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题目:维生素C的含量测定综述


题目:维生素 的含量测定综述 题目:维生素C的含量测定综述 学生: 学生:张江涛 指导教师: 指导教师:徐洁

摘要:维生素 又称抗坏血酸 又称抗坏血酸, 摘要:维生素C又称抗坏血酸,广泛存在于水 果及蔬菜中,柑桔、番茄、辣椒、苹果、 果及蔬菜中,柑桔、番茄、辣椒、苹果、鲜 猕猴桃、豆芽、甘蓝、 枣、猕猴桃、豆芽、甘蓝、洋葱等果蔬中均 具有较高的含量。由于维

生素C具有较强的还 具有较高的含量。由于维生素 具有较强的还 原性,对光敏感, 原性,对光敏感,氧化后的产物称为脱氢抗 坏血酸,脱氢抗坏血酸仍然具有生理活性。 坏血酸,脱氢抗坏血酸仍然具有生理活性。 本文主要介绍了几种测定维生素C含量的方法 含量的方法, 本文主要介绍了几种测定维生素 含量的方法, 二氯靛酚滴定法、紫外测定法、 如:二氯靛酚滴定法、紫外测定法、碘滴定 荧光法、 , -二硝基苯肼法、 法、荧光法、2,4-二硝基苯肼法、等。并 对他们的优缺点进行了评论。 对他们的优缺点进行了评论。一下就介绍几 种方法

大纲
? ? ? ? ? ? ? ? 二氯酚靛酚法 紫外测定法 碘滴定法 荧光法 2,4-二硝基苯肼法 , - 前几种方法的综述 其他方法 结尾

二氯酚靛酚法
? 原理:维生素C具有很强的还原性。它可分为还原型和脱 原理: 氢型(氧化型)。根据它具有的还原性质可测定其含量。 ? 注意事项: 整个操作过程要迅速,防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定 过程一般不超过2分钟。因为在本滴定条件下,一些非维 生素C的还原性物质也可与2,6-二氯酚靛酚发生反应,影 响结果。 3. 滴定所用2,6-二氯酚靛酚的量应在1-4毫升之间,超出 或低于此范围,应增减样品液用量或改变提取液稀释度。 4. 2%草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用,而1%草酸无此 作用

紫外测定法 ? 原理:根据维生素C具有对紫外光产生吸收、 原理: 对碱不稳定的特性,在243nm处测定样品 液与碱处理样品液两者吸光度值之差,并 通过标准曲线,即可计算出维生素C的含量 ? 优点:紫外测定法是维生素C快速测定的方 法,操作简单,不受其它还原性物质等成 分的干扰。 。

碘滴定法
? 原理 维生素C又称抗坏血酸Vc,分子式C6H8O6。维生素C易溶于水, Vc具 有还原性,可被I2定量氧化,因而可用I2标准溶液直接测定。其滴定 反应式:C6H8O6+I2= C6H6O6+2HI ? 滴定过程中应注意的问题 ? ⑴滴定过程中,要保持缓慢滴定,同时要晃动锥形瓶。这样既可以防 止碘溶液过量,又可以使碘溶液与被滴定溶液充分混合。 ? ⑵滴定标准维生素C溶液时,碘溶液的用量较大,当锥形瓶内的溶液 出现棕红色时,已接近氧化还原反应的终点,此时,更要放慢滴定的 速度。 ? ⑶每次实验前,都要重新滴定标准维生素C溶液,得出所用的碘溶液 量。因为不同的维生素C药片之间,以及每次所配制的碘溶液(或可溶 性淀粉溶液)之间,可能存在着微量的差异,这种差异将导致所用的 碘溶液的量不同。 ? ⑷有时仅仅通过观察颜色,不容易确定氧化还原反应是否达到终点。 这时,可以暂时记下所需的碘溶液的量,继续缓慢滴入碘溶液0 5 min, 如果这时的颜色比第一次读数时变得更蓝,而且0 5 min 后不褪色, 则应以第二次所需的碘溶液量为准;如果颜色不再变蓝,则应以第一 第一 次的读数为准。 次的读数为准。

荧光法 ? 原理:样品中还原型坏血酸经活性炭氧 化成脱氢型抗坏血酸后,与邻苯二胺 (OPOA)反应生成具有荧光的喹喔啉 (quinoxaline),其荧光强度与脱氢抗 坏血酸的浓度在一起条件下成正比,以 此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸 的总量 注意事项:全部实验过程应避光。

?

2,4-二硝基苯肼法 , -
? 原理 总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样 品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸, 再与2,4-二硝基苯肼作用生成红氏脎,脎的含量与 总抗坏血酸含量成正比,进行比色测定。 注意事项: 1. 若溶液中含有糖,硫酸加得太快,溶解热会使溶液 变黑。 2.试管自冰水中取出后,颜色会继续变深,所以,加 入硫酸后30min应准时比色 3.全部实验过程应避光

? ? ? ?

