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AKTA purifier层析仪使用简要操作规程


?KTApurifier 层析仪使用操作规程
1、 开机 打开仪器的主电源,打开电脑电源。待仪器自检完毕(CU950 上面的 3 个指示灯完全 点亮并不闪烁)。双击桌面上 UNICORN 图标,进入操作界面。 2、 准备工作溶液和样品 所有的工作溶液和样品必须经过 0.45?m 的滤膜过滤,样品也可高速离心后取上清备 用。当缓冲液中含有有机溶剂(如乙腈、甲醇),需在使用

前用低频超声脱气 10min。 3、 清洗及管道准备 首先将 A1 管道放入缓冲液或平衡液,binding buffer 中,将 B1 管道放入高盐溶液 中或 elution buffer,在 system control 窗口点击工具栏内的 manual,选择 pump→ pump wash basic,选中 A1,B1 管道为 ON, execute。泵清洗将自动结束。 4、 安装层析柱 在 manual 里选择 pump→flow rate,输入流速 1ml/ml,insert;选择 Alarm&mon→ alarm pressure,设置 high alarm(输入填料的耐受压力,可在填料说明书中查到), insert,execute。待 InjectionValve 的 1 号位管道流出水后接入柱子的柱头,稍微拧紧 后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。 开始纯化: 5、 开始纯化: 1)等待柱子平衡好了(观察电导 COND,pH 的数值和变化趋势)就准备上样了。此 时将紫外调零,选择 Alarm&mon→autozero,exectue。 2)用样品环上:将样品吸进注射器,推掉气泡,从 injectionValve 的 3 号位推入 (进样量不得低于样品环的体积的 2 倍)推好后不要取下注射器。在 manual 里选择 flowpath→injectionValve→inject,execute。 3)用泵上样:点击 pause,将 A1 放入样品中,点击 countine,待样品上完后,再 将 A1 放入到平衡液中继续清洗柱子。 2),3)选择一种方式 4)洗脱:上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在 manual 里选择 pump→ gradient,按照自己的工艺选择 targetB(100%)和 length(10CV)。 5)设定收集:选择 Frac→fractionation_900,输入每管收集体积,exectue。结束 固定体积收集选择 Frac→fractionation_stop_900,exectue。 清洗泵及卸下层析柱: 6、 清洗泵及卸下层析柱 将 A1 和 B1 入口放入纯水中,启动 pump wash purifier 功能冲洗 A 泵和 B 泵及整个 管路。然后再将 A1 和 B1 入口放入 20%乙醇中,同样操作将乙醇冲满整个管路保存。系 统给柱子一个慢流速,设置系统保护压力,然后先拆柱子的下端,正在滴水的时候将堵头 拧上,再拆柱子的上端,最后拧上上端的堵头。整个过程防止气泡进入。 关闭电源: 7、 关闭电源: 从软件控制系统的第一个窗口 unicorn manager 点击退出,其他窗口不能单独关闭。 然后关闭 AKTA 主机电源,关闭电脑电源。 (仪器的维护另见系统维护指南) 仪器的维护另见系统维护指南) 通用电气医疗集团生命科学部 hotline:8008109118


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