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7-紫外可见光吸收光谱


第六章 紫外-可见吸收光谱分析法
UV-VIS spectrometry 第一节 紫外-可见吸收光谱基本原理
principles of UV-VIS spectrometry

第二节 紫外-可见光谱仪
UV-VIS spectrometer

第三节 紫外-可见吸收光谱的应用
applicatio

n of UV-VIS spectrometry
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第一节 紫外-可见吸收光谱分析基本原理
principles of UV-VIS spectrometry

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1.概述
紫外-可见吸收光谱:分子价电子或外层电子能级跃迁。 波长范围:100-800 nm. (1) 远紫外光区: 100-200nm (2) 近紫外光区: 200-400nm (3) 可见光区: 400-800nm

可用于结构鉴定和物质定性与定量分析。 电子跃迁的同时,伴随着振动转动能级的跃迁——带状光谱

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2.物质对光的选择性吸收及吸收曲线
M + hν 基态 E1 (△E) → M* 激发态 E2 M + 热 M + 荧光或磷光

ΔE = E2 - E1 = hν 量子化-选择性吸收 用不同波长的单色光照 射,测吸光度得到吸收 曲线。 最大吸收波长λ max
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吸收曲线的讨论:
?①同一种物质对不同波长光的吸光度 不同,吸光度最大处对应的波长称为最 大吸收波长λmax 。 ?②不同浓度的同一种物质,其吸收曲 线形状相似λmax不变,而对于不同物 质,它们的吸收曲线形状和λmax则不 同。 ?③吸收曲线可以提供物质的结构信息,并作为物质定性分 析的依据之一。
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?④不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度 A 有差异,在λmax处吸光度A 的差异最大,此特性可作作 为物质定量分析的依据。 ?⑤在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定 最灵敏,吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要 依据。

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红移与蓝移
λmax向长波方向
移动称为红移, 向短波方向移动 称为蓝移 (或紫 移)。吸收强度即 摩尔吸光系数ε 增大或减小的现 象分别称为增色 效应或减色效应 ,如图所示。
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3.电子跃迁与分子吸收光谱
?物质分子内部三种运动形式: (1)电子相对于原子核的运动; (2)原子核在其平衡位置附近的相对振动; (3)分子本身绕其重心的转动。 ?分子具有三种不同能级:电子能级、振动能级和转动能级 ?三种能级都是量子化的,且各自具有相应的能量。 ?分子的内能:电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er 即: E=Ee+Ev+Er

ΔΕe>ΔΕv>ΔΕr
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能级跃迁
电子能级间跃迁 的同时,总伴随 有振动和转动能 级间的跃迁。即 电子光谱中总包 含有振动能级和 转动能级间跃迁 产生的若干谱线 而呈现宽谱带。
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分子吸收光谱的基本特点
(1) 转动能级间的能量差ΔΕr:0.005~0.050eV,跃迁
产生吸收光谱位于远红外区——远红外光谱或分子转动光谱 (2) 振动能级的能量差ΔΕv约为:0.05~1eV,跃迁产 生的吸收光谱位于红外区——红外光谱或分子振动光谱 (3) 电子能级的能量差ΔΕe较大:1~20eV,跃迁产生的 吸收光谱在紫外—可见光区——紫外—可见光谱或分子的电 子光谱
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(4)吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的 能量差所决定,反映了分子内部能级分布状况,是物质定性 的依据。 (5)吸收谱带的强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关, 也提供分子结构的信息,通常将在最大吸收波长处测得的摩 尔吸光系数εmax也作为定性的依据。不同物质的λmax有时可

能相同,但εmax不一定相同。
(6)吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比,这 是进行光谱定量分析的依据。
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第二节 紫外—可见光谱仪
UV-VIS spectrometer

一、基本组成 general process 二、分光光度计的类型 types of spectrometer

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一、基本组成
general process
光源 单色器 样品室 检测器 显示

