当前位置:首页 >> 能源/化工 >>

淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的关系


  24 卷 第 3 期 第   2005 年 3 月

实 验 室 研 究 与 探 索
RESEARCH AND EXPLORATION IN LABORATORY

Vol . 24 No. 3   Mar. 2005  

淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的关系
江培  ,     ,   陆 红

何正平 ,   吴忠良
( 复旦大学 生物科学教学实验中心 生物化学实验室 ,上海 200433)

Abstract : An experiment was designed that combines both qualitative and quantitative experiment on sugar. The content of reducing sugar is measured when the different colors change during the reaction of starch with I2 , and a qualitative result corresponding to a quantitative experiment is reported. When the concentration of substrate starch is 2 gΠ and that of L respectively. Key words : sugar ; color reaction ; content of reducing sugar

α amylase is 0. 5uΠ , the solution shows blue , violet and red for the reaction time of 0~2. 5 minu , 2. 5~5. 5min and 5. 5 2 mL ~13. 5 min respectively. Beyond 13. 5 min , the solution turns to colorless. The decomposition rates of reducing sugar corresponding to the changing point of colors are 45 % ( blue to violet ) , 66 % ( violet to red ) and 76 % ( red to colorless )

1    引 言

α 淀粉为均一多糖 , 单体为 1 ,42 2D2糖苷 。淀粉分 可溶性的直链淀粉和不可溶性的支链淀粉两类 。淀粉 被酸或酶降解是逐步进行的 , 其不同阶段的产物与碘 反应颜色分别为 : 淀粉 ( 遇碘呈蓝色) → 紫色糊精 ( 遇碘 呈紫色) → 红色糊精 ( 遇碘呈红色) → 无色糊精 ( 遇碘无 色) 。 成麦芽糖 。水解过程中不同时间加入碘 , 随着麦芽糖 含量的变化 ,溶液颜色呈现从蓝色 → 紫色 → 红色 → 无
收稿日期 :2004205221 作者简介 : 江培
E2mail : phjiang315 @yahoo. com. cn (1969 - ) , 女 , 博士 , 副教授 。Tel : 021265643446 ;

α 2淀粉酶普遍存在于人 , 动物 , 植物和微生物体 内 ,它与多糖反应是从多糖链的末端向内逐一水解生

摘   : 将糖的定性实验和定量实验相结合 ,我们测定了淀粉遇碘呈不同颜色反应阶段还原糖的含量 , 要 给出定性实验一个量化的结果 。当底物淀粉浓度为 2 gΠ ,加入α L 2淀粉酶为 0. 5 uΠ 时 ,0~2. 5 min 呈 mL 蓝色 ,2. 5~5. 5 min 呈紫色 ,5. 5~13. 5 min 呈红色 , 13. 5 min 后呈无色 。对应颜色变化点还原糖的分解 比率分别为 45 % ( 蓝色 → 紫色) ,66 % ( 紫色 → 红色) , 76 % ( 红色 → 无色) 。 关键词 : 糖 ; 颜色反应 ; 还原糖含量 中图分类号 :Q53 文献标识码 :A 文章编号 :100627167 ( 2005) 0320031202

On the Relationship between Color Reaction of Starch with I2 and Content of Reducing Sugar
(Lab. of Biochemistry , Teaching Center of Biology , Fudan Univ. , Shanghai 200433 , China)
JIANG Pei2hong ,   LU Hong ,  HE Zheng2ping ,  WU Zhong2liang

2  实验部分

2. 1   仪器与试剂

色的变化 。一个α 2淀粉酶单位定义为 :37 ° ,pH 6. 8 C 条件下 1 min 从淀粉中释放 1 mg 麦芽糖所需要的酶 量。 生物化学实验课中通常会以淀粉与碘的颜色反应 作为定性实验 ,总糖和还原糖的测定作为定量实验 ,但 是不同颜色反应阶段还原糖的含量是多少 , 也就是给 出定性实验一个量化的结果 , 这方面尚未有可借鉴的 结果 。我们在教学中发现 , 应该教会学生在实验中如 何将定性的实验量化 , 尽早培养同学们良好的科研作 风 ,因此 ,在实践中探讨了淀粉与碘的颜色反应与还原 糖含量的关系 。
(1) 仪器 。 试管及试管架 , 容量瓶 , 恒温水浴装

