供国产实验设备,进口实 验设备(岛津、安捷伦等)主要产品:气相色谱仪、液相色谱仪、色谱柱、气相色谱柱、液相 色谱柱、样品瓶、标准品、净化工作台、旋光仪、熔点仪、色谱纯试剂、纯水机、酒色谱、 柱温箱、水分测定仪、分析天平、紫外可见分光光度计、离心机、旋转蒸发仪、超声波清洗 机、定氮仪、氮吹仪、折光仪、酸度计、电导率仪、农残速测仪、生物安全柜、恒温湿箱、 真空干燥箱、药物稳定性试验箱、培养箱、干燥箱、马弗炉、原子吸收等。 2. 3 使用 1. “Simple Setting” 进行常规分析条件的设定在 Mode 中选择 Low Prerrure Gradient; 在 Pump 框中设定流速、各流路(通道)的比例、最大最小大力限;在“Oven”框中设定柱温; 确保“Detector A”复选项被选中后,在其中设定所需的检测波长;在“Time Program”中 设定液相停止时间以及采集停止时间(一般情况下二者一致。可以选择“LC Stop”时间后, 左键单击“Apply to All Aequisition Time”按钮使二者一致)。左键单击“Download”按钮, 使所设定的分析条件成为当前分析方法(每当完成一种新的设定后,一般均应执行此步骤, 后不赘述)。此时,若仪器的系统控制器没有打开,可以左键单击工具栏上的“Instrument On/Off”按钮,仪器将会按照所设定的条件开始进行。 2.1.4 使用“Method”→“Instrument Setup”进行复杂分析条件的设定该部分中可以对泵、 柱温、检测器、系统控制器、时间程序等组件或程序进行更进一步的设定和控制。如:设定 检测器的灵敏度、D2 灯的开关、梯度洗脱程序的设定等。 2.1.5 峰/组表(Peak/Group Tables)的设定 2.1.5.1 打开校准用标准物质的色谱文件,点击积分事件工具栏中的“Define Peaks”按 钮,按状态栏的提示进行操作,将会要校准的峰(此处即为校准用标准物质峰)的保留时间及 保留时间窗口添加到峰表中。成都雅源科技专业提供国产实验设备,进口实验设备(岛津、 安捷伦等)主要产品:气相色谱仪、液相色谱仪、色谱柱、气相色谱柱、液相色谱柱、样品

瓶、标准品、净化工作台、旋光仪、熔点仪、色谱纯试剂、纯水机、酒色谱、柱温箱、水分 测定仪、分析天平、紫外可见分光光度计、离心机、旋转蒸发仪、超声波清洗机、定氮仪、 氮吹仪、折光仪、酸度计、电导率仪、农残速测仪、生物安全柜、恒温湿箱、真空干燥箱、 药物稳定性试验箱、培养箱、干燥箱、马弗炉、原子吸收等。 2.1.5.2 选择“Method”→“Peak/Group Tables”打开峰表。在峰表中输入要校准的峰 的相关信息, “ID” 其中 、 “Ret Time” Window, 已自动添加, 其他需要输入的内容为: “Name” (组)分峰的名称)、 “ISTD ID#”(内标峰的 ID 号)、 “Units”(报告结果的浓度单位)、 “Analysis Channel”(选择所用的检测通道)、 “Fit Type”(选择标准曲线的类型,如点到点、线性、二 次曲线等方式)、 “Zero” (选择后强制校准曲线通过零点)、 “Calib Flag” (选择 Weight Average)、 “Level 1~10”(输入各组分中每份校准用标准用标准物质的量及其内标物质的量),等。 2. 分析方法的存储分析方法建立后应及时使用菜单栏中的 2 “File→Method→Save(Save As)” 或左键单击常用工具栏中的保存按钮进行存储。分析方法一般建议存储在 C:\Class-VP\Methods 中或其项链他个人文件夹中(无论新建还是调用一种方法,在对方法本 身做了任何的设定或改动后均应随时点击常用工具栏中的保存按钮, 以防信息丢失! 后不赘 述)。 2. 分析方法的调用如果想调用一种已存的分析方法, 3 左键单击菜单栏中的 “File→Method →Open”后,选中所需的分析方法并左键单击“打开” 。此时, “LC Setup Assistant-System” 对话框中将会显示所打开的分析方法名,其中操作同 2.1. 3 供试品分析 3.1 建立或调用一种分析方法(详见 2). 左键单击菜单栏中 “File→Method→Open” ,选中所需 要的分析方法并左键单击“打开”, 左键单击“Download”按钮,若仪器的系统控制器没有 打开,可以左键单击工具栏上的“Instrument ON/OFF”按钮,此时仪器将会按照所选定的分 析方法条件开始运行。