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国际标准酶法测定β葡聚糖含量的研究


粮油食品科技 第 "’ 卷 #&&, 年 第 , 期

粮油食品

国际标准酶法测定 ! ! 葡聚糖含量的研究
连喜军 " , 鲁晓翔 " , 蔡保松 # , 刘勤生 " , 张丽丽 "
(" $ 天津商学院 生物技术与食品科学学院, 天津 摘

上海 %&&"%’ ; # $ 上海交通大学农业与生物学院, #&&&%&) 要: 在国际 ! 用苯酚 ! 葡聚糖酶法测定的基础上用纤维素酶代替昆布多糖水解酶水解 ! ! 葡聚糖, 设计了适合我国应用的 ! ! 硫酸法代替葡萄糖试剂盒法测定 ! ! 葡聚糖酶解后得到葡萄糖含量, ! 葡聚 糖酶法测定方法。 关键词: 酶法; 大麦提取物; 纯度 ! 葡聚糖; ! 葡聚糖酶; ! ! 中图分类号: ( ")" $ % ; * +’, $ % 文献标识码: 文章编号: (#&&,) "&&. / .)," &, / #. / &%

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引言

!葡聚糖的 测 定 方 法 国 外 一 般 采 用 的 是 酶 法, ! 此法具有准确性高的优点, 但其成本太高, 且测定使 用药品不易购 买, 测 定 时 间 长。 我 国 目 前 主 要 采 用 测定还 原 糖 的 苯 酚 ! 硫 酸 法 来 测 定 ! ! 葡 聚 糖 含 量。 但研究发现, 该法测定的结果准确性受到质疑, 在苯 酚 ! 硫酸法测定 ! !葡 聚 糖 含 量 过 程 中 不 能 用 葡 萄 糖 代替 ! 葡 聚 糖 作 标 准, 二者之间测定结果的有 !
图# 酶法测定 ! ! 葡聚糖过程中葡萄糖含量分析原理图

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材料与方法
材料 大麦, 由西藏自治区农牧科学院农业研究所提

〔"〕 。 .0 $ ’ 1 左右的误差 酶法测定的原 理 是 在 23 , $ ) 悬 浮 液 中 使 样 品 与昆布多糖水解 酶 混 合 反 应 一 段 时 间, 取出部分过

供。 高温" ("& 万5 6 78) 、 糖化酶 ("& 万 5 6 78) 、 ! 淀粉酶 纤维素酶 (%& 万 5 6 78) 由天津市诺奥 科 技 发 展 有 限 公司提供。 大麦 ! 葡萄糖氧化 ! 葡聚糖标准品, ! 葡聚 糖 酶, ! 酶! 过氧化 酶 试 剂 盒 ( 9:;:< ) 试 剂 盒 购 于 =>?7@ 公 司。 浓硫酸 (分 析 纯) , 苯酚 (分 析 纯) , 乙醇 (分 析 纯) , 葡萄糖标准品 ! 葡聚糖试剂盒购于伊普瑞斯科技有限公司。 ! " $ # 实验方法 "$#$ " " $# $ #
〔. 4 ")〕 。 献

滤液与纯化后的 ! 采用葡萄 ! 葡 萄 糖 苷 酶 反 应 完 全, 糖氧化酶 ! 过氧 化 物 酶 试 剂 分 别 测 定 标 准 ! !葡 聚 糖 和样品酶解后得 到 葡 萄 糖 浓 度, 利用! !葡 聚 糖 标 准 品酶解后得到葡萄糖浓度与标准 ! ! 葡聚糖浓度的关 系和在相同条件下样品酶解得到葡萄糖含量进行比 对, 求出样品中 ! ! 葡 聚 糖 含 量。 酶 法 测 定 混 合 键 ! ! 〔# 4 ,〕 。其 测 定 原 理 葡聚糖含量分析程序如图 " 所示 见图 # 。