二氯酚靛酚法

该法简便易行,但有下列缺点 。在生物组织内和组织提取液中, 该法简便易行,但有下列缺点:1。在生物组织内和组织提取液中, 抗坏血酸能以脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的形式存在。 抗坏血酸能以脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的形式存在。它们 同样具有维生素的生理功能,但不能将2, 二氯酚靛酚还原脱 同样具有维生素的生理功能,但不能将 ,6-二氯酚靛酚还原脱 。(总抗坏血酸的量常用 总抗坏血酸的量常用2, 二硝基苯肼法和荧光分光光度 色。(总抗坏血酸的量常用 ,4-二硝基苯肼法和荧光分光光度 法测定) 生物组织提取物和生物体液中常含有其它还原性物质 生物组织提取物和生物体液中常含有其它还原性物质, 法测定)2.生物组织提取物和生物体液中常含有其它还原性物质, 其中有些在同样的条件下也可使2, 二氯酚靛酚还原脱色 二氯酚靛酚还原脱色。 其中有些在同样的条件下也可使 ,6-二氯酚靛酚还原脱色。3. 在生物组织中,常有色素类物质存在, 在生物组织中,常有色素类物质存在,给滴定终点的观察造成 困难 紫外测定法是维生素C测定的方法,操作简单, 紫外测定法是维生素 测定的方法,操作简单,不受其它还原性 测定的方法 物质等成分的干扰。 物质等成分的干扰。 荧光法利用硼酸对脱氢抗坏血酸的掩蔽作用可测出杂质的荧光 从而提高方法的专一性。荧光法具有灵敏度较高, 值,从而提高方法的专一性。荧光法具有灵敏度较高,选择性 易于操作等优点,但此方法易受仪器条件的限制, 好,易于操作等优点,但此方法易受仪器条件的限制,本方法 适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 ,4-二硝基苯肼法是比色法,易受杂质干扰,灵敏度较低,而 -二硝基苯肼法是比色法,易受杂质干扰,灵敏度较低, 荧光法的灵敏度高于比色法2~ 个数量级 另外, , - 个数量级。 荧光法的灵敏度高于比色法 ~3个数量级。另外,2,4-二硝 基苯肼法采用85%的浓硫酸作溶剂,实验时不易操作。另外, , 基苯肼法采用 %的浓硫酸作溶剂,实验时不易操作。另外,2, 4-二硝基苯肼法采用 %的浓硫酸作溶剂,实验时不易操作。 -二硝基苯肼法采用85%的浓硫酸作溶剂,实验时不易操作。

紫外测定法 荧光法 2,4-二硝基苯 , - 肼法是比色法

通过比较,我认为紫外测定法比较好。 通过比较,我认为紫外测定法比较好。 以下再介绍几种新方法; 以下再介绍几种新方法;
近红外漫反射光谱分析法: 近红外漫反射光谱分析法:
近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)自1965年首次应用于复杂农业样品分析后,因其具 有样品处理简单、 分析速度快等优点,逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、药物分析等 领域[1,2]。在药物分析中,NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。 维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物,其药典[3]含量测定方法为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱 技术直接测定维生素C含量,样品无需预处理,方法简便,结果可 靠。

原子吸收法间接测定法: 原子吸收法间接测定法:
据报道,目前食品中维生素C含量的测定方法主要有荧光法、分光光度法、 碘量法、2,6-二氯靛酚 滴定法等。但这些方法存在操作过程复杂、所用试剂不稳定、速度慢、背景干扰大等局限性。特别是在 目前常用的化学方法分析测定中,由于果蔬获得的浸提液,大多带有颜色而导致滴定终点不明显,使测 定准确度降低的问题一直不能解决。而采用原子吸收法间接测定果蔬中维生素c的含量,则可避免果蔬中 色素的影响,效果较好。 试验原理: 维生素C的分子式为C6H8O5,因其结构中含有烯二醇基团而具有还原性。在酸性介质中可将Cu2+ 定量 地还原为Cu+ ,并与SCN-反应生成CuSCN沉淀,在高速离心机下有效地分离出沉淀,小心洗涤后再经 浓硝酸溶解,用原子吸收法测定含铜量,即可推知样品中维生素c的含量。 优缺点: 用原子吸收法间接测定果蔬中维生素c含量,操作简便、快速,切实可行,尤其是能不受果蔬自身颜色的 干扰。要使该方法能在测定常见果蔬及其他食品中维生素C含量等方面得到推广与普及,还有待于进一步 优化改善,使操作更加简单易行。

结尾:维生素C的含量测定的方法有很多,在 结尾:维生素C的含量测定的方法有很多, 这儿我只是介绍了几种常见的,比较好的。 这儿我只是介绍了几种常见的,比较好的。虽 然它们也有各自的缺点, 然它们也有各自的缺点,但随着科技的不断把 发展,新的方法会不断的出现。 发展,新的方法会不断的出现。我相信对于维 生素C的含量测定会越来越易操作, 生素C的含量测定会越来越易操作,越来越精 确


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