进样采集前可以以按动工具栏上的“Zero Detector”按钮将会检测器 的基线手动回零(本机具有采项链集时自动回零功能,此项亦可以不做)。成都雅源科技专业 提供国产实验设备,进口实验设备(岛津、安捷伦等)主要产品:气相色谱仪、液相色谱仪、 色谱柱、气相色谱柱、液相色谱柱、样品瓶、标准品、净化工作台、旋光仪、熔点仪、色谱 纯试剂、纯水机、酒色谱、柱温箱、水分测定仪、分析天平、紫外可见分光光度计、离心机、 旋转蒸发仪、超声波清洗机、定氮仪、氮吹仪、折光仪、酸度计、电导率仪、农残速测仪、 生物安全柜、恒温湿箱、真空干燥箱、药物稳定性试验箱、培养箱、干燥箱、马弗炉、原子 吸收等。 3.2 单次进样采集分析当色谱柱和检测器已充分平衡和稳定后,左键单击“Single Run”按 钮,在出现的对话框中规定方法文件名(该名称应和您所建立或调用的方法文件名一致)、数 据文件存储路径(建议存储在 C:\Class-VP\Data\hplc 中或其他个人文件夹中)、数据文件名、 自动进样器的瓶号(样品架位号)(如果采用的是 140 位的样品架,则样品架位号为: 10001~10070,为左位样品架 1L;20001~20070,为右位样品架 2R、进样体积(μ L)。左键 单击“Start”,仪器开始单次进样采集分析,此时出现采集画面,采集完毕可以以进行色谱 峰的自动或手动分析。重复上述步骤进行下一次单次进样采集分析。 3.3 序列(多次)进样采集分析 3.3.1 序列(Sequence)的建立、存储和调用 3.3.1.1 序列(Sequence)的建立左键单击菜单栏中的“File”→“Sequence”→“New”, 出现“New Sequence”对话框,在此规定方法文件名、数据文件存储路径、数据文件名、自 动进样器的瓶号范围(开始瓶号和结束瓶号)、进样体积、重复进样次数等信息(原则同 3.2)。

左键单击“OK”后,出现序列(Sequence)列表,在此可以以进行更为详尽的 Sequence 编辑。 如: “Run Type”(将会校准用标准物质的首次运行设定为“Begin Calibration”和“Clear All Calibration” ;将会校准用标准运行类型均设为“End Calibration” ,则中间的运行自动变为 “Calibration” ,供试品的运行类型均设为“Unknown”“Level”(标准物质的 Level 值应和 、 峰表中的 Level 值相对应,依次输入 1~10 的水平代码;供试品的 Level 值均为 0)、 “Sample Amount” (校准用标准物质的量均输入 1; 供试品的量输入相应的具体数值)、 “ISTD Amount” (标准物质的内标特量均输入“1” ;供试品的内标项链物质的量输入相应的具体数值)。更为 详尽的参数输入参见使用说明书。成都雅源科技专业提供国产实验设备,进口实验设备(岛 津、安捷伦等)主要产品:气相色谱仪、液相色谱仪、色谱柱、气相色谱柱、液相色谱柱、 样品瓶、标准品、净化工作台、旋光仪、熔点仪、色谱纯试剂、纯水机、酒色谱、柱温箱、 水分测定仪、分析天平、紫外可见分光光度计、离心机、旋转蒸发仪、超声波清洗机、定氮 仪、氮吹仪、折光仪、酸度计、电导率仪、农残速测仪、生物安全柜、恒温湿箱、真空干燥 箱、药物稳定性试验箱、培养箱、干燥箱、马弗炉、原子吸收等。 3.3.1.2 序列(Sequence)的存储使用菜单栏中的“File”→“Sequence”→“Save(SaveAs)” 或左键单击常用工具栏中的“保存”按钮可以对当前的序列(Sequence)进行存储。建议存储 在 C:\Class-VP\ Sequence 中或其他个人文件夹中。 3.3.1.3 序列(Sequence)的调用左键单击菜单栏中的“File→Sequence→Open” ,选择所需 要的 Sequence,左键单击“打开” 。 3.3.2 序列(多次)进样采集分析首先要建立或调用一个 Sequence 并左键单击菜单栏中的 “File”→“Sequence”→“Open” ,将所需要的 Sequence 打开后,左键单击“Sequence Run” 按钮,在“Run Range”中选择“全部”或“部分”的序列范围,左键单击“Start” ,仪器将 会开始序列(多次)进样采集分析。 4 分析数据的处理和分析报告的打开印 4.1 分析数据的处理和查看 4.1.1 分析数据的处理主要看是积分参数的设定。