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Waters Alliance HPLC 系统操作规程


Waters Alliance HPLC 系统操作规程
一、准备: 流动相:按方法要求配制流动相,经0.45?m微孔滤膜过滤,纯流动 相超声波脱气1分钟。 样品溶液:按方法要求配制样品溶液,并以过滤或高速离心方式除 去溶液中的固体微粒。 二:开机及平衡系统: 1、打开计算机,等操作系统启动完全 2、打开仪器电源,待仪器各部分自检完成; 将e2695泵密封垫清洗(SealWash)管路(不透明管) 、洗针管路(绿 管)以及ABCD管路分别放入适当的溶剂中 1)Prime seal wash:Diag → Prime seal wash→start,按e2695面板 Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头,直至出口管有液滴流 出,按Halt,停止Prime,再按close关闭界面。 2)Prime needle wash:Diag → Prime needle wash,再选择Prime NdlWash, 清洗进样针1-2次,直至黄管有液体喷出。 Close并Exit, 退出Diag界面。 3)Dry Prime:打开泵抽液阀→Menu/Status → Direct Function → Dry Prime→按照溶剂相互混溶的原则分别对A、B、C、D四路 进行泵灌注,切记完成后将抽液阀关闭。 (注:此操作仅在管路中没有液体时执行,否则直接进入步骤4). 4)Wet Prime:Direct Function → Wet Prime(注:需预先指定用哪 一路流动相,然后再进行此操作)

5)Purge injection:Direct Function → Purge injection 6)设定流速、柱温等参数,平衡系统约30分钟; 3、 运行Empower2软件,点击“运行样品”选择存放数据文件的"项目 ",进入样品采集画面;按“创建方法组”按钮,建立方法组;在右下方仪 器方法下拉菜单中,选取设置好的仪器方法,按“监视器”按钮,观察基 线,待基线平稳,按停止按钮,可准备进样。 三、进样: 将样品放入e2695样品盘中,记录每一样品对应的瓶号; Empower2中,先在“单进样”界面进样一次,若条件适合,确定“运 行时间”; 在“样品”界面编辑样品表,开始自动进样。 四、数据处理及打印: 在Empower2软件中运行“浏览项目”,在“通道”表中打开数据,建立 处理方法; 用建立好的处理方法处理数据; 在“结果”表中选择要打印的结果,选择“报告方法”,打印数据。 五、关机: 实验结束后,首先关闭检测器电源; 在e2695溶剂瓶中换上适当的清洗溶剂,清洗系统约60分钟; 按e2695面板Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头约1分钟;再 选择Prime NdlWash,清洗进样针1-2次;按Menu/Status键进入手动控制 模式,按Direct Function键,选择Purge Injector,冲洗进样器; 降低流速至0,待系统压力回零后,关闭e2695电源。 关闭计算机及显示器电源。



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