1. 光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具 有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区:钨灯作 为光源,其辐射波长范 围在320~2500 nm。 紫外区:氢、氘 灯。发射185~400 nm 的连续光谱。
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2.单色器
将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任 波长单色光的光学系统。 ①入射狭缝:光源的光由此进入单色器; ②准光装置:透镜或返射镜使入射光成为平行光束; ③色散元件:将复合光分解成单色光;棱镜或光栅; ④聚焦装置:透镜或 凹面反射镜,将分光 后所得单色光聚焦至 出射狭缝; ⑤出射狭缝。
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3.样品室
样品室放置各种类型的吸收池 (比色皿)和相应的池架附件。吸 收池主要有石英池和玻璃池两种。 在紫外区须采用石英池,可见区一 般用玻璃池。

4.检测器
利用光电效应将透过吸收池的 光信号变成可测的电信号,常用的 有光电池、光电管或光电倍增管。

5. 结果显示记录系统
检流计、数字显示、微机进行 仪器自动控制和结果处理
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二、分光光度计的类型
1.单光束 types of spectrometer
简单,价廉,适于在给定波长处测量吸光度或透光 度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有 很高的稳定性。

2.双光束
自动记录,快速全波段 扫描。可消除光源不稳定、 检测器灵敏度变化等因素的 影响,特别适合于结构分 析。仪器复杂,价格较高。
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3.双波长
将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一 吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△λ= 1~2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。

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光路图

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第三节 紫外-可见吸收光谱的应用
applications of UV-VIS

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1. 定性分析
λmax

qualitative analysis

,εmax:化合物特性参数,可作为定性依据。

有机化合物紫外吸收光谱:反映结构中生色团和助色团的 特性,不完全反映分子特性——结构确定的辅助工具。 计算吸收峰波长,确定共扼体系等。 甲苯与乙苯:谱图基本相同。

εmax , λmax都相同,可能是一个化合物。
标准谱图库:46000种化合物紫外光谱的标准谱图 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet?
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2. 定量分析
吸光度: A= ε b c

quantitative analysis

依据:朗伯-比耳定律

透光度:-lgT = ε b c 灵敏度高:

εmax:104~105 L· mol-1 · cm -1(比红外光谱大)
测量误差与吸光度读数有关:A=0.434,读数相对误差最小。

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第七章 荧光与磷光光谱分析法
molecular fluorescence and phosphorescence analysis

第一节 分子荧光和磷光
molecular fluorescence and phosphorescence

第二节 荧光和磷光分析法
molecular fluorescence and phosphorescence analysis

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第一节 分子荧光与磷光
molecular fluorescence and phosphorescence

一、分子荧光与磷光产生过程
luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence

二、激发光谱与荧光光谱
excitation spectrum and fluore-scence spectrum

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一、荧光与磷光的产生过程
luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence

1. 分子能级与跃迁
分子能级比原子能级复杂: 在每个电子能级上,都存在振动、转动能级。 基态(S0 )→激发态(S1、S2、激发态振动能级):吸收特定 频率的辐射;量子化;跃迁一次到位。 激发态→基态:多种途径和方式(见能级图);速度最快 、激发态寿命最短的途径占优势。 第一、第二、…电子激发单重态 S1 、S2… ; 第一、第二、…电子激发三重态 T1 、 T2 … ;
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2.电子激发态的多重度
电子激发态的多重度:M=2S+1 S为电子自旋量子数的代数和。 平行自旋比成对自旋稳定(洪特规则),三重态能级比相 应单重态能级低。 大多数有机分子的基态处于单重态。 S0→T1 禁阻跃迁; 通过其他途径进入 (见能级图);进入的 几率小。

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3.激发态→基态的能量传递途径
电子处于激发态是不稳定状态,返回基态时,通过辐射 跃迁(发光)和无辐射跃迁等方式失去能量; 传递途径 辐射跃迁 无辐射跃迁