大麦中! !葡 聚 糖 提 取 工 艺

参见文 国外大麦

酶法测定! !葡 聚 糖 含 量 的 研 究

〔",〕 。 参考文献

籽粒及制品的混合键 ! ! 葡聚糖酶法分析检验程序见 改变 国 外 酶 法 测 定 ! 改 ! 葡 聚 糖 过 程 中 的 条 件, 变内容包括: 用纤 维 素 酶 代 替 昆 布 多 糖 水 解 酶 水 解

考察纤维素酶对 ! 用 ! 葡聚糖, ! 葡聚糖的 水 解 作 用; ! 用 苯 酚!硫 酸 法 代 替 ! 葡聚糖酶代替 ! ! 葡 萄 糖 苷 酶; ! 葡萄糖氧化 酶 ! 过 氧 化 物 酶 法 测 定 ! !葡 聚 糖 水 解 产 生的葡萄糖含量, 对比两种方法的测定结果, 研究其 测定准确性。 " $# $ %
图" 酶法测定混合键 ! ! 葡聚糖含量分析程序图

改变后! !葡 聚 糖 酶 法 测 定 方 法 与 标 准 ! !葡 用改变后 ! ! 葡聚糖酶

聚糖试剂盒法测定结果对比

收稿日期: #&&, / &% / %& 作者简介: 连喜军 ( "+.# / ) , 男, 陕西澄城人, 讲师, 博士 $

法测定方法与标准 ! ! 葡聚糖试剂盒法分别测定大麦 提取物中 ! 对比测定结果, 验证改变 ! 葡聚糖的含量, # " !

万方数据  

粮油食品
后酶法测定结果的准确性。 ! "# " $ 精密度 改变后! %葡 聚 糖 酶 法 测 定 方 法 的 准 确 性 和 取 ! " &’( 浓度为 )*" 用确立 + , ’( 的 样 品, 的简化酶法测定样品中 ! 对测 % 葡聚糖的含量 !* 次, 定结果分析, 检验方法的准确性; 在测定过程中分别 取 ! " &’( 浓 度 为 )*" + , ’( 的 标 准 ! %葡 聚 糖 和 样 品 进行混合, 用确立的方法进行 ) 次实验, 测定混 合 后 样品 ! 回收率及精密度。 % 葡聚糖含量、 ! "! "$ 苯酚 % 硫酸法测定葡萄糖含量
〔!〕 的方法进行。 用参考文献

粮油食品科技 第 !$ 卷 #**) 年 第 ) 期

用量继续增加, 酶解液的吸光度基本保持不变, 说明 此时 ! % 葡聚糖使用量与测定过程中酶用量已经达到 平衡, 因此 ! % 葡聚糖的使用量选为 ! " &’(。 图 - 为纤 维 素 酶 (浓 度 为 &*5 , ’() 的加量对! % 葡聚糖的 水 解 作 用。 由 图 - 可 知, 在 选 定 的 * " !’( 纤维素酶对! 6 - " *’( 纤维素 酶 加 量 范 围 内, %葡 聚 糖的水解结果基 本 相 同, 说 明 添 加 * " !’( 的 酶 量 已 经可以将 ! " &’( 的 ! 所以 纤 维 素 % 葡聚糖彻底分解, 酶的添加量选为 * " !’(。

酶膜法测定葡萄糖含量 采用 ./0%$*1 生物传感分析仪进行测定。

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结果与分析
纤维素酶的添加对 ! % 葡聚糖测定的影响 表 ! 为纤维素酶对 ! % 葡聚糖的水解作用。由表 !