置 ,752 紫外光栅分光光度计 。

32

     实

              验 室 研 究 与 探 索
2. 2   实验原理

第 24 卷  

浓度分别为葡萄糖对应浓度的 3 倍 , 其他用量及操作 完全同葡萄糖标准曲线的绘制 。 2. 3. 2  淀粉中总糖的测定   取可溶性淀粉 0. 4 g , 加 15 mL 水溶解后加入 10 mL 6 molΠ HCl , 沸水浴水解 3 L

到 1 L ,测定还原糖的含量 ,根据稀释倍数 ,算出淀粉中 总糖值 。 2. 3. 3   淀粉酶水解过程中与碘作用呈不同颜色变化 的时间点的确定   α 将 2淀粉酶稀释成不同的 单位数 ,0. 5 mL 淀粉加入 0. 5 mL 不同单位的α 2淀粉 酶 ,不同时间取样加入碘液 ,确定最佳α 2淀粉酶用量和 原糖含量的测定   根据 1. 3. 3 的实验结果 ,在 不同颜色变化的时间点测定相应的还原糖的含量 , 计 算还原糖占总糖的百分比 。

淀粉酶水解过程中与碘作用呈不同颜色变化的时间 点。 2. 3. 4   淀粉酶水解过程中与碘作用呈不同颜色时还

3  结果与讨论

(2) 试剂 。磷酸缓冲液 ( pH 6. 8 ,0. 2 molΠ ) 。可 L α 溶性淀粉溶液 ( 2 gΠ , 以 pH 6. 8 磷酸缓冲液配制) 。 2 L

淀粉酶粉 ( 购自中国医药集团上海化学试剂公司 , 50 uΠ ) ( 1 μ Π , 以 pH 6. 8 磷酸缓冲液配制 ) 。HCl ( 6 mg gL molΠ ) 。NaOH ( 6 molΠ ,2 molΠ ) 。还原糖显色剂 (DNS L L L 试剂) ( 3 ,52二硝基水杨酸 6. 3 g , 苯酚 6 g , 亚硫酸钠 6 g , 酒石酸钾钠 182 g , 2 molΠ 氢氧化钠 262 mL , 定容 L 至 1 L ) 。碘液 ( 结晶碘 5 g , 碘化钾 10 g , 定容至 500 mL ,贮于棕色瓶内) 。葡萄糖标准溶液 ( 1 μ Π ) 。麦芽 gL 糖标准溶液 ( 3 μ Π ) 。 gL
1 2 3

色的氨基化合物 , 该物质在 540 nm 处有特征吸收峰 。 在一定的浓度范围内 , 还原糖的量和棕红色物质颜色 的深浅程度成一定的比例关系 , 因此可以通过测定反 应后 540 nm 的光吸收而对还原糖进行定量 。 2. 3   实验方法 2. 3. 1   还原糖标准曲线的绘制 ( 1) 葡萄糖标准曲线的绘制 。取 7 只试管 , 编号 后按表 1 操作 。

表1 

葡 萄 糖 液

(ng L 浓度Π ? - 1 )

100

200

300

用量Π mL

0. 5 -

0. 5 -

0. 5 -

蒸馏水Π mL μ 含糖量Π g

50

100

150

各管摇匀 ,置沸水浴 5 min 后冷水冷却
4. 0

蒸馏水Π mL
OD540 nm

4. 0

4. 0

4. 0

以 7 号管为对照 , 测定各管的 OD540 nm 值 , 以葡萄糖含 量为横坐标 ,以 OD540 nm 值为纵坐标 ,作出标准曲线 。

(2) 麦芽糖标准曲线的绘制 。7 只试管中麦芽糖

加入量为 100 倍稀释 ,即 0. 5 单位时 ,颜色变化较易观 察 ,分别为 :0~2. 5 min 呈蓝色 ,2. 5~5. 5 min 呈紫色 , 5. 5~12 min 呈红色 ,12~13. 5 min 呈黄色 ,13. 5 min 后 呈无色 。对应颜色变化点糖的分解比率分别为 45 % (蓝色 →紫色 ) , 66 % ( 紫色 →红色 ) , 76 % ( 红色 →无 色) 。 为了增加同学们的实验兴趣 , 同时也可以节约实 验经费 ,又尝试了让同学们自己取唾液淀粉酶 ,先测定 自己的唾液淀粉酶的活力 , 然后适当稀释做淀粉与碘 的颜色反应与还原糖含量的关系实验 ,实验效果更好 。 参考文献 :