荧光

延迟荧光

磷光

系间跨越

内转移

外转移

振动弛预

激发态停留时间短、返回速度快的途径,发生的几率大, 发光强度相对大。 荧光:10-7~10 -9 s,第一激发单重态的最低振动能级→基态 磷光:10-4~10s;第一激发三重态的最低振动能级→基态
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非辐射能量传递过程
振动弛豫:同一电子能级内以热能量交换形式由高振动能级 至低相邻振动能级间的跃迁。发生振动弛豫的时间10 -12 s。 内转换:同多重度电子能级中,等能级间的无辐射能级交换。 通过内转换和振动弛豫,高激发单重态的电子跃回第一 激发单重态的最低振动能级。 外转换:激发分子与溶剂或其他分子之间产生相互作用而转 移能量的非辐射跃迁。 外转换使荧光或磷光减弱或“猝灭”。 系间跨越:不同多重态,有重叠的转动能级间的非辐射跃迁。 改变电子自旋,禁阻跃迁,通过自旋—轨道耦合进行。
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辐射能量传递过程
荧光发射:电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态( 多为 S1→ S0跃迁),发射波长为 λ ‘2的荧光; 10-7~10 -9 s 。 由图可见,发射荧光的能量比分子吸收的能量小,波长 长; λ ‘2 > λ 2 > λ 1 ; 磷光发射:电子由第一激发三重态的最低振动能级→基态( T1 → S0跃迁); 电子由S0进入T1的可能过程:( S0 → T1禁阻跃迁) S0 →激发→振动弛豫→内转移→系间跨越→振动弛豫→ T1 发光速度很慢: 10-4~100 s 。 光照停止后,可持续一段时间。
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内转换 S2 S1 能 量 吸 收

内转换 振动弛豫 系间跨越

T1 发 射 荧 光

T2

外转换

发 射 磷 振动弛豫 光

S0
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λ

λ2

λ ′2

λ3

分子产生荧光必须具备的条件
(1)具有合适的结构; (2)具有一定的荧光量子产率。 荧光量子产率(?):

发射的光量子数 ?= 吸收的光量子数
荧光量子产率与激发态能量释放各过程的速率常数有 关,如外转换过程速度快,不出现荧光发射。

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二、激发光谱与荧光(磷光)光谱
excitation spectrum and fluore-scence spectrum

1.荧光(磷光)的激发光谱曲线
固定测量波长(选最大发射波长), 荧光(磷光)的发射强 度与激发光波长的关系曲线 (图中曲线I ) 。

激发光谱曲线的最高处,处于激发态的分子最多,荧光 强度最大。
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2.荧光(发射)光谱与磷光(发射)光谱
固定激发光波长 (选最大激发波长), 荧光(或磷光) 的发 射强度与其光波长关 系曲线(图中曲线II 或III)。

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荧光发射光谱 荧光激发光谱

磷光光谱

200

260 320 380 440 500 560 室温下菲的乙醇溶液荧(磷)光光谱

620

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第二节 荧光与磷光分析法
molecular fluorescence and phosphorescence analysis

一、 仪器与结构流程 instrument and general process 二、 荧光分析法和应用 fluorescence analysis and application 三、 磷光分析法的应用 phosphorescence analysis and application

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一、仪器结构流程
测量荧光的仪器主要由四个部分组成:激发光源、样品 池、双单色器系统、检测器。 特殊点:有两个单色器,光源与检测器通常成直角。 基本流程如图: 单色器:选择激发光波长 的第一单色器和选择发射 光(测量)波长的第二单色 器 光源:灯和高压汞灯,染 料激光器(可见与紫外区) 检测器:光电倍增管
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仪 器 光 路 图

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磷光检测
荧光计上配上磷光测量附件即可对磷光进行测量。在有 荧光发射的同时测量磷光。 测量方法: (1)通常借助于荧光和磷 光寿命的差别,采用磷光 镜的装置将荧光隔开。 (2)采用脉冲光源和可控 检测及时间分辨技术。 室温测量时,不需要 杜瓦瓶。
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二、荧光分析方法与应用
1. 特点
(1)灵敏度高 比紫外-可见分光光度法高2~4个数量级; 检测下限:0.1~0.1μg/cm-3 相对灵敏度:0.05mol/L 奎宁硫酸氢盐的硫酸溶液。 (2)选择性强 既可依据特征发射光谱,又可根据特征吸收光谱; (3)试样量少 缺点:应用范围小。
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2.定量依据与方法
(1) 定量依据
荧光强度 If正比于吸收的光量Ia和荧光量子效率? : If = ? Ia 由朗-比耳定律: Ia = I0(1-10-ε l c ) If = ? I0(1-10-ε l c ) = ? I0(1-e-2.3ε l c ) 浓度很低时,将括号项近似处理后: If = 2.3 ? I0 ε l c = Kc
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(2)定量方法
标准曲线法: 配制一系列标准浓度试样测定荧光强度,绘制标准曲 线,再在相同条件下测量未知试样的荧光强度,在标准曲线 上求出浓度。 比较法: 在线性范围内,测定标样和试样的荧光强度,比较。

