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多酚、芥子碱、植酸的测定


总酚、 总酚、芥子碱的测定 1. 总酚标曲的制定 总酚标曲的制定 取 25mg 单宁(烘干后重)溶于 100ml 甲醇溶液中,分别去 0μl、20μl、40μl、60 μl、80μl、100μl 放于玻璃试管中,加入 1ml 蒸馏水,再加入 0.5ml-福林酚试剂(1:2) , 加入 5ml 10% na2co3,混匀静置 20min,720 测 OD 值。 总酚样品的测定 2.

总酚样品的测定 准确称取 0.3g(精确至 0.0001g)样品于离心管中, 加入 3.5ml 甲醇, 混合器 30min,30℃ 离心 30 分钟 (4500 转/min) 离心后, , 取混合上清液 100μl 于试管中, 加蒸馏水 1ml, 0.5ml福林酚试剂(1:2) ,加入 5ml 10% na2co3,摇 20min, 720 测 OD 值,蒸馏水做对照。 (芥子 碱样品于 330nm 处测定吸光度值) 3. 计算 -3 X1%=0.875× X1%=0.875×V×10 /m V–吸光度值标准曲线所查对应体积μl M-样品质量 植酸的测定(定磷法) 植酸的测定(定磷法) 1. 标准曲线的绘制 磷酸二氢钾在 105℃干燥 1h,于干燥器中冷却后称取 0.2195 克 3 溶解于水,定量地转至 1000ml 容量瓶中,加硝酸 3ml,用水稀释至刻度,摇匀,即为 50μg/ml 的磷标准溶液。 准确移取磷标准液 0.0ml、1.0ml、2。0ml、4.0ml、8.0ml、16.0ml 于 50ml 容量瓶中, 各加入钒钼酸铵显色剂 10ml,用水稀释至刻度,摇匀,常温下放置 10min 以上,以 0.0ml 溶 液为参比,用 1cm 比色皿,在 400nm 波长下用分光光度计测各溶液的吸光度。以磷含量为横 坐标,吸光度为纵坐标,绘制工作曲线。 2. 操作步骤 (1) 干灰化法:称取 0.5g(m3)制备好的试样于灰化坩埚中,精确至 0.2mg,在电炉上炭 化,直至样品无烟。再放入高温炉,550℃灰化 3h,取出冷却,加入 10ml(1:1)盐酸 溶液和硝酸数滴, 小心煮沸约 10min,冷却后转入 100ml 容量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀,为试样分解液。 (2) 游离磷:称取 0.5g(m4)制备好的试样于三角瓶中,加入 100ml 蒸馏水,放入摇床摇 3h 左右。 (游离磷试样分解液) 试样的测定: 3. 试样的测定: 准确移取试样分解液 1.0-10.0ml(含磷量 50-750μg)于 50ml 容量瓶中,加入钒钼酸铵 显色剂 10ml,用水稀释到刻度,摇匀,常温下放置 10min 以上,用 1cm 比色皿在 400nm 波长 下用分光光度计测定试样分解液的吸光度,在工作曲线上查得试样分解液的含磷量。 结果计算 4. 结果计算

X1=M1×V/(M3×V1×104)
X1 为试样中总磷含量 m1 为工作曲线查得试样分解液的磷含量,μg;V 为试样总体积, ml;m 为试样质量,g;v1 为试样测定时移取试样的分解液体积,ml.

X2=M2×V/(M4×V2×10 4)
X2 为试样中游离磷含量 m2 为工作曲线查得试样分解液的磷含量,μg;V 为试样总体 积,ml;m 为试样质量,g;v2 为试样测定时移取试样的分解液体积,ml. 植酸含量%=(x1-x2)×3.548


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