可知, 与空白组相比, 纤维素酶的添加使标准 ! % 葡聚糖 酶解后的 &$*2’ 处的吸光度由 * "!*3 增加到* "!-*, 证明 纤维素酶对! % 葡聚糖起到了水解作用。
表! 试样 吸光度 ( &$*2’) 纤维素酶对 ! % 葡聚糖的水解作用 空白 * " !*3 4 * " *) 加纤维素酶 * " !-* 4 * " *& 图纤维素酶的加量对 ! % 葡聚糖的水解作用的影响

表 - 为纤维素酶酶解时间对 ! % 葡聚糖水解的影 响。由表 - 可知, 随着纤维 素 酶 酶 解 时 间 的 延 长, % ! 葡聚糖水解产生 葡 萄 糖 的 吸 光 度 不 断 增 加, 当酶解 时间到 )*’72 时, 酶 解 液 吸 光 度 达 到 最 大 * " !8) , 时 间再延长, 吸光度 保 持 不 变, 因 此, 纤维素酶酶解时 间选为 )*’72 。

表 # 为! % 葡聚糖使 用 量 对 酶 解 的 影 响。 由 表 # 可知, 随着 ! % 葡聚糖使 用 量 由 * " &’( 增 加 到 ! " &’(, 酶解液的吸光度由 * " !-* 增加到 * " !)* , % 葡聚糖使 !

表# ! % 葡聚糖使用量对酶解的影响 标准 ! (浓度为 % 葡聚糖 使用量 ( ’() )*" + , ’() 吸光度 ( &$*2’) *"& * " !-* 4 * " *3 表酶解时间 ( ’72) 吸光度 ( &$*2’) !& * " !*# 4 * " *3 ! * " !-! 4 * " *) !"& * " !)# 4 * " *! * " !)* 4 * " *#

纤维素酶酶解时间对 ! % 葡聚糖水解的影响 #* * " !-$ 4 * " *$ -* * " !$) 4 * " *# )* * " !8) 4 * " *! !** * " !8) 4 * " *#

# "# ! % 葡聚糖酶测定条件确定 在纤 维 素 酶 测 定 条 件 确 定 的 基 础 上, 研究改变 酶法测定 ! % 葡聚糖含量中 ! % 葡聚糖酶的添加量及酶 解时间对测定的影响。 图 $ 为! (浓度为 #5 , ’() 的加量对 ! % 葡聚糖酶 % 葡聚 糖 的 水 解 作 用。由 图 $ 可 知, 随! %葡 聚 糖 酶 的 加量由 * " ! ’( 增 加 到 !’(, 酶解液吸 光 度 由* "!增 加到 * " !) , 酶 加 量 继 续 增 加, 酶解液吸光度不再增 加, 说明此浓度下 ! %葡 聚 糖 酶 已 经 能 将 纤 维 素 酶 酶 解! 因此选! % 葡聚糖所得低 聚 糖 全 部 分 解, %葡 聚 糖 酶的加量为 !’(。
图$ ! % 葡聚糖酶的加量对 ! % 葡聚糖的水解作用

图 & 为! % 葡聚糖酶酶解时间对 ! % 葡聚糖水解的 影响。 由 图 & 可 知, 随 酶 解 时 间 由 &’72 增 加 到 酶解液的吸光度由 * " !!& 增 加 到 * " !-! , 时间 !&’72 , 再延长, 酶解液吸光度基本保持不变, 说明经纤维素 酶解 ! 因此选 % 葡聚糖所得 低 聚 糖 已 经 被 完 全 分 解, % 葡聚糖酶酶解时间为 !&’72。 !

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万方数据  

粮油食品科技 第 #4 卷 /((’ 年 第 ’ 期

粮油食品
/ $! 简化酶法的准确性和精密度实验

按照 # $ / $ 4 的方法对新确立的酶法测定 ! " 葡聚 糖含量方法的准 确 性 和 精 密 度 进 行 实 验, 结果见表 新确立的酶法测定 ! ’ 。由表 ’ 可知, " 葡聚糖含量方 法的 准 确 性 和 精 密 度 分 别 为 / $ ! 8 和 ( $ ’/ 8 , 说明
图! ! " 葡聚糖酶酶解时间对 ! " 葡聚糖水解的影响