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3.荧光分析法的应用
(1)无机化合物的分析
与有机试剂配合物后测量;可测量约60多种元素。 铍、铝、硼、镓、硒、镁、稀土常采用荧光分析法; 氟、硫、铁、银、钴、镍采用荧光熄灭法测定; 铜、铍、铁、钴、锇及过氧化氢采用催化荧光法测定; 铬、铌、铀、碲采用低温荧光法测定; 铈、铕、锑、钒、铀采用固体荧光法测定。

(2)生物与有机化合物的分析
见表
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三、磷光分析法的应用
1.稠环芳烃分析
采取固体表面室温磷光分析法快速灵敏测定稠环芳烃和 杂环化合物(致癌物质);见表

2.农药、生物碱、植物生长激素的分析
烟碱、降烟碱、新烟碱,2,4-D等分析 检测限0.01 μg/cm-3

3.药物分析和临床分析
见表
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第八章 红外吸收光谱分析法
第一节 第二节 第三节 第四节 红外吸收光谱的基本基本原理 红外光谱与分子结构 红外光谱仪器 红外光谱定性分析 basic principle of Infrared absorption spectroscopy infrared spectroscopy and molecular structure infrared absorption spectrophotometer qualitative analysis of Infrared spectra
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一、概述 introduction 二、红外吸收光谱产生的 条件 第一节 condition of Infrared 红外光谱分析基本原理 absorption spectroscopy 三、分子中基团的基本振 principle of Infrared 动形式 basic vibration of the group spectroscopy in molecular 四、红外光谱谱图特征 characteristics of infrared absorption spectra

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一、概述
introduction
分子中基团的振动和转动能级跃迁产生:振-转光谱 近红外区-中红外区-远红外区

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红外光谱图

纵坐标为吸收系数,或透过率。 横坐标为波长λ( μm )或波数1/λ ,单位:cm-1 谱图特征:峰数,峰位,峰形,峰强。
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红外光谱分析的应用:
(1)化合物的结构与结构参数分析:红外电磁辐射→分 子振动能级跃迁→红外光谱→基团和官能团→分子结构 (标准谱库) (2)化学组成定性分析 (3)化学组成定量分析:特征峰的强度。 (主要是有机化合物)

红外光谱分析的特点:
高特征性;各种物质状态的适用性;低试样用量性;快 速性和简便性;标准谱库齐全。 灵敏度偏低(定量分析精度低); 谱带重叠(需分离和提纯)。
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二、红外吸收光谱产生的条件
condition of Infrared absorption spectroscopy
满足两个条件: (1)辐射具有能满足物质产生振动跃迁所需的能量(共振); (2)辐射与物质间有相互偶合作用。 对称分子:没有偶极矩,辐 射不能引起共振,无红外活性。 如:N2、O2、Cl2 等。 非对称分子:有偶极矩,红 外活性。 偶极子在交变电场中的作用示 意图——
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(动画)

分子振动方程式
双原子分子的简谐振动及其频率
化学键的振动类似于连接两个小球的弹簧

分子的振动能级(量子化): E振=(V+1/2)hν

ν :化学键的 振动频率;
V :振动量子数。
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任意两个相邻的能级间的能量差为:

h Δ E = hν = 2π 1 ν = = λ 2πc 1 k

k

μ μ
= 1307 k

μ

K化学键的力常数,与键能和键长有关,

μ为双原子的折合质量 μ =m1m2/(m1+m2)
发生振动能级跃迁需要能量的大小取决于键两端原子的 折合质量和键的力常数,即取决于分子的结构特征。
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表 某些键的伸缩力常数(毫达因/埃)

键类型 力常数 峰位

—C≡C — > —C =C — > —C — C — 15 ? 17 9.5 ? 9.9 4.5 ? 5.6 4.5μm 6.0 μm 7.0 μm

化学键键强越强(即键的力常数K越大)原子折合质量 越小,化学键的振动频率越大,吸收峰将出现在高波数区。
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例题: 由表中查知C=C键的K=9.5 ? 9.9 ,令其为 9.6, 计算波数值。
1 v= = λ 2πc 1 9.6 ?1 = 1307 = 1307 = 1650cm μ μ 12 / 2 k k