在不设定任何积分参数的情况下,仪器 将会按照缺省参数值进行积分处理(仪器的缺省积分参数值为:Width=0.2;Threshold=50); 如果对按照仪器的缺省积分参数值进行的数据处理结果不满意,可以左键单击菜单栏中的 “Method→Integration Events”,进行丰富多项链彩的积分事件的设置和规定,设置后左键单 击常用工具栏中的“Analyze”按钮,仪器将会按照要求对数据文件进行再积分(再处理)。 4.1.2 分析数据的查看左键单击常用工具栏中的“Report→View→Area%Det(A)”按钮, 可以随时查看数据文件的百分面积报告结果。 4.2 分析报告的打开印 4.2.1 数据文件的打开左键单击菜单栏中“File→Data→Open”,选择所需要的数据文件, 左键单击“打开” 。 4.2.2 分析报告的打开印左键单击常用工具栏中的“Report→Print→Area%Det(A)”按钮, 可以随时打开印数据文件的百分面积报告结果。 还可以以使用菜单栏中的 “Method→Custom →Report”来编辑和打开印内容更为丰富的用户报告。 4.3 分析数据的存储(另存)仪器所采集的数据文件是自动存储的,包括对有关数据进行的 再积分或再处理。 但如果希望原有的数据文件不至于被处理后的文件所覆盖, 左键单击菜单 栏中“File→Data→Save As”或左键单击常用工具栏中的“保存”按钮即可以完成相应的工 作。 5 色谱柱的冲洗

5.1 分析工作结束后,必须对色谱柱进行充分的冲洗。对于常用的反相色谱柱,一般分别 以纯水和纯甲醇(或乙腈)代替原流动相中的水相(如缓冲溶液)和有机相,按原流动相比例, 在 1 mL/min 的流速下,冲洗 60min;再以甲醇为流动相冲洗 30min。 5.2 在对色谱柱进行冲洗的过和程中,为延长 D2 灯的使用寿命,可以将会其关闭。方法 为 :左键单击菜单栏中的“File→Method→Instrument Setup→Detector→Lamp→Off” 。 5.3 使用 Sequence Run 的运行,可以实现色谱柱的自动冲洗。方法是在 Sequence 中的最 后一行加入一个事先编好的冲柱方法文件,或使用“Shut Down”的方法将会一个事先编好 的冲柱方法作为 Shut Down 文件。 6 关机成都雅源科技专业提供国产实验设备,进口实验设备(岛津、安捷伦等)主要产品:气 相色谱仪、液相色谱仪、色谱柱、气相色谱柱、液相色谱柱、样品瓶、标准品、净化工作台、 旋光仪、熔点仪、色谱纯试剂、纯水机、酒色谱、柱温箱、水分测定仪、分析天平、紫外可 见分光光度计、离心机、旋转蒸发仪、超声波清洗机、定氮仪、氮吹仪、折光仪、酸度计、 电导率仪、农残速测仪、生物安全柜、恒温湿箱、真空干燥箱、药物稳定性试验箱、培养箱、 干燥箱、马弗炉、原子吸收等。 6. 手动关机分析工作结束, 1 并且色谱柱已充分冲洗完毕后, 依次左键单击工具栏中的 “Turn Pumps On/Off”“Instrument On/Off”按钮,依次关闭画面中的各个 Windows 界面并退出 、 Class-VP 工作站软件;依次关闭仪器、计算机的电源开关。 6.2 自动关机本机可以以实现无人自动关机。点击“Shut Down”按钮后出现 Shut Down 条件对话框,在其中选择 Shut Down 文件(应选择色谱柱冲洗文件作为 Shut Down 文件),在 “Cool Down Time”中规定一个时间,该时间应和冲柱文件的时间相一致,然项链后分别规 定所要关闭的组件名称,左键单击“Run”按钮即可以。 7 注意事项 7.1 2010 A 和 2010 C 两种型号的惟一区别在于 2010 C 的自动进样器样品架带有制冷功能, 冷却温度的设定在“File→Autosampler→Configuration”中,最低温度为 4℃。 7.2 可以使用“File→Method→Print”打开印出已打开的方法文件,但其中并不包括 2010 C 自动进样器的温度,可以以在“Method→Properties”中进行标明。 7.3 本机及其使用的工作站软件具有丰富的功能,例如:右键菜单、鼠标的单左键双击等 不同操作方式会产生不同的功能和效应,具体可以参阅有关使用说明书。


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