该方法有一定的准确性。
表’ 改变后 ! " 葡聚糖酶法测定方法的准确性和精密度 回收率 ( 8 ) 精密度 (8) 77 $ // ( $ ’/ /$! ’ 试验次数 相对偏差 ( 8 ) 试验次数 #( 次

根据 以 上 实 验 结 果, 改变的! "葡 聚 糖 酶 酶 解 条 件为: (浓 度 为 ’(" ; 浓度 # $ !%& 标准 ! " 葡聚糖 ) * %&) 为 !(+ * %& 纤 维 素 酶 ( $ !%&, 酶 解 时 间 ’(%,-; 然后 稀释至 .(%&, 从 中 吸 取 ( $ !%& 到 另 一 试 管, 再加入 浓度为 /+ * %& ! 酶解 #!%,- 后, 用 " 葡聚糖酶 ( $ #%&, 葡萄糖氧化酶 " 过氧化酶法测 定 葡 萄 糖 含 量, 换算出 样品中 ! " 葡聚糖含量。 / $. 标准葡萄糖氧化酶" 过氧化酶法 ( 01213) 、 苯酚"
表4 不同方法测定酶解液葡萄糖含量一致性 (" ) * %&) 标准 ! " 葡聚糖 4( $ . 5 ( $ # 4( $ ’ 5 ( $ # /$7 5 ($4 样品 67 $ / 5 ( $ # 67 $ ’ 5 ( $ / /$! 5 ($’

.