正己烯中C=C键伸缩振动频率实测值为1652 cm-1

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三、分子中基团的基本振动形式
basic vibration of the group in molecular

两类基本振动形式:
(1)伸缩振动 (2)变形振动
亚甲基

(动画)

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甲基的振动形式
伸缩振动 甲基: 对称 υs(CH3) 2870 ㎝-1 变形振动 甲基 对称δs(CH3)1380㎝-1
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不对称 υas(CH3) 2960㎝-1

不对称δas(CH3)1460㎝-1

四、红外吸收光谱谱图特征
intensity of Infrared absorption bend

峰位、峰强与峰数
(1)峰位 化合物分子(或基团)的化学键力常数K越大, 原子折合质量越小,键的振动频率越大,吸收峰将出现在高 波数区(短波长区);反之,出现在低波数区。

例1

水分子

(非对称分子)

(动画)
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(2)峰强 取决于该正则振动的偶极距的变化大小、相应 能级跃迁的几率和试样的浓度——定量分析基础。 吸收峰强度 ∝ 偶极矩的平方 偶极矩变化——结构对称性; 对称性差→偶极矩变化大→吸收峰强度大 符号:s(强);m(中);w(弱);vs;vw 红外吸收峰强度比紫外吸收峰小2~3个数量级。

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(3)峰数 红外吸收的峰数与分子正则振动的数目[3n-5(6)] 有关,同时考虑偶极距变化和振动简并及倍频的影响。 例2 CO2分子(有一种振动无红外活性)

(动画)

基频与倍频:由基态跃迁到第一激发态,产生一个强 的吸收峰,基频峰。由基态直接跃迁到第二激发态,产生 一个强度很弱的吸收峰,倍频峰。 E振=(V+1/2)hν
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选择定则ΔV = ± 1

C2H4O
O
H

1730cm-1

1165cm-1

H H H

C
2720cm-1

C

δ(CH3)1460 cm-1,1375 cm-1。 ν(CH3)2930 cm-1,2850cm-1。

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第二节

红外光谱与分子结构

infrared spectroscopy and molecular structure

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红外吸收光谱的基团频率
group frequency in IR
与一定结构单元相联系的、在一定范围内出现的化学键振 动频率——基团特征频率(特征峰)。 例: 2800 ? 3000 cm-1 —CH3 特征峰; 1600 ? 1850 cm-1 —C=O 特征峰。 基团所处化学环境不同,特征峰出现位置变化(化学位移) —CH2—CO—CH2— —CH2—CO—O— —CH2—CO—NH—
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1715 cm-1 1735 cm-1 1680 cm-1

酮 酯 酰胺

红外光谱信息区
常见的有机化合物基团频率出现的范围:4000 ? 670 cm-1 依据基团的振动形式,分为四个区: (1)4000 ? 2500 cm-1 X—H伸缩振动区(X=O,N,C,S) (2)2500 ? 1900 cm-1 三键,累积双键伸缩振动区 (3)1900 ? 1200 cm-1 双键伸缩振动区 (4)1200 ? 670 cm-1 X—Y伸缩, X—H变形振动区

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基团吸收 带数据

       

特 征 吸 收 带 ( 伸 缩 振 动 )               

          含 氢 化 学 键

                                          活 泼 氢  不 饱 和 氢  饱 和 氢 

基团吸收带数据
O-H N-H P-H S-H     ≡ C-H       A r- H    =C-H -CH3  CH2 -CH    C ≡ C    C ≡ N R 2C = O RHC=O C=C C-O C-N C-C C-C-C C-N-O H-C=C-H R - A r- H H-C-H 3630 3350 2400 2570 3330 3060 3020 2960,2870 2926,2853 2890 2050 2240 1715 1725 1650 1100 1000 900 <500 ≈5 0 0 960(反) 650-900 1450

三 键  双 键

指 纹 吸 收 带

伸 缩 振 动  变 形 振 动

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常见基团的红外吸收带
=C-H O-H C-H O-H(氢 键) S-H N-H P-H C≡N C≡C C=C C=O C-C,C-N,C-O C-X