h 后冷却 ,用 6 molΠ NaOH 调 pH 到中性 , 蒸馏水定容 L

经过多次反复实验 ,按文中条件 ,得到当α 2淀粉酶

[1 ]   张丽霞 . α 2淀粉酶的碘2淀粉改良比色法 [J ] . 上海医学检验杂志 , 1994 ,9 (3) : 146. [2 ]   陆荣荣 . 淀粉遇碘变色的机理 [J ] . 实验教学与仪器 , 1995 (1) :18. [3 ]   李建武 ,等 . 生物化学实验原理和方法 [ M] . 北京 : 北京大学出版

社 , 1997.

[ 4 ]     ,等 . 不同条件下淀粉遇碘显色反应现象研究 [J ] . 内蒙古 乌 云

教育学院学报 ( 自然科学版) ,1999 ,12 (2) : 65.
(1) : 62.

[5 ]   段穗芳 . 碘与淀粉反应条件的探讨 [J ] . 中等医学教育 , 2000 ,18 [6 ]   钟俊英 . 影响淀粉与碘反应因素的初探 [J ] . 化学教学 , 2001 ,3 : 8. [7 ]   聂纪英 . 淀粉与碘的显色反应 [J ] . 生物学教学 , 2001 ,26 (11) : 46.

3 ,52二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红
试管号
4 5 6 7 400 500 600 0. 5 0. 5 0. 5 0. 5 0 200 250 300 4. 0 4. 0 4. 0


相关文章:
实验二 糖类的颜色反应
2. 陆红 ,何正平 ,吴忠良 ,淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的关 系[J]. 实验室研究与探索,2005,24(3):31-32 3. 杨万政 ,对 Molisch 实验两 个 ...
碘与淀粉显色影响因素的实验探究
反应 的影响,找出淀粉显色的最佳条件,改进与...的颜色受混合溶液的温度、酸碱性、溶剂、试剂浓度等...直链淀粉是由葡萄糖以 α-1,4-糖苷键结合而成的...
生化实验思考题参考答案
麦芽糖和葡萄糖遇碘不 变色。因此反应颜色如为...答:淀粉与糊精无还原性,或还原性很弱,对本尼迪克特...酶浓度改变而改变,也与酶的纯度无关,因此是酶的 ...
糖类的颜色反应
2. 陆红 ,何正平 ,吴忠良 ,淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的 关系[J]. 实验室研究与探索,2005,24(3):31-32 3. 杨万政 ,对 Molisch 实验两 个 问题...
淀粉与碘显色现象探究的微型实验设计
淀粉与碘显色现象探究的微型实验设计 摘要 将...“淀粉与碘显色因素探究”设计成微型实验,对浓度、...在碱性溶液中,I2 与碱液反应,颜色变浅 直至褪色。...
碘与淀粉显色反应探究
淀粉显色现象探究 淀粉显色现象探究摘要 淀粉的显色反应是检验淀粉的验证性实验。本文分别通过测定不 同浓度、不同溶剂、不同酸碱性、不同温度...
生物化学实验课后练习
以内,与蒽 酮反应生成的 颜色深浅与糖量 成正比。...当淀粉分子含量少于 时, 此时遇碘就为无色或碘色...在一定浓度范围吸光度与浓度成直线关系。在偏磷酸...
淀粉与碘反应的本质
淀粉与碘反应的本质_理学_高等教育_教育专区。介绍碘与淀粉反应的机理 淀粉是一种高分子化合物。淀粉与碘反应的本质是生成了一种包合物(碘分子被包在了淀粉...
生物化学实验
蛋白质的沉淀反应、 变性作用的原理及其 相互关系。...实验三 糖的性质实验及总糖和还原糖含量测定【实验...(三)淀粉与碘的作用:取 1 支大试管加 10 滴 ...
食品化学实验
加热反应, 一定时间后目视颜色变化,可以观察反应的...由于淀粉老化(至少是与淀粉老化) 有关,所以淀粉老化...的酶水解、量法分析还原糖等重要的基本技能方法...
更多相关标签:
淀粉中还原糖的含量 | 淀粉是还原糖吗 | 淀粉是不是还原糖 | 还原糖含量的测定 | 还原糖含量 | 面粉中还原糖含量 | 马铃薯还原糖含量 | 还原糖含量测定 |