结论
改变 后 的 ! " 葡 聚 糖 酶 法 测 定 过 程 为: # $ !%& 浓

度为 ’(" 用 浓 度 为 !(+ * %& ) * %& 的 标 准 ! " 葡 聚 糖, 纤维素 酶 ( $ !%& 酶 解 ’(%,- ; 然后用蒸馏水稀释至 从中吸取 ( $ !%& 到 另 一 试 管, 再加入浓度为 .(%&, 作用 #!%,- 后, 用苯酚 " 硫酸 /+ * %& ! " 葡聚糖酶 #%&, 法测定酶解液中 葡 萄 糖 含 量, 建立了样品酶解后葡 萄糖浓度 与 样 品 中 所 含 ! "葡 聚 糖 浓 度 之 间 数 学 关 系: (代表 ! (代 表 葡 萄 糖 : " 葡 聚 糖 的 浓 度); # $ !7< 浓度) 。可采用改 变 后 酶 法 代 替 ! "葡 聚 糖 试 剂 盒 法 测定大麦提取物中 ! " 葡聚糖含量。 参考文献:
〔#〕 连喜军, 鲁 晓 翔, 林 旭 辉 $ 苯 酚"硫 酸 法 测 定 ! "葡 聚 糖 含 量 研 究 〔 =〕 ( #() : $ 粮食与油脂, /((! , .7 > 4. $ 〔/〕 ?@ABCDEF,G $ H $ D-I 0BC--,C > JKB%CL,? “ $ M-NF%,@ OPD-Q,R,@DQ,K- KR ( #"4) 〔 =〕 ( #".) " "3")BP@D- ,- SDEBCF D-I %DBQ” $ =KPE-DB KR QTC U-LQ,QPQC ! ( 7#) : KR GECV,-),#79! , /9! > /7! $ 〔 .〕 ( #"4) ?@ABCDEF,G $ H $ D-I WPEQTC-,M $ = $“ ?CDLPEC%C-Q KR( #".) " "3" ! 〔 =〕 )BP@D- ,- %DBQ,VKEQ D-I SCCE” $ =KPE-DB KR QTC U-LQ,QPQC KR GECV,-), ( 7/) : #79’ , #’9 > #6. $ 〔 4〕 ( #".) ( #"4) ?@ABCDEF,G $ H $ D-I AKII,X “ $ ?CDLPEC%C-Q KR " "3")BP@D! 〔 =〕 ,- SDEBCF D-I KDQL:D LQECD%B,-CI C-NF%,@ YEK@CIPEC” $ =KPE-DB KR QTC ( !!) : Z@,C-@C KR [KKI D-I \)E,@PBQPEC,#77# , .(. > .#/ $ 〔!〕 “ U-QCEBDSKEDQKEF C]DBPDQ,K- KR ! ?@ABCDEF,G $ H $ D-I ?P)RKEI,3 $ A $ " )BP@D- D-DBFL,L %CQTKIL $ ”U- QTC @TD-),-) EKBC KR KDQL ,- TP%D- D-I D-," 〔 =〕 %DB -PQE,Q,K$ 2EK@CCI,-)L KR QTC [KPEQT U-QCE-DQ,K-DB 1DQ AK-RCEC-@C, \ICBD,IC,\PLQEDB,D $ , #77/ ,1@Q #7 > /. $ 〔 ’〕VVV $ %C)DNF%C $ @K% $ 〔 6〕 GPE^PL _,‘C%@BB, [ $ MRRC@Q KR CaQED@Q,K- @K-I,Q,K-L K- F,CBI,@K%YKL," 〔 =〕 Q,K- D-I ],L@KL,QF LQDS,B,QF KR SDEBCF ! ")BP@D- )P% $ ACECDB ATC%,LQEF, ( ’) :9(! > 9(7 $ #779 ,6! 〔 9〕 楼惠新 $ 青藏高原青稞生产发展与对策 〔 =〕 $ 柴达木开发与研究, ( /) :/9 > .# $ /((( , 〔 7〕 洛桑旦达,强小林 $ 青 稞 特 有 营 养 成 份 分 析 与 开 发 利 用 现 状 调 查研究报告 〔 =〕 ( 9) :!! > ’4 $ $ 西藏科技,/((# ,#(( 〔 #(〕 栾运芳,何燕 $ 西 藏 青 稞 品 质 改 良 的 趋 势 及 对 策 〔 =〕 $ 大麦科 学,/((4 , ( /) :# > 4 $ 〔 ##〕 山永凯,杨占武 $ 有待开发的高原作物 > 青 稞 〔 =〕 $ 中国食物与 营养,/((4 ,! :/4 > /! $ 〔#/〕 1LP%, ? $ ‘TC PBQEDLQEP@QPEC KR FCDLQ :@CBB VDBB LQEP@QPEC D-I RKE%DQ,K〔 =〕 ( / > .) :/(6 > /.. $ $ ?,@ES,KB , #779 , /7 〔#.〕 0KYDB 2b, ZPBB,]D- 2\, ZTCYTCEI ?0 $ \-DBFL,L KR VDBB )BP@D-L REK% 〔 =〕 $ = $ FCDLQ, TFYTDB D-I )CE% > QPSC RKE%,-) @CBBL KR AD-I,ID DBS,@D-L 0C- ?,@EKS,KB , #794 , #.( :./7! > ..#( $ 〔#4〕 ( #, 1SFDLT, ‘, :KLT,ID ?, ?KE, ‘, CQ DB $ 2BDL%D . )> !> 3 > )BP@D-, %CLPEC%C-Q ,- I,D)-KL,L KR ,-]DL,]C ICCY %F@KL,L D-I RP-)DB RCSE,BC 〔 =〕 CY,LKICL $ &D-@CQ, #77! , .4! :#6 > /( $ 〔#!〕 连喜军, 张平平, 罗庆丰 $ 西藏青稞 !> 葡聚糖提取研究 〔 =〕 $ 粮食 与油脂, ( #) : /((’ , /6 > /9 $ 〔#’〕 连喜军, 鲁晓翔, 林旭辉, 王凤 玲 $ 大 麦 籽 粒 及 制 品 的 混 合 键 !>

