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菌落总数检测(FDA与ISO对比)


菌落总数检测(FDA 与 ISO 对比) 菌落总数测定—菌落总数的概念 菌落总数是指在被检样品的单位重量(g) 、容积(ml)或表面积(cm2)内,所含能于 某种固体培养基上,在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。? 菌落总数测定—卫生学意义 判定食品被细菌污染的程度及其卫生质量。? 及时反映食品加工过程是否符合卫生要求,为被检食品卫生学评价提供依据。? 通常认为,食品中细菌数量

越多,则可考虑致病菌污染的可能性越大,菌落总数的多少 在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。 ? FDA BAM 菌落总数测定流程 1.检样 xg/mL+9xml 稀释液(磷酸盐缓冲液) 2.适当十倍稀释样品 3.选择 2~3 个连续适宜稀释度 各取 1mL 分别加入灭菌平皿内 (每个稀释度做两个平行) 4.每皿内加入适量平板计数琼脂(PCA) 5.菌落计数 FDA BAM 菌落计数方法 1.选择 25~250CFU 之间的菌落进行计数,计算公式如下: N=∑C/(1*n1+0.1*n2)*d? 2.所有平板的菌落数都不足 25CFU,报告 EAPC/ml(g)为<25*1/d。 EAPC:estimated aerobic plate count? 3.所有平板的菌落数都超过 250CFU,但不足 100/cm2 ,报告 EAPC/ml(g)为最接近 250CFU 的平板菌落数的估计值,乘以相应的稀释度。? 4.所有平板的菌落数都超过 100/cm2 ,计算平板的面积(直径为 90mm 的平板面积为 65cm2) 估计最高稀释度每 cm2 的菌落数, , 乘以相应平板面积作为该稀释度的菌落计数结果, 报告 EAPC/ml(g)为>65*100* 1/d。? 5.无法计数的平板报告 LA(Laboratory Accident) 。? 6.最终结果保留前两位有效数字。按照 4 舍 6 入,5 是奇进偶不进。? ISO4833-2003 菌落总数测定流程 1.检样 xg/mL+9xml 稀释液(磷酸盐缓冲液) 35 ℃ 48 ± 2h

2.适当十倍稀释样品 3.选择 2~3 个连续适宜稀释度 各取 1mL 分别加入灭菌平皿内 (每个稀释度做两个平行) 4.每皿内加入适量(12~15mL) 平板计数琼脂(PCA) , 30±1 ℃ ,72 ±3 h 5.菌落计数 ISO4833-2003 菌落计数方法 1.选择连续 2 个稀释度不超过 300CFU 的平板,且一个平板至少含 15CFU 进行计数,计 算公式如下: N=∑C/(n1+0.1*n2)*d? 2.所有平板的菌落数都不足 15CFU,计算 2 平板菌落的算术平均值 m,液体样品:NE=m 固体样品: NE=m×d-1? 3.无菌生长:液体样品:less than 1; 4.最终结果保留前两位有效数字。? 菌落总数测定几点说明: 1.由于检样中采用 30/35℃有氧条件下培养,因而并不是样品中实际的总活菌数,一些特 殊营养要求的细菌、厌氧菌、微需氧菌、以及非嗜中温细菌,均难以反映出来。? 2.鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而 在平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因而平板上所得菌落的数 字不应报告活菌数,而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位(colony forming units,CFU)报告。? 菌落总数测定几点要求: 1.每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过 15min, 主要为防止细菌 增殖和产生片状菌落。样液与琼脂应充分混合,避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。皿内琼 脂凝固后,不要长时间放置,然后倒置培养,可避免菌落蔓延生长。? 2.检样过程中应用稀释剂做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在 的污染。同时,检样过程中应在工作台上打开一块空白平板计数琼脂,其暴露时间应与检样 时间相当,以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。? 3.检样稀释液有时带有食品颗粒,为避免与细菌菌落发生混淆,可作一检样稀释液与平 板计数琼脂混合的平皿,不经培养,于 4 ℃放置,以便在计数检样时用作对照。? 固体样品:less than 1 ×d-1?


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