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(一)H2O2
(-)/(*) · 活性氧包括以自由基形式存在的超氧化物自由基 O 羟自由基 OH , 以及不以自由基形 2, (-)/(*) ·

活性氧的来源众多,如吸烟、 式存在的 H2O2、脂质过氧化物 ROOH 等。活性氧的来源众多,如吸烟、多形核白细胞或单核 细胞的激活, 细胞的激活,内毒素、 内毒素、TNFα 的损伤作用很可能也是通过

ROS 来实现的 生理过程中的重要发病介质, ARDS、缺血再灌注损伤等。 生理过程中的重要发病介质,如 ARDS、缺血再灌注损伤等。 过氧化氢(H 对内皮细胞的毒性效应早为人们所重视, 过氧化氢(H2O2)对内皮细胞的毒性效应早为人们所重视,但是以往的研究多着重 H2O2 的急性毒性效应,而对其急性作用去除后内皮细胞的迟发性改变研究较少。 的急性毒性效应,而对其急性作用去除后内皮细胞的迟发性改变研究较少。我们以 Chen 等
[ 2] [ 1]

。ROS 是许多病理

报道的方法, PMVEC, 增殖代谢及调亡的影响。 报道的方法,经改良后培养了 PMVEC,观察低浓度 H2O2 对 PMVEC 增殖代谢及调亡的影响。

1.过氧化氢处理 K562 细胞中 JWA 基因的表达及其与 DNA 损伤和凋亡的关系 0.01、0.1、1 mmol/L 的 H2O2 K562 细胞 用 0.1 mmol/L H2O2 处理不同时间(6 ~ 48 h)和不同浓度(0.5 ~ 1 000 ?mol/L)的 H2O2 处 理 48 h 分别诱导 K562 细胞凋亡,在低剂量 H2O2(0.01 mmol/L)处理时,JWA 和热休克蛋白的 表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、 hsp27 和 p53 的表达均显著增高 2 低浓度 H2O2 对肺微血管内皮细胞的迟发效应——凋亡 H2O2DMEM 溶液:0,5,10,20,50,100 ?mol/L 肺微血管内皮细胞(PMVEC) 3 H2O2 诱导 PC12 细胞凋亡的作用机制 用终浓度分别为 0~400nmol/L H2O2 处理 PC12 细胞 8h, H2O2 浓度从 25~400nmol 随 /l。增加,PC12 细胞存活率逐渐降低(P〈0.05) : 4 H2O2 预处理对PC12 细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用 PC12 细胞经10?mol·L - 1 H2O2 预处理90 min 后,20~60?mol·L - 1H2O2 对PC12 细胞 生长的抑制程度明显下降, H2O2 (20 、30?mol·L - 1) 对PC12 细胞凋亡的诱导作用明显 受到抑制,BD2 NF 的表达强度增强 (二) LPS 二 LPS刺激可诱导巨噬细胞的 刺激可诱导巨噬细胞的NF2κB 活化、NO 分泌并最终导致细胞凋亡 而特异性 分泌并最终导致细胞凋亡,而特异性 刺激可诱导巨噬细胞的 κ 活化、 PKC 抑制剂 抑制剂(Cal C) 和NF2κB 阻断剂 能在不同程度上抑制LPS 的生物活性 κ 阻断剂(PDTC) 能在不同程度上抑制 作用。。位于G- 菌外膜中的脂多糖 lipopolysaccharide ,LPS) ,亦称内毒素 是其致病的 。。位于 菌外膜中的脂多糖( 亦称内毒素,是其致病的 作用。。位于 亦称内毒素 主要物质基础。 LPS通过持续刺激机体单核巨噬细胞系统 使之产生大量的细胞因子、 通过持续刺激机体单核巨噬细胞系统,使之产生大量的细胞因子 活 主要物质基础。 通过持续刺激机体单核巨噬细胞系统 使之产生大量的细胞因子、 性氧、溶酶体酶、 等生物活性物质,引起细胞损伤和凋亡 引起细胞损伤和凋亡,最终导致失控性炎症反应 性氧、溶酶体酶、NO 等生物活性物质 引起细胞损伤和凋亡 最终导致失控性炎症反应 1 ①正常对照组,此组细胞不接受任何刺激; ②LPS(Sigma) 处理组,用1mgPL LPS 作用 60 min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h 后测定培养液中NO 含量; ③Cal C(Sigma) 阻断组(Cal C + LPS) ,以300nmolPL Cal C 预处理30 min 后,再用1mgPL LPS 刺激60 min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h后测定培养液中NO 含量; ④ PDTC (Sigma) 阻断组(PDTC +LPS) ,以200μmolPL PDTC 预处理30 min 后,再用1mgPL LPS 刺激60 min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h 后测定培养液中NO 含量。 2 LPS 致大鼠肺泡Ⅱ型细胞凋亡及对Fas 抗原表达的影响? LPS 的浓度为1,10,100g/ mLLPS 刺激后, 肺泡Ⅱ 型细胞Fas mRNA、蛋白质表达均显著 增加( P < 0. 01) , LPS可诱导肺泡Ⅱ型细胞凋亡, 并在一定范围内呈量-效关系, 表 明LPS 对肺泡上皮的损伤效应, 除直接损伤作用外, 还可能通过诱导Fa s 抗原表达增 加, 而致细胞凋亡的方式进行 3 TNF2α为中心的肝细胞凋亡与 PS 所致小鼠肝损伤的关系 为中心的肝细胞凋亡与L 为中心的肝细胞凋亡与