硫酸法与酶膜法测定酶解液中葡萄糖含量的一致性
方法 01213 法 苯酚 " 硫酸法 酶膜法

表 4 为 标 准 葡 萄 糖 氧 化 酶 " 过 氧 化 酶 法、 苯 酚" 硫酸法与酶膜法 测 定 标 准 ! ( ’(" 和样 "葡 聚 糖 ) * %&) 品 (#/7" 酶解液中葡萄糖含量的一致性结果分 ) * %&) 析。 由表 4 可知, 三种方法对酶法测定过程中酶解 液中葡萄糖浓度的测定结果 不 一 致, 葡 萄 糖 氧 化 酶" 过氧化酶法 ( 01213) 和苯酚 " 硫 酸 法 测 定 结 果 相 同, 而酶膜法测 定 结 果 比 葡 萄 糖 氧 化 酶 " 过 氧 化 酶 法 和 苯酚 " 硫酸法测定结果低得多, 这可能是酶法测定大 麦籽粒及其制品 中 ! 酶解液中存在的纤 " 葡 聚 糖 时, 维素酶、 "葡 聚 糖 酶 等 对 葡 萄 糖 酶 膜 法 测 定 造 成 严 ! 重干扰, 致使 酶 膜 仪 不 能 正 常 工 作。在 酶 法 测 定 大 麦及其制品中 ! 可 采 用 苯 酚"硫 酸 法 " 葡聚糖含量 时, 代替葡萄糖氧化酶 " 过氧化酶法。 / $4 改变后测定方法与标准试剂盒法测定结果对比 表 ! 为改变后 ! " 葡聚糖酶法测定方法与标准 ! " 葡聚 糖 试 剂 盒 法 测 定 结 果 对 比。 由 表 ! 可 知, 改变 后酶法测定方法与 ! " 葡聚糖试剂盒法测定结果基本 相同, 二者之 间 仅 有 ( $ / 8 的 差 别, 因 此, 可采用改 变后酶法代替 ! " 葡聚糖试剂盒法测定大麦提取物中 " 葡聚糖含量。 !
表! 改变后 ! " 葡聚糖酶法测定方法与标准 " 葡聚糖试剂盒法测定结果对比 ! 测定方法 改变后酶法 标准 ! " 葡聚糖 试剂盒法 大麦提取物 浓度 #/7" ) * %& #/7" ) * %& 大麦提取物中 " 葡聚糖含量 ! #// $ 9" ) * %& ) * %& #// $ ’" 纯度 (8) 7! $ / 8 7! $ ( 8

完 葡聚糖分析检验程序 〔 =〕 ( 4) , $ 大麦科学 $ /((! , 9! ’4/ > ’44 $ !

万方数据  

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国际标准酶法测定β-葡聚糖含量的研究
作者: 作者单位: 刊名: 英文刊名: 年,卷(期): 引用次数: 连喜军, 鲁晓翔, 蔡保松, 刘勤生, 张丽丽 连喜军,鲁晓翔,刘勤生,张丽丽(天津商学院,生物技术与食品科学学院,天津300134), 蔡保 松(上海交通大学农业与生物学院,上海200030) 粮油食品科技 SCIENCE AND TECHNOLOGY OF CEREALS,OILS AND FOODS 2006,14(6) 1次

