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油脂TBA值的测定方法


油脂 TBA 值的测定方法
⒈ 原理: 油脂受到光,热,空气中氧的作用,发生酸败反应,分解出醛,酸之类的化 合物.丙二醛就是分解产物的一种,它能与 TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉红 色化合物,在 538nm 波长处有吸收高峰,利用此性质即能测出丙二醛含量,从而 推导出油脂酸败的程度. ⒉ 试剂: TBA 水溶液:准确称取 TBA0.288g 溶于水中,并稀释至 100

ml(如 TBA 不易 溶解,可加热至全溶澄清,然后稀释至 100ml) ,相当于 0.02M; 三氯乙酸混合液:准确称取三氯乙酸(分析纯)7.5g 及 0.1gEDTA,用水溶 解,稀释至 100ml; 氯仿(分析纯) ; 丙二醛标准溶液:称取 0.315g 1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀释至 1000ml,此溶液每 ml 相当于丙二醛 100ug,置于冰箱内保存.准确吸取 10ml, 稀释至 100ml,此溶液每 ml 相当于丙二醛 10ug,备用. ⒊ 操作步骤: ⑴标准曲线的绘制 准确吸取每相当于丙二醛 10ug 的标准溶液 0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5, 0.6ml 置于纳氏比色管中,加水至总体积为 5ml,加入 5mlTBA 溶液,然后按样品 测定步骤进行,测得光密度绘制标准曲线. ⑵样品测定: 准确称取融化均匀的油脂样品 5-10g,置于 100ml 有盖三角瓶内,加入 25ml 三氯乙酸混合液,振摇半小时(保持油脂融溶状态,如冷结即在 70℃水浴上略 微加热使之融化后继续振摇)用双层滤纸过滤,除去油脂.滤液重复用双层滤纸 过滤一次. 准确移取上述滤液 5ml 置于 25ml 比色管内, 加入 5mlTBA 溶液, 混匀, 加塞, 置于 90℃水浴内保温 40min,取出,冷却 1h,移入小试管内,离心 5min,上清 液倾入 25ml 纳氏比色管中,加入 5ml 氯仿,摇匀,静置,分层,吸出上清液于 532nm 波长比色,对照标准曲线得到微克数(同时做空白试验) . ⒋ 计算 丙二醛含量(mg/kg)=
C × 20 5× m

式中:C——从标准曲线查得丙二醛的微克数(ug) m——样品质量(g)

光密度:TBA(A532/kg)=

A532 × V 1 + V 2) V ( × × 1000 mV 1

式中:V——油脂用三氯乙酸定容体积,ml V1——取滤液体积,ml V2——加 TBA 体积,ml

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