小鼠称重后随机分成6 组,每组8 只:正常对照组为腹腔注射RP2MI 1640 培养液,0. 4 ml/ 只, 以0 h 表示;3 h 、6 h 、12h 、24 h 、30 h 分别代表小鼠腹腔注射L PS(4 mg/ kg)后3 、6 、 12 、24 、30 h ,
TNF-α是迄今为止发现的抗肿瘤作用最强的细胞因子,[1]是所有细胞因子中唯一具有直接杀伤肿瘤细胞的 因子。[ TNF能特异性地直接杀伤肿瘤细胞,而对正常细胞无不良影响

肿瘤坏死因子-α(TNF-α) (四) 肿瘤坏死因子 是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子 不仅具有选择性地杀伤某些肿瘤细胞, 吞噬细胞产生的单核因子, 是一种主要由单核 吞噬细胞产生的单核因子,不仅具有选择性地杀伤某些肿瘤细胞,而且 有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免疫学 免疫学检测方法 通过TNF受 有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免疫学检测方法1 通过 受
体介导的对肿瘤细胞的直接杀伤作用; 抑制细胞生长和诱导凋亡 、 体介导的对肿瘤细胞的直接杀伤作用;2抑制细胞生长和诱导凋亡 3、通过损伤肿瘤的血供系统而导致肿 瘤坏死4、通过引起肿瘤局部的炎症反应和机体的免疫系统发挥抗肿瘤作用 、逆转肿瘤细胞的多药耐药, 瘤坏死 、通过引起肿瘤局部的炎症反应和机体的免疫系统发挥抗肿瘤作用5、逆转肿瘤细胞的多药耐药, 增加对化疗药物的敏感性

1. TNFα诱导KS62/VCR和K562细胞凋亡及逆转其耐药作用的实验研究 TNFα浓度>100U/ml,作用时间>48小时,2株细胞均可见典型凋亡现象,以K562/VCR 细胞明显。(2)以TNFα 1000U/m1处理后,K562/VCR和K562细胞凋亡率分别为29.4% 和10.7%。 (3)K562/VCR经TNFα 1000U/ml处理72小时P-gp表达率从93. 6%降至82. 4%, bcl-2表达率从32.9%降至7.0%。(4)K562/VCR和K562细胞分别经TNFα 100U/ml和 1000U/ml处理后,VCR、Ara-C和VP-16的药物敏感性增加(P<0.05) 2. TNFα诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的时间效应1×108U/L 3 TNF-α对白血病K562及K562/ADM细胞hTERT及mdr1表达的抑制作用5×106U /L


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