参考文献(16条) 1.连喜军.鲁晓翔.林旭辉 苯酚-硫酸法测定β-葡聚糖含量研究[期刊论文]-粮食与油脂 2005(10) 2.McCleary B V.Glennie-Holmes M Enzymic quantification of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in barley and malt 1985(91) 3.McCleary B V.Nurthen E J Measurement of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in malt,wort and beer 1986(92) 4.McCleary B V.Codd R Measurement of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in barley and oats:a streamlined enzymic procedure 1991(55) 5.McCleary B V.Mugford D C Interlaboratory evaluation of β-glucan analysis methods 1992 6.查看详情 7.Burkus Z.Temclli F Effect of extraction conditions on yield,composition and viscosity stability of barley β-glucan gum 1998(6) 8.楼惠新 青藏高原青稞生产发展与对策 2000(2) 9.洛桑旦达.强小林 青稞特有营养成份分析与开发利用现状调查研究报告 2001(8) 10.栾运芳.何燕 西藏青稞品质改良的趋势及对策[期刊论文]-大麦科学 2004(2) 11.山永凯.杨占武 有待开发的高原作物--青稞[期刊论文]-中国食物与营养 2004(5) 12.Osumi M The ultrastructure of yeast:cell wall structure and formation 1998(2-3) 13.Gopal PK.Sullivan PA.Shepherd MG Analysis of wall glucans from yeast,hyphal and germ-tube forming cells of Candida albicans 1984 14.Obyashi T.Yoshida M.Mori T Plasma(1,3)-β-D-glucan,mesurement in diagnosis of invasive deep mycosis and fungal febrile episodes 1995 15.连喜军.张平平.罗庆丰 西藏青稞β-葡聚糖提取研究[期刊论文]-粮食与油脂 2006(1) 16.连喜军.鲁晓翔.林旭辉.王凤玲 大麦籽粒及制品的混合键β-葡聚糖分析检验程序[期刊论文]-大麦科学 2005(4)

相似文献(2条) 1.期刊论文 连喜军.鲁晓翔.蔡保松.LIAN Xi-jun.LU Xiao-xiang.CAI Bao-song 酶法测定大麦提取物β-葡聚糖含 量研究 -粮食与油脂2006(5)
目前国际认可β-葡聚糖含量测定方法是酶法,此法测定成本高,我国目前多采用苯酚-硫酸法测定,但测定结果准确性較差.该研究在国际β-葡聚糖酶 法测定基础上用纤维素酶代替昆布多糖水解酶水解β-葡聚糖,用苯酚-硫酸法代替葡萄糖试剂盒法测定β-葡聚糖酶解后得到葡萄糖含量,设计适于我国应 用的β-葡聚糖酶法测定方法.此法测定过程为:1.5ml浓度为60μg/mL标准β-葡聚糖和一定浓度样品,用浓度为50U/mL纤维素酶0.5 m1酶解60 min;然后用 蒸馏水稀释至30 m1,从中吸取0.5 m1到另一试管,再加入浓度为2 U/mL β-葡聚糖酶1ml,作用15 min后,用苯酚-硫酸法测定标准β-葡聚糖和样品酶解液 中葡萄糖含量,计算出样品中β-葡聚糖含量.

2.期刊论文 连喜军.鲁晓翔.蔡保松.刘勤生.张跃华.张丽丽 酶法测定大麦提取物中β-葡聚糖含量的研究 -食品工 业科技2006(11)
在国际β-葡聚糖酶法测定β-葡聚糖含量的基础上,用纤维素酶代替昆布多糖水解酶水解β-葡聚糖,用β-葡聚糖酶代替β-葡萄糖苷酶,用苯酚-硫酸 法代替葡萄糖试剂盒法测定β-葡聚糖酶解后得到葡萄糖含量,设计了适合我国应用的β-葡聚糖酶法测定方法.此法测定过程为:1.5mL浓度为60μg/mL的 标准β-葡聚糖和一定浓度的样品,用浓度为50U/mL纤维素酶0.5mL酶解60min;然后用蒸馏水稀释至30mL,从中吸取0.5mL到另一试管,再加入浓度为 2U/mLβ-葡聚糖酶1mL,作用15min后,用苯酚-硫酸法测定标准β-葡聚糖和样品酶解液中葡萄糖含量,计算出样品中β-葡聚糖的含量.

引证文献(1条) 1.李仁勇.梁立娜.牟世芬.蔡亚岐 离子色谱-脉冲安培检测法测定酵母细胞壁中β-葡聚糖和甘露寡糖[期刊论文]-

食品与发酵工业 2008(12)

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