N-O N-N C-F C=N

C-H,N-H,O-H 3500
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3000

2500

2000

1500

1000 指纹区

500

特征区

第三节 红外分光光度计
infrared absorption spectrometer

一、仪器类型与结构 types and structure of instruments 二、制样方法 sampling methods 三、联用技术 hyphenated technology

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一、仪器类型与结构
types and structure of instruments
两种类型:色散型 干涉型(傅立叶变换红外光谱仪)

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1. 内部结构

Nicolet公司的 AVATAR 360 FT-IR

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2. 傅里叶变换红外光谱仪结构框图
干涉仪 样品室 检测器 显示器 光源 计算机 绘图仪

干涉图

FTS
光谱图

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3. 傅立叶变换红外光谱仪的原理与特点
光源发出的辐射经干涉仪转变为干涉光,通 过试样后,包含的光信息需要经过数学上的傅立 叶变换解析成普通的谱图。 特点:(1) 扫描速度极快(每个瞬间都可以测量全 频率的全部信息,尤其适合仪器联用); (2)不需要分光,信号强,灵敏度高; (3)分辨率高,最高可达0.001cm-1; (4)无法实现双光束系统。
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傅里叶变换红外光谱仪工作原理图
(动画)

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迈克尔干涉仪工作原理图 (动画)

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4. 红外光谱仪主要部件 (1) 光源
能斯特灯:氧化锆、氧化钇和氧化钍烧结制成 的中空或实心圆棒,直径1-3 mm,长20-50mm; 室温下,非导体,使用前预热到800 °C; 特点:发光强度大;寿命0.5-1年; 硅碳棒:两端粗,中间细;直径5 mm,长2050mm;不需预热;两端需用水冷却。

(2) 单色器
光栅:傅立叶变换红外光谱仪不需要分光。
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(3) 检测器
真空热电偶;不同导体构成回路时的温差电现象 涂黑金箔接受红外辐射。 傅立叶变换红外光谱仪采用热释电(TGS)和碲镉 汞(MCT)检测器; TGS:硫酸三苷肽单晶为热检测元件,极化效应 与温度有关,温度高表面电荷减少(热释电),具有 响应速度快、扫描速度高的特点。

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二、制样方法
sampling methods
1)气体——气体池 2)液体: ①液膜法——难挥发液体(BP》80°C) ②溶液法——液体池 溶剂: CCl4 ,CS2常用。 ①研糊法(液体石腊法)

3) 固体:

②KBr压片法 ③薄膜法

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三、联用技术
hyphenated technology

GC/FTIR(气相色谱红外光谱联用) LC/FTIR(液相色谱红外光谱联用) PAS/FTIR(光声红外光谱) MIC/FTIR(显微红外光谱)——微量及微区分析

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第四节 红外光谱定性分析
qualitative analysis of infrared spectra

自学与习题

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思考题
1.从分子的能量构成形式与能级大小讨论: A.何为物质的电子光谱? B.为什么分子的电子光谱是带状光谱而原子的电子光谱 一般是线状光谱? C.分子紫外-可见吸收光谱出现的根源与过程是什么? D.常用紫外-可见吸收光谱仪的测试范围? 2.紫外-可见光谱产生的基本原理: A. 化合物分子紫外-可见吸收产生的常见电子跃迁类型 及其特点是什么? B.过渡金属配合物与稀土金属离子产生紫外-可见吸收 的原因及其特点分别是什么? 3.分子紫外-可见吸收光谱仪的类型及其仪器构成如何?仪 器各个部件的特点有哪些? 4.分子紫外-可见吸收光谱如何进行物质定性和定量分析?
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5.分子荧光与磷光这两种光致发光是如何产生的?其各自的 发光特性如何? 6.分子荧光与磷光光谱产生的基本原理: A. 为什么刚性结构的分子有利于荧光与磷光发射? B.温度变化对荧光与磷光发射量子效率的影响规律如 何?为什么? 7.分子荧光与磷光光谱仪的仪器构成如何?与紫外-可见吸 收光谱仪相比,其特殊性有哪些? 8.分子荧光与磷光光谱如何进行图谱表达? 9.分子荧光与磷光光谱如何进行物质定性和定量分析?
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