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SOP标准操作程序 RF


SOP 标准操作程序
类风湿因子(RF)测定试剂盒
1 实验原理:
病人样品,标准液或质控中的类风湿因子(RF)与包被有人γ -球蛋白的胶乳颗粒发生 免疫反应,形成免疫复合物产生混浊。病人样品产生的浊度与标准液中类风湿因子 (RF)标准产生的浊度来比较,进行计算。

2

标本的收集与处理:

/>2.1 病人准备:
无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

2.2. 抗凝剂:
血清、肝素或 EGTA 血浆,标本最好不要溶血。留取标本后请尽快分离血球 血浆。

2.3 标本的稳定性:
在室温条件下(15~25℃)可以稳定一周。

3

材料:

3.1 材料:
无需配制,开瓶即用,540nm 试剂的空白吸光度超过 1.5ABS 试剂失效。 工作液:R1与R2按9:1混合,2-8℃可稳定20天。 标准品用1ml蒸馏水复溶,2-8℃稳定一个月。

3.2 试剂的贮存: 3.2.1. 3.2.2. 3.2.3
当保存于 2~8℃ ,不开盖情况下至标签的失效期。 开盖后放于仪器中可以稳定 30 天。 开盖后避免污染。

3.3 变质指示:
当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

4

类风湿因子(RF)测定试剂盒(日立7600生化分析仪)

分析参数 分析方法/时间/读点 波长(副/主) 样品量/常规量/稀释量/浓缩量 ul R1/ R2/ R3/ R4 ul ABS 界限 定标参数 定标类型 / 几点定标 范围 单位 计算公式(Y = Ax + B) 参考范围 线性范围 标准范围 标准 1 浓度 0 标准 2 标准 3 标准 4 标准 5 标准 6 标准 0-20 0--160 U/ml A=1,B=0 线性/2 180/ /20 / 2 POINT /10 / /650nm 2 /// 16 – 35

32000/正反应

1/8 标准 1/4 标准 1/2 标准 浓度 浓度 2 浓度 2

样品量 稀释样品量 稀释量

2

2

2

完整的实验参数与操作程序可以在 HITACHI(日立)7600A 全自动生化分析仪用户手 册或《7600A 使用说明书》中查到。

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计算:

采用多点定标法,用RF标准液的吸光度值与相应的RF浓度作图,绘制标准曲线,从标 准曲线上查得血清样品的RF浓度。 RF标准液浓度(IU/ml)见标签。

6 试剂性能概要
采用科美公司规定的参数进行测定,线性范围(或可报告范围)0-160U/L。

7 超出线性范围(或可报告范围)的处理

如样本中(RF)的浓度大于 倍数。

160U/L 时,需对样本进行稀释后再测定,结果乘以稀释

8 方法的局限性
抗干扰能力:胆红素≤20mg/dl,血红蛋白≤10g/L,甘油三酯≤1000mg/dl对测定无干扰。 一些药物等可能会产生干扰。

9 其他必须说明的内容 9.1 9.2 9.3 9.4 9.5
标准度稀释时,应严格按照说明书浓度进行。 胶乳试剂在使用前应轻轻摇匀。 所有的试剂已进行乙肝表面抗原,丙肝抗体和抗艾滋病毒抗体检测(FDA方法) ,

结果阴性。尽管如此,仍应按有传染性来处理。 试剂中含有0.095%叠氮钠,请注意防护。 开瓶后上机试剂,在仪器贮存条件下可稳定 30 天。

10 临床意义
RF 是一种以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体。类风湿性关节炎(RA)患者和约 50%的 健康人体内都存在有产生 RF 的 B 细胞克隆,在变性 IgG(与抗原结合的 IgG)或 EB 病毒直接作用下,可大量合成 RF。健康人产生 RF 的细胞克隆较少,且单核细胞分泌 的可溶性因子可抑制 RF 的产生,故一般不易测出。RF 有 IgG、IgM、IgA、IgD 和 IgE 五类,用凝集试验法测出主要是 IgM 类。多数作者认为,IgM 类 RF 的含量与 RA 的活动性无密切关系;IgG 类 RF 与 RA 患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相 关。IgA 类 RF 见于 RA、硬皮病、Felty 综合症和 SLE,是 RA 临床活动的一个指标。 IgD 类 RF 研究甚少。与 IgE 类 RF 除 RA 外,也见于 Felty 综合症和青年型 RA。在 RA 患者,高效价的 RF 存在并伴有严重的关节功能受限时,常提示预后不佳。在非类 风湿患者中,RF 的阳性率随年龄的增加而增加,但这些人以后发生 RA 者极少。


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