当前位置:首页 >> 理化生 >>

蛋白质浓缩问题——超滤浓缩管的使用及保存


二、离心超滤管浓缩样品
2.1 浓缩样品
1、要浓缩的样品含盐量必须 0.3M 以上,含盐量低的样品须补加到 0.3MNaCl。 2、在内管(附有 3KD 膜)中加入 500?l 样品,将内管套入外管。 3、对称放置离心管,14520rpm(即 14000g)离心。 (离心 5min 约浓缩 2 倍,10min 约 4 倍, 15min 约 6 倍,20min 约 8 倍,30min 约 10 倍) 。 4、离心结束后,将内管倒置套在另一个干净的离心管呢,3880rpm 离心 min 收集浓缩后的 样品。或者用移液器直接吸出内管中的样品。

2.2

浓缩管使用后的处理和保存 浓缩管使用后的处理和保存

1、使用完的浓缩管,立即加入 500?l 含 1MNaCl 的缓冲液(此缓冲液与浓缩样品的缓冲液 一致) ,8000rpm 离心 20min。 2、甩净内管中的盐溶液,将内管放入超纯水中浸泡 1h。 3、内管加入超纯水 500?l,8000rpm 离心 5min。 4、甩净内管中的水,加入 500?l0.2MNaOH,8000rpm 离心 20min。 5、甩净内管中的 NaOH 溶液,用超纯水再 8000rpm 离心 5min。 6、甩净内管中的水,放入含 0.2-0.5‰NaN3 的生理盐水中。 7、外管用自来水洗净后,用超纯水冲洗干净,晾干。


相关文章:
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项 蛋白浓缩和换 Buffer 通常...否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测...排出部分水,然后盖上盖子,放 4 度保存,直到下次 ...
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项 蛋白浓缩和 换 Buffer ...否则离心机出问题时,无法第一时间处 理,后果不可...排出部分水,然后盖上盖子,放 4 度保存,直到下次...
离心超滤管的使用方法
超滤管使用方法和注意事项 蛋白浓缩和换 Buffer 通常使用的超滤管,常用 Millipore 的 Amicon-Ultra-15 超滤管 (MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和 MWCO ...
超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项 蛋白浓缩和换 Buffer 通常...否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测...排出部分水,然后盖上盖子,放 4 度保存,直到下次 ...
超滤管的使用方法及注意事项
2.适用范围: 适用超滤管的操作,保养及保存。 3.责任人: 仪器操作人员 4.步骤 4.1 选择合适的超滤管, 主要考虑蛋白分子量和浓缩体积。通常 应截留分子量不应...
超滤管的使用事项
超滤管使用的注意事项 超滤管分为 0.5ml、4ml、15ml 三种上样体积,并有 3kd、10kd、30kd、50kd、100kd 五 种截留分子量。可用于生物样品纯化、蛋白质浓缩、...
蛋白超滤膜的使用
为了减少蛋白的损失, 建议浓缩前用缓冲液润洗膜,...但是在把膜包从夹具拿 出来准备 保存的时候 ,发现...问题:请问 millipore 的超滤管可以反复使用吗? 如果...
蛋白浓缩方法
将待浓缩的液体 从管口灌入透析袋中,将整个装置挂...此种方法就是超滤浓缩,使用方式有的是离心,有的是...另外,上清吸出后放在-70 保存,日后在浓缩,蛋白...
浓缩蛋白工艺设计计算
5000 吨/年大豆浓缩蛋白艺设计 院系名称: 学生姓名...的特定使用对象, 而这个问题正是我国大豆蛋白加工所...此外,国外开始探求用超滤法生产大豆浓缩蛋白。湿热浸...
默克密理博的Amicon离心超滤
需要通过一步蛋白质浓缩过程将蛋白质储存起来,或者 ...不可逆沉淀等问题,原则上,能不用都尽量不用沉 淀...瓶中, 而大分子溶质则被超滤膜截流在样品浓缩管中...
更多相关标签: